Предисловие

Физиология наука экспериментальная, все знания о деятельности органов и систем получены в опытах. Поэтому на лабораторных занятиях на кафедре нормальной физиологии НГМА студенты постигают основные законы жизнедеятельности, выполняя эксперименты на животных.

Целью настоящего пособия является знакомство студентов с методикой проведения опытов на наркотизированных животных (лягушки, крысы), исследований на человеке и биологических препаратах. В процессе постановки эксперимента студенты учатся общению с живым организмом, наблюдательности, умению выстраивать причинно-следственные отношения и обобщать полученные данные. У них должны формироваться профессиональные навыки и умения, необходимые в их дальнейшей врачебной деятельности.

Практикум включает работы по разделам: «Физиология крови», «Общие свойства возбудимых тканей», «Физиология ЦНС», «Физиология сердца и сосудистой системы». В их числе есть традиционные классические эксперименты на животных и современные инструментальные исследования на человеке.

Студенты должны знать принципы используемых на занятиях клинико-физиологических методов исследования. Уметь самостоятельно выполнить эксперимент на наркотизированном и ненаркотизированном животном и исследование некоторых физиологических показателей у человека. Уметь сформулировать цель эксперимента, объяснить логику работы, проанализировать и обобщить полученные данные и сделать соответствующие выводы. Уметь решать ситуационные задачи, используя полученные знания. В описание работ входит цель, объект исследования, подробный ход работы, требования к оформлению протоколов и выводов. Данное пособие отвечает требованиям, предъявляемым учебной программой МЗ по нормальной физиологии, и может быть использовано на всех факультетах Новосибирской медицинской академии.

Глава 1 физиология крови

1.1. КРовь как внутренняя среда организма

1.1.1. Определение осмотической резистентности эритроцитов по отношению к гипотоническим растворам

Цель работы: определить границу резистентности эритроцитов и диапазон возможности нормального существования клеток в гипотонических растворах.

Объект исследования – кровь человека.

Для оценки физико-химических свойств эритроцитов исследуют резистентность (стойкость) эритроцитов к различным воздействиям. Наибольшее распространение в клинической практике получило исследование осмотической резистентности эритроцитов.

При помещении эритроцитов в изотонический раствор (0,9% раствор хлорида натрия) форма и объем клеток не изменяются, так как количество воды, поступающее в эритроцит, будет равно количеству воды, выходящему из него.

В гипертонических растворах эритроциты сморщиваются, так как согласно осмотическим законам жидкость покидает клетку.

В гипотонических растворах вода поступает из окружающей среды в эритроциты, эритроциты набухают, увеличиваются в размерах, оболочка клеток разрывается и гемоглобин выходит в раствор, окрашивая его в красный цвет.

Осмотическая резистентность эритроцитов определяется такой концентрацией гипотонического раствора, при которой они не подвергаются гемолизу. Эритроциты одной и той же крови обладают неодинаковой осмотической резистентностью, поэтому различают начало гемолиза, то есть ту концентрацию гипотонического раствора, при которой гемолизу подвергаются наименее стойкие эритроциты (появляется слабое окрашивание гипотонического раствора жидкости), и полный гемолиз - ту концентрацию гипотонического раствора, при которой гемолизируются все эритроциты (раствор ярко окрашен, осадок отсутствует).

Для работы необходимы: донорская кровь, гипотонический раствор хлорида натрия разной концентрации (0,6%; 0,55%; 0,45%; 0,40%; 0,35%; 0,30%; 0,25%), восемь пробирок, штатив, глазная пипетка.

Проведение работы. В штатив помещают 8 пробирок, в каждую из которых налито по 2 мл гипотонического раствора хлористого натрия различной концентрации (от 0,6% до 0,25%). Затем в каждую пробирку глазной пипеткой капают по 2 капли дефибринированной крови. После заполнения всех пробирок кровью их встряхивают и оставляют стоять в течение часа при комнатной температуре. После этого по цвету раствора отмечают минимальную и максимальную осмотическую резистентность эритроцитов. Границы осмотической резистентности эритроцитов человеческой крови: минимальная - 0,48% и максимальная - 0,32% NaCl.

Оформление протокола. Записать полученные результаты в таблицу, оценить их, выявив наличие полного, частичного гемолиза или отсутствие его.

Таблица оформления протокола

№ пробирки	1	2	3	4	5	6	7	8
Концентрация раствора NaCl, % Количество Раствора, мл	0,6	0,55	0,5	0,45	0,4	0,35	0,3	0,25
	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
Результаты: гемолиза нет (-), гемолиз неполный (+-), гемолиз полный (+)

Вывод: Сравнить полученные результаты с физиологической нормой, дать определение понятий минимальной и максимальной резистентности эритроцитов, указать возможные клинические варианты изменений этого показателя.