Занятие № 2.1.4
Энтеровирусные инфекции. Лабораторная диагностика гепатитов А, Е, полиомиелита, инфекций, вызываемых вирусами Коксаки, ECHO, ротавирусами
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:
изучить основные группы энтеровирусов; биологические свойства возбудителей гепатитов А, Е, полиомиелита, вирусов Коксаки, ECHO, ротавирусов; принципы вирусологической диагностики энтеровирусных инфекций.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
Характеристику биологических свойств возбудителей.
Клинику, патогенез, эпидемиологию, восприимчивость, иммунитет, механизм передачи возбудителей при энтеровирусных инфекциях.
Принципы лабораторной диагностики гепатитов А, Е, полиомиелита, инфекций, вызванных вирусами Коксаки, ECHO, ротавирусами.
Основы профилактики гепатитов А, Е, полиомиелита,
инфекций вызванных вирусами Коксаки, ECHO, ротавирусами.
Препараты для диагностики, лечения и профилактики энтеровирусных
инфекций.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
составлять алгоритм вирусологического обследования пациента с энтеровирусной инфекцией;
интерпретировать результаты вирусологических исследований с целью диагностики энтеровирусных инфекций;
классифицировать препараты в соответствии с их назначением.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ВЛАДЕТЬ:
алгоритмом лабораторной диагностики инфекционных болезней;
методами анализа и оценки результатов лабораторной диагностики по выявлению возбудителей вирусных кишечных инфекций.
Ситуационная задача 1
В Индию прибыла группа врачей по линии ВОЗ для выявления больных полиомиелитом и оказания помощи в проведении поголовной вакцинации против полиомиелита. В одной из обследованных деревень к врачам принесли из многодетной семьи мальчика 6 лет, который заболел 5 дней назад. Внезапно повысилась температура, сильно заболела голова, была повторная рвота, боль в руках и ногах. При обследовании: высокая температура, резкая слабость, менингеальные симптомы, на правой ноге снижен мышечный тонус, резко ослаблен сухожильные рефлексы, стопа свисает. При пункции спинномозгового канала цереброспинальная жидкость вытекла под повышенным давлением, увеличено количество лимфоцитов, бактерии не выделены. Поставлен предварительный диагноз «Паралитическая форма полиомиелита». Каким путем мог заразиться мальчик? Как проводиться специфическая активная профилактика полиомиелита? Существует ли опасность заражения других детей этой семьи, что необходимо предпринять? Какие методы необходимо использовать для лабораторной диагностики?
__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 1. Принципиальная лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций
Цель: изучить схему лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций. Самостоятельная работа: отметить основные направления и этапы лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций (см. теоретическую справку). Отметить необходимость и информативность используемых методов.
И
сследуемый
материал:
____________________
____________________
____________________
Работа № 2. Строение энтеровирусов
Цель: изучить морфологию энтеровирусов.
Самостоятельная работа: используя атлас, теоретическую справку, зарисовать строение вирусов полиомиелита, ECHO, Коксаки, гепатитов А и Е, ротавирусов; описать, сделать вывод.
пикорнавирусы гепевирусы (вирус ГЕ) реовирусы (ротавирус)
Вывод:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 3. Вирусологическая диагностика энтеровирусов
Методические указания
Идентификацию вирусов проводят в различных серологических реакциях, используя известные специфические антитела. Например, вирусы полиомиелита можно дифференцировать от вирусов Коксаки А и В, ECHO в РСК, используя антитела к общему антигену (VP-4) для всех типов вирусов полиомиелита.
В реакции использована диагностическая сыворотка, содержащая антитела к общему (внутреннему) антигену вируса полиомиелита VP-4 и исследуемый вируссодержащий материал.
Тип вируса полиомиелита определяют в реакции нейтрализации по цветной пробе, используя антитела к поверхностным антигенам вирусов полиомиелита 3-х типов (VP-1, VP-2 и VP-3).
Самостоятельная работа
А) Цель: учесть результат РСК, поставленной с целью идентификации вируса полиомиелита, выделенного от больного с подозрением на полиомиелит.
Направление:___________________________________________________________________
Ингредиенты:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка:
Опыт КС КД КГС
Результат:_____________________________________________________________________
Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________
Б) Определить тип вируса полиомиелита в реакции нейтрализации по результату постановки цветной пробы, используя антитела к поверхностным антигенам вирусов полиомиелита 3-х типов (VP-1, УР-2 и VP-3). Учесть результат реакции. Сделать вывод.
Методические указания
Цветная проба для обнаружения вируса полиомиелита в культуре ткани применяется наряду с изучением цитопатического эффекта, вызываемого вирусом в культуре тканей. В пробирки с культурами тканей и питательной средой вносят исследуемый материал и индикатор феноловый красный, пробирки ставят в термостат. В этом случае, если вирус не размножается в культуре ткани, кислые продукты метаболизма клеток поступают в среду, которая приобретает желтую окраску. Если же полиовирусы размножаются в клетках тканей и пораженные клетки гибнут, то среда сохраняет первоначальный красный цвет, так как в неё не поступают кислые продукты метаболизма клеток и не изменяют её окраску. При рН 7,4-7,8 цвет среды красный, при рН 7,2 — оранжевый, при рН 7,0 и ниже — жёлтый. Таким образом, по изменению цвета среды с культурой тканей, куда внесён исследуемый материал и индикатор, можно судить о поражении клеток вирусами.
Направление:___________________________________________________________________
Ингредиенты:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка:
|
Диагностические сыворотки, содержащие антитела к поверхностным антигенам вируса полиомиелита |
Контроль среды |
Контроль культуры клеток |
Контроль вируса |
||
|
VP-1(тип1) |
VP-2 (тип2) |
VP-3 (типЗ) |
|
|
|
Результат реакции
|
|
|
|
|
|
|
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 4. Серологическая диагностика полиомиелита
В вирусологическую лабораторию поступили парные сыворотки больного с диагнозом «Полиомиелит». Поставлена РН по методу цветной пробы поставлена с полиомиелитным диагностикумом типа 1 и парными сыворотками больного. Учесть и описать реакцию по схеме: направление, механизм, ингредиенты, результат, вывод.
Цель: учесть результат РН, поставленной с целью выявления Ат к вирусу полиомиелита в сыворотке крови пациента.
Направление:___________________________________________________________________
Ингредиенты:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Механизм:
Постановка:
1 неделя
2 неделя
1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 КВ КК КСр
Результат:_____________________________________________________________________
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Подпись преподавателя_________________________________________________________
Самостоятельная работа студента во внеурочное время:
Классифицировать предложенные антимикробные препараты в соответствии с их назначением (профилактические, диагностические, лечебные).