- •Раздел 5. Проведение лабораторных биохимических исследований
- •Введение.
- •Требования к студентам при изучении предмета мдк.03.01. Теория и практика лабораторных биохимических исследований.
- •Желаем успехов в изучении биохимии! Занятие № 1.
- •Химия белков.
- •Биологическое значение белков
- •О бщий белок
- •Занятие № 2.
- •Занятие № 3.
- •Задача № 2.
- •Занятие № 4.
- •Задача № 1.
- •Занятие № 5.
- •Занятие № 6.
- •Занятие № 7.
- •Занятие № 8.
- •Нуклеиновые кислоты
- •Занятие № 9.
- •Приложение. Методы исследования белкового обмена.
- •Определение общего белка в сыворотке крови по биуретовой реакции.
- •Построение калибровочного графика.
- •Определение мочевины в крови и моче.
- •Определение мочевины по реакции с диацетилмонооксимом.
- •Определение мочевины в биологических жидкостях уреазным (фенол-гипохлоритным методом)
- •Определение креатинина в биологических жидкостях.
- •Определение креатинина в биологических жидкостях по цветной реакции Яффе (с депротеинированием)
- •Нормальные величины креатинина в сыворотке крови:
- •Ход определения креатинина в моче.
- •Определение креатинина в биологических жидкостях псевдокинетическим двухточечным методом, основанным на цветной реакции Яффе без депротеинирования.
- •Клиренс эндогенного креатинина.
- •Определение билирубина и его фракций по методу Иендрашика.
- •Коллоидные пробы печени.
- •Тимоловая проба.
- •Сулемовая проба.
- •Проба Вельтмана.
- •Определение мочевой кислоты.
- •Определение мочевой кислоты по Мюллеру-Зейферту.
- •Уриказный метод определения мочевой кислоты.
- •Прямое спектрофотометрическое определение мочевой кислоты.
- •Устройство рефрактометра.
- •Литература
Устройство рефрактометра.
Принцип работы рефрактометра основан на том, что луч света при прохождении через какую-либо плотную среду изменяет свое направление - преломляется, отклоняясь на определенный угол, чем плотнее среда, тем больше угол преломления и отклонения /рефракции/. По этому углу и судят о плотности среды.
Рефрактометр применяется для определения концентрации вещества путем измерения угла преломления в нем светового луча.
Прибор состоит из механической и оптической частей.
К оптической части относятся
1.окуляры
2.осветительная призма осветительной камеры
3.осветительное зеркало
К механической части относятся
1.основание прибора
2.стойка
3.корпус прибора
4.камера осветительной призмы
5.камера измерительной призмы
6.ручка вращения корпуса вместе с камерой измерительной призмы
7.винт юстировочного механизма
8.ключ к юстировочному механизму
9.дисперсионный компенсатор для создания контрастной границы светотени \
Правила работы с рефрактометром.
1.Прибор устанавливают в удобном для измерения положении - обращенным к наблюдателю и наклоненным до упора к нему.
2.Приступают к проверке правильности установки шкалы на «0» с помощью определения показателя преломления воды (в норме 1,333). Для этого:
а\ корпус камеры движением руки от себя переводят в горизонтальное положение;
б\ вращением рукоятки полированную грань измерительной призмы ставят горизонтально и на нее наносят пипеткой 2-3 капли дистиллированной воды. Затем опускают на шарнире камеру осветительной призмы до соприкосновения с камерой измерительной призмы и прижимают друг к другу рукояткой замка.
Корпус вместе с камерой устанавливают в прежнее положение (см.пункт 1).
Устанавливают с помощью зеркала полную освещенность поля зрения.
Вращением окуляров добиваются наиболее резкого изображения шкалы (левый окуляр) и сетки с границей светотени (правый окуляр).
Для полного устранения дисперсионной (радужной) окраски границы светотени при помощи ручки вращают дисперсионный компенсатор.
С помощью ручки устанавливают визирную линию сетки на деление шкалы показателей преломления, соответствующей 1,333. При данном положении граница светотени должна проходить через точку пересечения линии сетки.
Если граница светотени не проходит через точку пересечения линий сетки, то при помощи юстировочного ключа вращают винт юстировочного механизма до тех пор, пока граница светотени не совместится с точкой пересечения сетки.
9.После проверки правильности установки прибора на «0», приступают к исследованию.
Открывают измерительную призму и насухо вытирают тряпочкой.
На сухую измерительную призму наносят каплю исследуемой сыворотки и закрывают камеру.
Смотрят в правый окуляр - граница светотени будет смещена. Поворотом ручки подводят границу светотени к точке пересечения линий сетки.
Снимают показания по шкале под левым окуляром.
Открывают камеру, убирают сыворотку, осторожно промывают дистиллированной водой, вытирают насухо.
Проводят следующее определение.