120. Обмен липидов в организме. Регуляция липидного обмена

Человек потребляет жир в виде нативного Ж, фосфолипида, и холестерола. Норма питания, в сутки не менее 70гр. В ЖКТ жиры расщепляются. Продукты гидролиза поступают в к-кишечника. Здесь в энтероцитах они ресинтезируются в человеческий жир. Триглицерида всасываются в виде хиломикронов, фосфолипиды и холестерин. Все идут в жирную ткань. ЖК идут в жировой запас, или связываются с альбуминами крови. Фосфолипиды пост-ют в кровь и во все к-орг-ма, т.к. и них сделаны вся мембрана к. Регуляция липидного обмена. При увеличений содержания Л в крови активируется инсулин. Инсулин акт-ет фосфодиэстеразу, снижающую сод-ие цАМФ, тормозящую осв-ие ЖК. Катехоламины, глюкагон, кортизол и тироксин, способствут разрушению ЖК. Основной показатель ЖК в крови, общий холестерин не менее 5.2 ммоль/л, триглицериды сыворотки крови не менее 2.3 ммоль/л, ЛПНП не менее 2.6 ммоль/л

1) Метод получения плазмы и сыворотки крови.

ПОЛУЧЕНИЕ ПЛАЗМЫ: Кровь кролика собирают в стеклянный стаканчик с 3,8р-ом цитрата натрия (соотношение консерванта и крови 1:9) . Кровь разливают в центрифужные пробирки уравновешивая их. Центрифугируют при 1000 об/мин 20мин. Плазму переносят в пенициллиновые флаконы и используют для дальнейших исследований. ПОЛУЧЕНИЕ СЫВОРОТКИ :Кровь кролика собирают в несколько центрифужных пробирок и перемешивают пастеровской пипеткой ...Процедуру периодически повторяют. Ставят пробирки в холодильник на 1 час при температуре 4 градуса. уравновешивают пробирки и цетрифугируют 20мин при 1000 об/мин. Сыворотку крови переносят в пенициллиновые флаконы.22:48:38

2) Методы подсчета эритроцитов с использованием счетной камеры Горяева.

Берут заполненный меланжер для эритроцитов , зажав его концы 3 и 1пальцами , в течение одной минуты встряхивают. После тщательного перемешивания , выпустив предварительно наружу 1-2капли, наносят небольшую капельку на сетку камеры, предварительно путем притирания плотно закрытую покровным стеклышком . Излишки р-а при этом стекают в желобки. Заполнив камеры, ставят ее под микроскоп. Если фор. эл-ты расположены равномерно, приступает к подсчету эритроцитов. Чтобы получить данные необходимо подсчитать число э. в пяти больших квадратах, расположенных в разных местах сетки, например: по диагонали.

3)Методы подсчета лейкоцитов с использованием камеры Горяева.

Берут заполненный меланжер для лейкоцитов, зажав его концы 3и 1 пальцами, в течение одной мин встряхивают его, после перемешивания ,выпустив предварительно наружу 1-2 капли крови наносят небольшую капельку на сетку камеры , предварительно путем притирания плотно закрытую покровным стеклышком . Излишки р-а стекают в желобки. Для получения результатов подсчет произв в 25 больших квадратах, что составляет 400мал.квадратиков.Формула для вычисления кол-ва лейкоцитов в 1мл крови. X=B*400*20 и это все разделить на 400, где x-искомое число лейкоцитов в 1мл крови, в число лейк в 20больших квадратах.

4) Определение кол-ва гемоглобина в крови методом Сали.

В среднюю пробирку наливают 0,1н р-р хлористо-водородной кислоты до метки. Пипеткой берут 20мм в кубе крови из пальца сразу выдувают кровь на дно пробирки, так, чтобы верхний слой к-ты оставался неокрашенным. Не вынимая пипетку споласкивают ее кислотой. После содержимое пробирки перемешивают ударяя пальцем по дну пробирки. Затем ставят в штатив на 5-10 мин. За это время гемоглобин полностью превращается в солянокислый гематин. Затем в пробирку добавляем по каплям дистил. воду , перемешивая р-р стеклянной палочкой, до тех пор пока цвет р-а не будет одинаков цветом стандарта. цифра , стоящая на уровне полученного р-а показывает содержание гемоглобина в испытуемой крови.