77. Стерилизация инъекционных растворов в аптеке и на фармацевтических предприятиях Тепловая и газовая стерилизация. Проверка герметичности ампул.

Стерилизация ампулированных растворов

Тепловая стерилизация. Ампулы и флаконы с раствором стерилизуют в заводских условиях насыщенным паром при избыточном давлении О,11 ±0,02 мПа (1,1 zir0,2 гкс/см2, температура 120±2 °С) или 0,2 ± ±0,02 мПа (2,2±0,2 кгс/см2 — 132±2 °С) в паровых стерилизаторах типа АП-7, АП-18.

С терилизатор имеет две двери, через одну происходит загрузка нестерильной продукции, через другую — выгрузка простерилизованной (2). Корпус стерилизатора прогревается глухим паром, чтобы не было его конденсации в рабочей камере. Затем в стерилизационную камеру (4) для вытеснения воздуха подается острый пар (8). Отсчет времени начинается с момента достижения заданного давления по манометру. Стерилизаторы оснащены автоматической контрольной аппаратурой, типа прибора Бабенкова, с помощью которой непрерывно на контрольной ленте записывается давление и время. Кроме этого в четыре разные точки камеры перед стерилизацией помещают макси¬мальные термометры и регистрируют их показания. ГФ для контроля за режимом стерилизации предла¬гает применять вещества с известной температурой плавления, например, кислоту бензойную — 122—124,5 °С; сахарозу — 180 °С, динитрофенилгидразин — 195 °С. Стерилизаторы оснащаются предохранительными клапанами (5). Условия стерилизации готовой продукции указаны в регламентах и нормативно-технической документации.

В ампульном производстве используется метод воздушной стерилизации при температуре 180 или 200 °С. Лучшими являются стерилизаторы с ламинарным потоком стерильного воздуха, нагретого до требуемой температуры, что улучшает создание равномерного температурного поля и устраняет загрязнения окалиной от обогреваемых стенок и из воздуха в момент выгрузки.

Стерилизация фильтрованием. Эффект достигается при применении мембранных и других фильтров с раз¬мером пор 0,22 и 0,3 мкм. Для этой цели выпуска¬ются фильтры Владипор из ацетатцеллюлозы марки МФА-0,2 и МФА-0,3 с размерами пор соответственно 0,2 и 0,3 мкм. Перед работой фильтры промывают в подходящем растворителе, указанном в паспорте и стерилизуют. ГФ рекомендует стерилизовать фильтры диаметром 13 и 25 мм при температуре 120±2 °С — 15 мин; 47, 50, 90 и 142 мм при температуре 120± ±2 °С — 30 мин; 293 мм — 45 мин в специальных сте¬рилизационных коробках или упакованными в два слоя бязи и пергамента.

Радиационная стерилизация. Для бактерицидного эффекта достаточно от 15 до 25 кГр. Верхний предел необходим для инактивации спор. Источниками ионизирующих излучений служат: долгоживущие изотопы 60Со27, l3'Cs55, ускорители электронов прямого действия и линейные ускорители электронов.

Газовая стерилизация. Применяется для термолабильных веществ. Объекты могут стерилизоваться в пластмассовой упаковке, проницаемой для газов. В герметическую камеру вводят смесь этилена оксида и углерода диоксида в соотношении 9:1. Время стерилизации — 4—6 ч при температуре 43—45 °С под дав-лением 196133 Н/м2. После стерилизации этиленоксид удаляют продуванием стерильного воздуха или азота в течение 14 дней или вакуумируют. Этиленоксид взаимодействует с ионами хлора с образованием ядовитого вещества — 2-хлорэтанола, в присутствии воды — гликоля. Поэтому перед применением должно тщательно изучаться возможное химическое взаимо¬действие.

Контроль качества укупорки (запайки) проходят все сосуды. Для определения герметичности сосудов используют 3 метода.

1) Кассеты с ампулами помещают в вакуум-камеру капиллярами вниз. В капилляре создают разре­жение, при этом из негерметично запаянных ампул раствор выли­вается. Такие ампулы отбраковываются.

