1.3.3. Определение группы крови системы резус
1.3.3.1. Определение группы крови человека системы резус
с применением стандартной сыворотки
Цели работы: освоить методику определения групп донорской крови.
Объект исследования – кровь человека.
Для работы необходимы: донорская кровь, универсальная сыворотка, содержащая ант - Д - антирезус - антитела, 2 пробирки, пипетки, физиологический раствор, микроскоп.
Проведение работы
В обе пробирки внести по одной капле исследуемых эритроцитов (донорской крови). Затем добавить по 2 капли универсального реагента (сыворотки, содержащей антирезус – Д - агглютинины).
Содержимое пробирок перемешать, положив их сначала на один бок (в течение 1,5 минуты), затем – на другой на 1,5 минут. Такие манипуляции усиливают растекание смеси по стенкам пробирок и ускоряют агглютинацию. Как правило, агглютинация наступает в течение первой минуты, но для образования устойчивого комплекса «антиген-антитело», а также ввиду возможности замедленной реакции при слабовыраженной агглютинабельности эритроцитов, наблюдение проводят 3 минуты. Через 3 мин, оценивают результаты.
Перед чтением результатов, для исключения неспецифической агрегации эритроцитов, добавляют 5-8 мл физиологического раствора хлористого натрия. Смесь перемешивают, не взбалтывая, путем одно-двухкратного перевертывания пробирок.
Оценку результатов проводят визуально. Появление хлопьев из эритроцитов (агглютинатов) на фоне прозрачной жидкости указывает на наличие резус-фактора в исследуемой крови (положительная реакция). При отрицательной реакции в пробирке видна равномерно окрашенная в розовый цвет, слегка опалесцирующая жидкость.
Оформление протокола. Записать принцип метода, ход работы. Зарисовать результаты реакции при микроскопическом исследовании, например,
Вывод. Назвать и правильно записать группу крови, например, кровь резус положительная (Rh+) или резус отрицательная (Rh-). Обосновать это заключение. Дать определение резус - иммунизации. Зарисовать схему резус - иммунизации крови.
1.3.3.2. Определение группы крови системы резус
с помощью цоликлона анти - Д
Цели работы: освоить методику определения групп крови, определить группу донорской крови.
Объект исследования – кровь человека.
Действующим началом цоликлона анти Д являются моноклональные человеческие анти - Д - антитела. Последние вызывают агглютинацию эритроцитов, содержащих «Д» антиген.
Для работы необходимы: донорская кровь, цоликлон анти - Д, предметные стекла (чашка Петри), пипетка, стеклянная палочка.
Проведение работы. Принцип определения группы крови человека системы резус тот же, что и при определении по системе АВО.
На чашку Петри (предметное стекло) наносят большую капле (0,1 мл) цоликлона анти - Д.
Рядом с этой каплей помещают маленькую каплю исследуемой крови (0,01-0,05 мл).
Индивидуальной стеклянной палочкой смешивают кровь с цоликлоном анти - Д.
Через 20-30с после смешивания реагента с кровью начинают легкое покачивание чашки Петри и продолжают его в течение 3 минут.
Наблюдают за ходом реакции визуально.
Результаты реакции учитывают через 3 минуты. Положительный результат выражается в плотной крупнолепестковой реакции агглютинации.
Заключение о присутствии Д-антигена в исследуемых эритроцитах делают по наличию положительной реакции агглютинации: есть реакция агглютинации – кровь резус положительная (Rh+), нет агглютинации – кровь резус отрицательная (Rh-).
Оформление протокола. Записать принцип метода определения группы крови, ход работы. Зарисовать полученный на чашке Петри результат: обозначить содержание анти - Д- антител в капле цоликлона и указать отсутствие или наличие агглютинации, например,
Rh+ Rh-
группа
крови
цоликлон
анти -Д
неизвестная
кровь
(эритроциты)
Вывод. Назвать и правильно записать группу исследуемой крови (Rh+ или Rh-). Обосновать это заключение. Объяснить, реципиенту, с какой группой крови системы резус можно перелить Rh+, Rh- кровь. Дать определение резус - иммунизации. Зарисовать схему резус - иммунизации крови.
Задачи
Больному, укушенному ядовитой змеей было произведено обменное переливание крови. Для чего? Перелитая кровь была той же группы и резус принадлежности, что и у больного, однако возникли явления гемотрансфузионной несовместимости. В чем причина?
Установлено, что донор и реципиент имеют АВ (IV) Rh группу крови. Проба на индивидуальную совместимость дала реакцию агглютинации. Почему это могло произойти?
Определите, резус принадлежность исследуемой крови, если наблюдается реакция гемагглютинации антирезусной сыворотки. Обоснуйте ответ.
Больному произведено переливание крови в количестве 1200 мл. Группа крови донора и реципиента О (I) Rh+. Развился трансфузионный шок. Почему?
Сделайте обоснованный вывод о группе исследуемой крови (система АВО), если реакция гемагглютинации отсутствует во всех трех каплях стандартных сывороток.
Реакция агглютинации произошла с сыворотками первой и второй групп крови. Определите группу крови. Объясните причину агглютинации.
Реакция агглютинации произошла с сыворотками первой и третьей групп крови. Определите группу крови. Объясните причину агглютинации.
Произведено переливание одногруппной по системе ABO крови. При повторном переливании развился гемотрансфузионный шок. Почему это могло произойти.
Установлено, что донор и реципиент имеют A(II), Rh+ группу крови. Проба на индивидуальную совместимость дала реакцию агглютинации. Почему это могло произойти?
10.Человеку необходимо срочно перелить кровь и нет возможности определить ее резус-принадлежность. Какую кровь по системе резус безопасней перелить? Обоснуйте ответ.
11.Больному с резус-отрицательной кровью произведено первичное переливание резус-положительной крови донора. Через два года произведено повторное переливание резус-положительной крови. Какая разница в реакции крови при первичном и повторном переливании?
12.Реакция агглютинации произошла с сыворотками первой, второй и третьей групп. Определите группу крови. Объясните причину агглютинации.
для студентов ПЕДИАТРИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА
У новорожденного гемолитическая желтуха в результате резус конфликта. Кровь какой группы Вы перельете ребенку, если у него группа крови В (III) Rh+?