- •Раздел 5. Проведение лабораторных биохимических исследований
- •Введение.
- •Требования к студентам при изучении предмета мдк.03.01. Теория и практика лабораторных биохимических исследований.
- •Желаем успехов в изучении биохимии! Занятие № 1.
- •Химия белков.
- •Биологическое значение белков
- •О бщий белок
- •Занятие № 2.
- •Занятие № 3.
- •Задача № 2.
- •Занятие № 4.
- •Задача № 1.
- •Занятие № 5.
- •Занятие № 6.
- •Занятие № 7.
- •Занятие № 8.
- •Нуклеиновые кислоты
- •Занятие № 9.
- •Приложение. Методы исследования белкового обмена.
- •Определение общего белка в сыворотке крови по биуретовой реакции.
- •Построение калибровочного графика.
- •Определение мочевины в крови и моче.
- •Определение мочевины по реакции с диацетилмонооксимом.
- •Определение мочевины в биологических жидкостях уреазным (фенол-гипохлоритным методом)
- •Определение креатинина в биологических жидкостях.
- •Определение креатинина в биологических жидкостях по цветной реакции Яффе (с депротеинированием)
- •Нормальные величины креатинина в сыворотке крови:
- •Ход определения креатинина в моче.
- •Определение креатинина в биологических жидкостях псевдокинетическим двухточечным методом, основанным на цветной реакции Яффе без депротеинирования.
- •Клиренс эндогенного креатинина.
- •Определение билирубина и его фракций по методу Иендрашика.
- •Коллоидные пробы печени.
- •Тимоловая проба.
- •Сулемовая проба.
- •Проба Вельтмана.
- •Определение мочевой кислоты.
- •Определение мочевой кислоты по Мюллеру-Зейферту.
- •Уриказный метод определения мочевой кислоты.
- •Прямое спектрофотометрическое определение мочевой кислоты.
- •Устройство рефрактометра.
- •Литература
Задача № 1.
Мужчина 56 лет обратился к врачу с жалобами на снижение массы тела, общую слабость и апатию на протяжении последних 6 месяцев. Все это время мочевыделение у него было более обильным, чем обычно, особенно по ночам. В моче обнаруживался белок, но не было глюкозы. Для анализа была взята проба крови:
мочевина – 43 ммоль/л
креатинин – 640 мкмоль/л
общий белок – 41 г/л
альбумин – 28 г/л
Оцените полученные данные. Объясните, с поражением какого органа могут быть связаны данные изменения и их механизм?
____________________________________________________________________________________________________________________
11. Задача № 2.
При плановом обследовании спортсменов у пациента были получены следующие данные исследования сыворотки крови:
общий белок – 71 г/л
альбумин – 45 г/л
мочевина – 7,9 ммоль/л
креатинин – 120 мкмоль/л
Накануне исследования молодой человек интенсивно тренировался.
Оцените полученные данные. Есть ли необходимость в дальнейшем обследовании? Ответ поясните.
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Контрольные вопросы к занятию № 4
Креатин и креатинин: биологическое значение и метаболизм.
Клинико-диагностическое значение определения креатина и креатинина в сыворотке крови и моче.
Методики определения креатинина по цветной реакции Яффе с депротеинированием и без депротеинирования: принцип метода, ход определения, расчет результатов.
Метаболизм мочевой кислоты и клинико-диагностическое значение ее определения.
Метаболизм индикана и клинико-диагностическое значение его определения.
Роль печени в белковом обмене.
Патология обмена белков: белковое голодание, квашиоркор.
Аминоацидурии.
Наследственно обусловленные нарушения обмена отдельных аминокислот.
Занятие № 5.
Тема: Определение белковых фракций методом электрофореза.
Цель самоподготовки: после изучения данной темы Вы должны
Иметь практический опыт:
определять показатели белкового обмена
Знать:
причины гипо- и гиперпротеинемий, диспротеинемии, парапротеинемии;
значение протеинограмм в диагностике заболеваний;
пройденные методики исследования белкового обмена: принцип метода, ход определения, расчет результатов;
клинико-диагностическое значение и нормальные показатели белкового обмена.
Уметь:
подсчитать протеинограмму по данным оптической плотности.
Литература для самоподготовки:
М.В. Ермолаев, Л.П. Ильичева, «Биологическая химия», М., Медицина, 1989г.
Л.М. Пустовалова, «Основы биохимии», Ростов-на-Дону, «Феникс», 2003г.
Лекции по разделу 5. Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей белкового обмена.
Информационный блок по разделу 5. Проведение лабораторных биохимических исследований по определению показателей белкового обмена.
План изучения темы:
Продолжить подготовку к контрольной работе по теме «Обмен белков в норме и патологии».
Выписать в конце дневника показатели белкового обмена с указанием диапазона нормальных величин и размерности.
Составить сводную таблицу по методикам исследования белкового обмена.
Повторить контрольные вопросы к занятиям № 1-4.
Повторите методики исследования белкового обмена: метаболизм показателя, нормальные величины, методики определения, принцип методов, клинико-диагностическое значение их определения.
Выполните прилагаемые задания по данной теме.