2) Герметичность ампул можно проверить с помощью окрашен­ного раствора метиленового синего (0,0005%). Если инъекционный раствор подвергают тепловой стерилизации, то горячие ампулы помещают в ванну с окрашенным раствором. При резком остывании в ампулах создается разрежение и окрашенная жидкость проникает вовнутрь негерметичных ампул, которые отбраковываются. Если же инъекционный раствор не подвергают тепловому воздействию, то в аппарате с ампулами, погруженными в окрашенный раствор, создают давление 100±20 кПа, затем его снимают. Ампулы и флаконы с подкрашенным раствором отбраковывают. Для определения герметичности ампул с масляными раство­рами используют воду или водный раствор мыла. При попадании такого раствора внутрь ампулы происходит изменение прозрач­ности и цвета масляного раствора за счет образования эмульсии и продуктов реакции омыления.

3) Третий метод основан на визуальном наблюдении за свече­нием газовой среды внутри ампулы под действием высокочастот­ного электрического поля 20—50 МГц. В зависимости от величины остаточного давления внутри ампулы наблюдается разный цвет свечения. Определение проводят при 20°С и диапазоне измерений от 10 до 100 кПа.

78. Оценки качества инъекционных препаратов и аптеке и на фармацевтических предприятиях: контроль стерильности, апирогенности, чистоты инъекционных растворов. Источники механических загрязнений инъекционных растворов, пути их устранения. Возможность объективного контроля чистоты инъекционных растворов в ампулах

Бракераж ампулированных растворов

После запайки и стерилизации ампулы из парового стерилизатора тотчас помещаются в раствор метиленовой сини комнатной температуры. Они быстро охлаждаются, внутри конденсируется пар и образуется разрежение. Если в ампулах имеются трещины, внутрь засасывается краситель и их легко отбраковывать. Для обнаружения оченъ мелких трещин предлагается эту операцию проводить в стерилизаторе АП-18М, в камеру которого после стерилизации заливают раствор метиленовой сини или другого красителя и создают избыточное давление пара. В этом случае перепад давлений значительно больше, контроль чувствительнее. Раствор красителя сливают из камеры и ампулы визуально отбраковывают. Их моют теплой водой с моющим средством для удаления гидрофобных веществ и загрязнений, мешающих качественному нанесению надписи (маркировке).

Контроль на механические включения. Ампулы или флаконы вращаются, чтобы создать в них спиралеобразный поток жидкости. После разрушения пузырьков воздуха их просматривают на черном и белом фоне при освещении матовой лампочкой в 60 Вт. На черном фоне проверяется прозрачность и механические включения — стеклянная пыль, волокна, на светлом — цвет раствора, отсутствие механических включений черного цвета и целостность стекла. Метод позволяет отделять пузырьки воздуха, определять форму и вид частиц, так как ампула 20 мм в диаметре дает их увеличение в 2 раза. Метод имеет недостатки: субъективность — острота зрения, опыт работы, уста¬лость контролера, время анализа, условия взбалтыва¬ния и др. Метод не дает количественной оценки, до¬пустимая ошибка ±30 %. При осмотре некоторые участки ампул не видны.

Визуально-оптические методы основаны на использовании проекторов, увеличительных линз, поляризационного света, лазерного луча и т. д.

Оптические методы — с автоматической регистрацией фотоэлементами поглощения или рассеивания проходящего света.

Мембранно-микроскопические методы. Раствор с помощью пробоотборника пропускают через расчерченную на клетки фильтрующую мембрану диаметром 25 мм с размером пор 0,8 или 0,44 мкм. После анализа флаконов большого объема (1л) на стенках остается мало загрязнений. Все мелкие ампулы и флаконы про¬мывают очищенной водой и фильтруют через мембранный фильтр, который предварительно желательно окрасить в черный цвет, фильтр высушивают. Освещают под углом 10—20° — частицы дают длинные тени. Поверхность просматривают под микроскопом при увеличении в 40 раз и определяют тип и равно-мерность загрязнений. С помощью окулярмикрометра регистрируют частицы в трех диапазонах — до 50, 50—100 и более 200 мкм. Выбирают семь квадратов, рассматривают их при увеличении 100Х, суммируют частицы в диапазоне 5—25 и 25—50 мкм и умножают на соответствующий коэффициент для определения их количества на фильтре и, следовательно, во всем объеме раствора. Кроме того, преимуществами мето¬да являются определение истинных размеров частиц и идентификация их вида.

