Физиология крови

Техника взятия крови для анализа.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Овладение техникой взятия крови для анализа у человека.

ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ: Человек.

ОБОРУДОВАНИЕ: Стерильная игла – скарификатор однократного употребления, вата, 70%-й спирт, йод (спиртовая настойка), резиновые перчатки.

ХОД РАБОТЫ:

1. Смоченной спиртом ватой протереть концевую фалангу четвертого (безымянного) пальца левой руки исследуемого.

2. Взять скарификатор, пальцами другой руки слегка сдавить с боковых поверхностей подготовленную фалангу.

3. После подсыхания кожи фаланги произвести укол резким движением, чтобы кончик скарификатора вошел в мышцу до ограничения.

4. Первую каплю крови стереть сухой стерильной ватой и приступить к взятию крови для анализа.

5. Стереть остатки крови, смазать место укола йодом, приложить смоченную спиртом вату и прижать кончик пальца к ладони.

РЕЗУЛЬТАТ:

ВЫВОД:

Определение количества эритроцитов в крови.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Овладеть техникой подсчета эритроцитов с помощью счетной камеры, определить их содержание в крови и дать заключение о соответствии полученных данных имеющимся стандартам.

ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ: Кровь человека.

ОБОРУДОВАНИЕ: Микроскоп, счетная камера, покровные стекла, смесители, стаканчик, 70%-й спирт, йод, вата, 3%-й раствор хлорида натрия, консервированная кровь.

ХОД РАБОТЫ:

1. Взятие крови для анализа:

а) налить 3%-й раствор хлорида натрия в стаканчик;

б) сухим смесителем набрать кровь до отметки 0,5, насасывая ее грушей;

в) обтереть конец смесителя, набрать хлорида натрия до метки 101 для разведения в 200 раз;

г) осторожно перемешать кровь с реактивом.

2. Подготовка счетной камеры:

а) притереть покровное стекло к камере до появления колец Ньютона;

б) убрать из смесителя первую каплю, представляющую реактив, не смешанный с кровью;

в) поднести конец смесителя к краю покровного стекла и выпустить небольшую каплю;

г) через 1-2 мин начать подсчет.

3. Подсчет эритроцитов:

а) под малым увеличением микроскопа найти в камере сетку Горяева, затем перенести микроскоп на большое увеличение;

б) пользуясь правилом Егорова, подсчитать эритроциты в 5 расположенных по диагонали больших квадратах, разделенных на 16 малых;

г) данные заносить в предварительно подготовленную сетку.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

1. Данные подсчета по квадратам

ч		£	Lf
ё>	7-	Ъ>	9
6	Т	9	Т
ь"	//	Ч	5

3	!*>	tv	ь
?	/о	/0	<0
/			/(
		3

г? С	(О		(&
	9	Я
£	/<	ю	с;
7	/	%	>

•	/	ч	У
г	с?		?
	/V	и	2
к	и	9	У

2. 9	/3	(к
   v		г
   /«•	9		у:
   	/		У

   Расчет содержания эритроцитов в 1 мкл по формуле:

количество эритроцитов = ,

где а – количество эритроцитов в 5 больших квадратах;

б – количество малых квадратов, в которых считались эритроциты (16·5=80);

в – степень разведения крови (200 или 100).

1/4000 – объем жидкости над малым квадратом (мкл)

3. Расчет содержания эритроцитов в 1 л крови

Содержание эритроцитов в 1 мкл	Содержание эритроцитов в 1 л

ВЫВОД:

Определение количества лейкоцитов в крови.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Овладеть техникой подсчета лейкоцитов с помощью счетной камеры, определить их содержание в крови и дать заключение о соответствии полученных данных имеющимся нормативам.

ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ: Кровь человека.

ОБОРУДОВАНИЕ: Микроскоп, счетная камера, смесители (меланжеры), стаканчик, спирт, йод, вата, 5%-й раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовой синью, консервированная кровь.

ХОД РАБОТЫ:

1. Взятие крови для анализа:

а) налить 5%-ю уксусную кислоту в стаканчик;

б) сухим смесителем набрать кровь до метки 0,5;

в) обтереть конец смесителя, набрать кислоту до метки 11 для разведения в 20 раз;

г) осторожно перемешать кровь с реактивом.