Задания к занятию № 5
Составьте сводную таблицу по методикам исследования белкового обмена.
Название показателя |
Методы определе-ния |
Принцип метода |
Условия колоримет-рирования |
Нормаль-ные величины |
Клинико-диагнос-тическое значение |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Сводную таблицу лучше начать делать в отдельной ученической тетради на развернутом листе с тем, чтобы далее продолжить внесение показателей по другим видам обмена. В графе «Условия колориметрирования» укажите окраску, развивающуюся в процессе цветной реакции (цветной квадрат). В графе «Нормальные величины» - коэффициент пересчета в другие единицы измерения.
Вспомните факторы, влияющие на определение общего белка сыворотки крови биуретовым методом:
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Укажите патологические состояния, соответствующие гипер- и гипопротеинемии:
А. гиперпротеинемия
1. нефротический синдром
Б. гипопротеинемия
2. миеломная болезнь
3. заболевания желудка и кишечника
4. вирусный гепатит
Проведите анализ показателей содержания общего белка в сыворотке крови и укажите изменения по отношению к норме.
При обследовании пациентов получены следующие цифры содержания общего белка:
40 г/л –
94 г/л –
67 г/л –
102 г/л –
58 г/л –
Укажите значения нормальных величин в сыворотке крови для каждого показателя:
Показатель
Нормальные величины
общий белок
альбумин
мочевина
креатинин
индикан
мочевая кислота
Выберите реактивы, используемые для определения каждого показателя:
А. общий белок
1. пикриновая кислота
Б. альбумин
2. сульфат меди
В. мочевина
3. NaOH
Г. креатинин
4. ТXУ
Д. индикан
5. диацетилмонооксим
Е. Мочевая кислота
6. уреаза
7. уриказа
8. р-р Фолина
9. H2SO4
10. бромкрезоловый зеленый
Правильны ли нижеприведенные высказывания (после каждого предложения напишите «да», если согласны с высказыванием, или «нет», если высказывание неправильно):
Азотемия – это изменение компонентов остаточного азота в моче.
Большую часть остаточного азота составляет мочевина.
Относительная азотемия может наблюдаться при вливании большого количества жидкости.
Азотемия может подразделяться на продукционную и почечную.
Почечная азотемия наблюдается при нарушении выделительной функции почек при острой или хронической почечной недостаточности.
Продукционная азотемия может быть связана с усиленным распадом тканей, например, при краш-синдроме.
Какой вид азотемии не указан в тексте, его возможные причины?
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Изучите пробу клиренс эндогенного креатинина.
Какую функцию почек отражает проба? _____________________
________________________________________________________
Выпишите возможные варианты проведения пробы:
I вариант (с водной нагрузкой) |
II вариант |
|
|
Что такое клиренс? _______________________________________
________________________________________________________
Как подсчитывают КФ - ?
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
КР - ?
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Какие показатели нужно иметь для расчета пробы?
________________________________________________________
________________________________________________________
________________________________________________________
Какие дополнительные показатели нужно иметь для более точной оценки клиренса?
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Объясните следующую запись:
Т риптофан индол индикан
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Прочитайте алгоритм определения биохимического показателя в сыворотке крови. Какой это показатель и какой методикой он определяется?
Вносят в химическую пробирку рабочий раствор, смешивая р-р реагента и раствор H2SO4 в соотношении 1 : 1.
В опытную пробирку добавляют сыворотку крови, в стандарт – стандартный раствор данного вещества. Контролем служит контроль реактивов.
Выдерживают пробы 10 минут на кипящей водяной бане.
Охлаждают 2-3 минуты в струе холодной воды.
Колориметрируют.
Рассчитывают содержание вещества в пробе по концентрации стандартного раствора.
…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………
11. Задача № 1
Подсчитайте клубочковую фильтрацию и канальцевую реабсорбцию по следующим данным, сделайте вывод.
Суточный диурез – 1600 мл
Креатинин сыворотки – 0,084 ммоль/л
Креатинин мочи – 7,6 ммоль/л
__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
12. Задача № 2
После проведения пробы «клиренс эндогенного креатинина» были получены следующие данные:
клубочковая фильтрация – 72 мл/мин
канальцевая реабсорбция – 95 %
Оцените данные, полученные у пациента. Что можно сказать о выделительной функции почек?
______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Контрольные вопросы к занятию № 5
Схема исследования белкового обмена.
Определение общего белка сыворотки крови биуретовым методом: принцип метода, нормальные показатели, клинико-диагностическое значение.
Принципы построения калибровочных графиков.
Построение калибровочного графика для определения общего белка биуретовым методом.
Определение альбумина в сыворотке крови: принцип метода, нормальные показатели, клинико-диагностическое значение.
Определение мочевины в биологических жидкостях: основные методы, принцип методов, особенности проведения методик, нормальные показатели, метаболизм мочевины, клинико-диагностическое значение определения.
Определение креатинина по цветной реакции Яффе: принцип метода, нормальные показатели, метаболизм креатинина, клинико-диагностическое значение определения. Источники ошибок при проведении методики.
Клиренс эндогенного креатинина.
Построение калибровочного графика для определения креатинина.