Проточные методы. Возможны два варианта. Первый — раствор протекает через чувствительный канал с небольшим калиброванным отверстием, например 10 мкм. На обоих концах канала имеются электроды, являющиеся проводниками электрического тока. Механические частицы изменяют силу тока и прибор регистрирует импульс продолжительностью несколько микросекунд. Амплитуда зависит от размера частицы и ее диаметра. Во втором случае используют электронно-счетный прибор. Раствор пропускают через прямоугольную ячейку с датчиком. Пучок света дает постоянный сигнал, который изменяется проходящей частицей в зависимости от ее диаметра. Предлагается использовать сочетание двух методов: для постадийного контроля — приборы, действие которых основано на регистрации поглощения или рассеивания света, на последней стадий — мембранно-микроскопический метод.

В нашей стране прошли промышленные испытания установки для объективного контроля инъекционных растворов в ампулах.

Чувствительным элементом является передающая трубка телевизионной камеры на базе установки ПТУ-29. Оптическая часть представлена двумя осветителями, приспособлением для расширения зоны просмотра и диафрагменной системой. Ампула с раствором раскручивается с большой скоростью, чтобы создать воронку жидкости, доходящую до дна сосуда, затем скорость уменьшается, но раствор продолжает вращаться в ампуле по инерции. Частицы переходят во взвешенное состояние, а пузырьки воздуха разрушаются. Световой поток от осветителей проходит раствор, а присутствующие частицы его рассеивают. Это улавливается объективом передающей телевизионной камеры. Сигнал поступает на блок обработки информации, где фиксируется наличие механических частиц (мини-мальный размер — 5 мкм) и объем наполнения ампулы. Время наблюдения может быть от 1 до 3,5 с. Результат работы установки в 4 раза выше производительности 5 контролеров.

Определение стерильности. На специальных тест-микроорганизмах устанавливается наличие или отсутствие антимикробного действия лекарственного и вспомогательных веществ. При обнаружении антимикробного действия используют инактиваторы, например, для сульфаниламидов — кислоту парааминобензойную, для пенициллинов и цефалоспоринов — пенициллиназу и т. д. Если активатора нет, используют метод мембранного фильтрования для отделения антимикробных веществ. Растворы высевают на две среды: тиогликолевую и Сабуро, инкубируют 14 суток при соответствующих температурах, просматривая ежедневно. При обнаружении роста микроорганизмов хотя бы в одной пробирке испытания повтряют на таком же количестве ампул. И только при отсутствии роста при повторном посеве партия считается стерильной.

Метод мембранного фильтрования при определении стерильности рекомендован при выраженном антимикробном действии лекарственного вещества и испытании растворов в больших объемах (более 100 мл). Отбирается 30 ампул; их делят на 3 группы по 10 штук, 20 используют для испытания на стерильность, 10 — для контроля полноты отмывания мембраны от лекарственного вещества. Для фильтрования применяют установку с мембраной диаметром 47 мм и размером пор 0.45±0,02 мкм. Фильтры стерилизуют при температуре 121С - 20 мин. Если испытывают порошок, его растворяют в воде для инъекций, фильтруют через стерильную мембрану, которую промывают от раствора 3—5 порциями растворителя по 100 мл, разрезают стерильными ножницами на 2 части, одну из них помещают в колбу с тиогликолевой средой, вторую — в среду Сабуро, 7 дней инкубируют при ежедневном просмотре. Все операции проводят в асептических условиях. При отсутствии роста на двух средах делают заключение о стерильности серии.

Проверке на пирогенность подвергают растворы, вводимые внутривенно в объемах 10 мл и более (ГФ XI). Испытание на пирогенность растворов и воды для инъекций в виде изотонического раствора производят с помощью биологического метода (ГФ XI), основанного на изменении температуры тела кролика после введения испытуемых объектов.

Биологическое испытание на пирогенность, несмотря на специфичность, имеет ряд недостатков, связанных с необходимостью содержания большого количества кроликов (метод экономически дорог) и с индивидуальной чувствительностью кроликов. В связи с этим в ГФ XI указано (статья «Определение пирогенности»), что необходимо проверять индивидуальную чувствительность кроликов и для определения пирогенности не разрешается использовать кроликов-альбиносов.

Кроме официального биологического метода испытания на пирогенность, за рубежом широко применяют лимулус-тест (лим-тест), основанный на образовании геля при взаимодействии бактериальных пирогенов с лизатом амебоцитов Limulus polyphemus. Во ВНИИФ разработан аналогичный чувствительный, но более простой метод, основанный на способности грамотри-цательных микроорганизмов (основные продуценты пирогенных веществ) образовывать гель в 3 % растворе калия гидроксида.