2. Подготовка счетной камеры (см. Определение эритроцитов в крови).

3. Подсчет лейкоцитов:

а) под малым увеличением микроскопа подсчитать лейкоциты в 100 больших неразделенных квадратах сетки Горяева;

б) данные заносить в предварительно подготовленную сетку.

2. Расчет общего содержания лейкоцитов в 1 мкл по формуле:

Количество лейкоцитов = ,

где а – количество лейкоцитов в 100 больших квадратах;

б – число малых квадратов, в которых считались лейкоциты (16·100=1600);

в – степень разведения крови (20 или 10).

1/4000 – объем жидкости над малым квадратом, мкл.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Содержание лейкоцитов в 1 мкл	Содержание лейкоцитов в 1 л

ВЫВОД:

Определение содержания гемоглобина в крови по методу Сали.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Овладеть техникой определения количества гемоглобина в крови колориметрическим методом Сали, определить его содержание и дать заключение о соответствии полученных данных имеющимся нормативам.

ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ: Кровь человека.

ОБОРУДОВАНИЕ: Гемометр Сали, спирт, йод, вата, дистиллированная вода, 0,1Н-й раствор соляной кислоты, консервированная кровь.

ХОД РАБОТЫ:

1. В градуированную пробирку гемометра налить кислоту до круговой метки.

2. Набрать кровь в капилляр точно до нижней круговой метки, насасывая ее грушей.

3. Обтереть кончик капилляра ватой и осторожно выдуть кровь на дно пробирки с кислотой. Ополоснуть стенки капилляра повторными всасываниями и выдуваниями кислоты в пробирке.

4. Пробирку несколько раз встряхнуть и оставить на 5 мин.

5. Пипеткой добавлять в пробирку дистиллированную воду, доводя цвет раствора до цвета стандарта (раствор хлорида гематина соответствует 167 г/л гемоглобина).

6. Снять показания по нижнему мениску жидкости.

7. Выразить содержание гемоглобина в исследуемой крови в абсолютных единицах.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Единицы измерения гемоглобина	Содержание гемоглобина у исследуемого	Содержание гемоглобина в норме
		мужчины	женщины
г/л		130-160	120-140
г %		13-16	12-14

ВЫВОД:

Наблюдение различных видов гемолиза.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Выявить влияние гипотонической среды и некоторых химических веществ на оболочку эритроцита.

ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ: Кровь человека.

ОБОРУДОВАНИЕ: 5 пробирок, спирт, вата, изотонический и гипотонический растворы хлорида натрия, эфир, раствор аммиака, дистиллированная вода, консервированная кровь.

ХОД РАБОТЫ:

1. В одну пробирку налить 2 мл изотонического, во вторую – 2 мл гипотонического раствора, в третью – 2 мл дистиллированной воды. В каждую добавить по капле крови.

2. В две пробирки налить по 2 мл изотонического раствора, в одну из них добавить 3-5 капель аммиака, в другую – 0,5 мл эфира, в каждую внести по капле крови. Через 10 мин оценить степень прозрачности раствора.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Условия	Наличие или отсутствие гемолиза	Вид гемолиза
Изотоническая среда: 0,9% NaCI
Гипотоническая среда: 0,4% NaCI
Дистиллированная вода
Изотонический раствор + аммиак
Изотонический раствор + эфир

ВЫВОД:

Определение скорости оседания эритроцитов методом Панченкова.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Овладеть техникой определения СОЭ, определить ее и дать заключение о соответствии полученных данных имеющимся нормативам.

ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ: Кровь человека.

ОБОРУДОВАНИЕ: Аппарат Панченкова, скарификатор, 2 часовых стекла, вата.

ХОД РАБОТЫ:

1. Промыть капилляр цитратом натрия, набрать в него реактив до метки Р и выдуть на часовое стекло.

2. В тот же капилляр набрать кровь до метки К и смешать ее струей воздуха с цитратом. Произвести эту операцию дважды, чтобы получить соотношение крови 4:1.

3. Заполнить капилляр полученной смесью до метки К, поставить на штатив, отметить время.

4. Показания снимать через 60 мин по высоте столбика плазмы в капилляре, мм.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

ВЫВОД: