10 Вопрос
В водном растворе происходит самосборка мембран и замыкание мембран
с образованием липидных пузырьков, называемых липосомами.
ОДНОСЛОЙНЫЕ
МНОГОСЛОЙНЫЕ
Наиболее разработанными контейнерами для доставки лекарственных препаратов и генетического материала через гематоэнцефалический барьер являются липосомы.
Обеспечение «невидимости» липосом для иммунных клеток крови путём покрытия их поверхности полиэтиленгликолем (ПЭГ).
Открытие таких липосом в опухолях может производиться путём нагрева до точки фазового перехода
Векторные иммунолипосомы на основе антител к нейроспецифическим белкам
В экспериментах с липосомами в качестве векторных молекул применялись моноклональные антитела к нейроспецифическим белкам (GFAP GFAP , MBP, NSE). Эти эксперименты проводились с ПЭГилированнымииммунолипосомами, в которых с одним наноконтейнером размером 70-120 нм было конъюгировано примерно 90 молекул моноклональных антител. Факт связывания липосом с клетками определялся по появлению специфического красного свечения, обусловленного липидным флюоресцентным индикатором Dil, введенным в состав липосомных мембран. Это свечение появлялось уже при минимальной применявшейся дозе липосом и при самой короткой их инкубации с клеточной культурой, что доказывало адекватность векторной функции приготовленных наноконструкций по их связыванию с антигенами определённых клеток нервной ткани.
11 Вопрос
Мембранные липиды и белки способны диффундировать вследствие теплового движения. Если перемещение их молекул происходит в пределах одного мембранного слоя, то такой процесс называется латеральной диффузией; если же их молекулы перемещаются из одного слоя мембраны в другой, то такой процесс называется «флип-флоп» - переход. По сравнению с латеральной диффузией «флип-флоп»-переход происходит гораздо реже. Если при латеральной диффузии частота перескоков за секунду составляет около 3·107 , то среднее время между переходами молекулы фосфолипида с одной поверхности мембраны на другую измеряется в часах.
Коэффициент латеральной диффузии липидов лежит в пределах
10-7 -10-9 см2/с.
Скорость латеральной диффузии фосфолипидов в жидкокристаллическом бислое составляет около 2 мкм/сек.
При переходе бислоя в гелевое состояние скорость такой диффузии резко падает.
По кривой восстановления флуоресценции после фотоотбеливания (ВФПФ) можно определить время полувосстановления (t1/2) (в точке, где интенсивность флуоресценции равна F(0) + 0,5[F(∞) – F(0)] ).
Применительно к методу ВФПФ формулу Эйнштейна для диффузии <x2> = 4DLt, где <x2> - величина среднего квадратичного перемещения за время t; DL – коэффициент латеральной диффузии, можно преобразовать к виду: DL = (w2/4t1/2)γ , где w –радиус отбеливаемого участка, γ – рассчитываемая константа, зависимая от профиля луча и степени фотоотбеливания. Отсюда, зная время полувосстановления t1/2 можно вычислить DL и таким образом количественно охарактеризовать подвижность белков в мембране живой клетки.
Многие рецепторы подвижны в мембране живых клеток, их коэффициенты латеральной диффузии варьируют
в пределах 10-11 - 5•10-10 см2/с .
