Занятие № 6.

Тема: Определение билирубина и его фракций методом Иендрашика.

Цель самоподготовки: после изучения данной темы Вы должны

Иметь практический опыт:

• определять показатели белкового обмена

Знать:

• промежуточный обмен гемоглобина; образование билирубина, билирубинглюкоронидов в печени, пигментов кала и мочи;

• значение определения билирубина и его фракций в сыворотке крови, пигментов кала и мочи в дифференциальной диагностике желтух.

Уметь:

• определять билирубин и его фракции в сыворотке крови по методу Иендрашика;

• провести калибровку для определения билирубина и его фракций.

Литература для самоподготовки:

1. М.В. Ермолаев, Л.П. Ильичева, «Биологическая химия», М., Медицина, 1989г.

2. Л.М. Пустовалова, «Основы биохимии», Ростов-на-Дону, «Феникс», 2003г.

3. Лекции по разделу 5. Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей белкового обмена.

4. Информационный блок по разделу 5. Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей белкового обмена.

План изучения темы:

1. Повторите теоретический материал по теме занятия по конспекту лекции и учебнику.

2. Изучите обмен билирубина.

3. Внимательно прочитайте методику определения билирубина и его фракций по методу Иендрашика, отметьте особенности методики.

4. Повторите принципы построения калибровочных графиков.

5. Приготовьте миллиметровую бумагу для построения калибровочного графика на билирубин.

6. Выполните прилагаемые задания по теме занятия.

7. Ответьте на контрольные вопросы.

Задания к занятию № 6

1. Дополните схему катаболизма гема:

Гемоглобин

О2 СО2

В ердоглобин

Биливердин

Б илирубин ……………..

альбумин

кровь

П ечень

Билирубин ……………..

К ишечник

У робилиноиды

кал моча печень

……… …..…… ….…….

2. Проведите сравнительный анализ свойств непрямого и прямого билирубина:

   	Непрямой билирубин	Прямой билирубин
   1. Место образования
   2. Токсичность
   3. Отношение к солнечному свету
   4. Растворимость в воде
   5. Растворимость в липидах
   6. Через почечный фильтр (проходит или нет)
   7. Отношение к реакции с диазореактивом
   8. Связывается в печени с
   9. Нормальные показатели

3. Перечислите функции, выполняемые гепатоцитом по отношению к билирубину:

• ________________________________________________________

• ________________________________________________________

• ________________________________________________________

4. Ознакомьтесь с методикой определения билирубина по методу Иендрашика и выпишите особенности данной методики

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

5. Внимательно прочитайте текст. Отметьте неточности или ошибки в изложении:

Время жизни эритроцитов составляет – 110-120 дней. Состарившиеся эритроциты распадаются, преимущественно в кровеносном русле. Освобождающийся из гемоглобина гем повторно не используется: он распадается с образованием железа и желчных пигментов. Железо и желчные пигменты выводятся из организма.

Образовавшийся билирубин хорошо растворим в воде, малотоксичен, называется непрямым билирубином, так как он взаимодействует с диазореактивом после обработки кофеином. Непрямой билирубин доставляется в печень при помощи белка гаптоглобина. В печени непрямой билирубин (связанный) отделяется от белка и поступает в гепатоцит. Гепатоцит по отношению к билирубину выполняет следующие функции:

1. функция захвата;

2. функция коньюгации: непрямой билирубин подвергается реакции коньюгации с глюкуроновой кислотой, образуется прямой или свободный билирубин (преимущественно моноглюкоронид билирубина).

3. Функция экскреции – по градиенту концентрации поступает в желчные капилляры.

Прямой билирубин плохо растворим в воде, не проходит через почечный фильтр, чувствителен к свету, токсичен и дает прямую реакцию с диазореактивом.

6. Где образуется непрямой билирубин?

______________________________________________________

7. В какой форме происходит транспорт билирубина по крови и почему?

____________________________________________________________________________________________________________

8. Где образуется прямой билирубин?

______________________________________________________

9. Как называются производные пигмента билирубина

в моче ________________________________________________

в кале _________________________________________________

Контрольные вопросы к занятию № 6

1. Дайте определение белков.

2. Биологическое значение белков.

3. Норма белка в питании, от чего она зависит, «физиологический минимум» белка.

4. Назовите виды азотистого баланса, приведите примеры.

5. Белковые резервы.

6. Переваривание белков в желудочно-кишечном тракте.

7. Гниение белков в кишечнике.

8. Пути использования аминокислот в организме.

9. Этапы биосинтеза белка.

10. Деградация аминокислот: дезаминирование, переаминирование, непрямое дезаминирование, декарбоксилирование.

11. Конечные продукты распада аминокислот. Пути обезвреживания аммиака.

12. Синтез мочевины.

13. Физиологическое значение белков крови.

14. Общий белок сыворотки крови. Нормальные показатели, клиникодиагностическое значение гипо- и гиперпротеинемий.

15. Понятие о диспротеинемии, парапротеинемии, дефектопротеинемии.

16. Белковые фракции. Отдельные представители и их клиническое значение.

17. Изменение белковых фракций при различных видах патологии:

• остром воспалении

• хроническом воспалении

• заболеваниях печени

• заболеваниях почек

• миеломной болезни

• иммунодефиците

18. Желчные пигменты. Обмен билирубина.

19. Определение билирубина и его фракций по методу Иендрашика: принцип метода, расчет, нормальные показатели.