Лекции / ПромБТ_2020 8 Эукариоты

Гаплоидные культуры

Суспензионная культура для селекции

Суспензионные культуры применяют

1.для быстрого скрининга и отбора вариантов, обладающих особыми свойствами;

2.для получения культур протопластов и трансгенных растений;

3.для получения вторичных метаболитов в биореакторах.

Суспензионные культуры растительных клеток

Способность растительных клеток расти в виде генетически омнипотентной культуры позволила использовать их как источник ценного сырья.

Так, в промышленных масштабах получают вторичные метаболиты, например шиконин, берберин или таксол.

Для получения вторичных метаболитов растительные клетки, обработанные растительными гормонами, переносят из каллусной культуры в суспензионную культуру, постепенно увеличивая ее объем в биореакторе.

Метилдигоксин

(3бета,5бета,12бета)-3-[(О-2,6-Дидезокси-4-О-метил-бета-D-рибо-гексопиранозил-(1"4)-О-2,6-дидезокси-бета-D-рибо- гексопиранозил- (1"4)-2,6-дидезокси-бета-D-рибо-гексопиранозил)окси]-12,14-дигидроксикард-20(22)-енолид

Фармдействие. Сердечный гликозид

Показания. ХСН (особенно на фоне постоянной формы мерцательной тахиаритмии или трепетания предсердий). Пароксизмальные наджелудочковые аритмии (мерцательная аритмия, трепетание предсердий, наджелудочковая тахикардия).

Паклитаксел (таксол)

Цитостатический противораковый препарат, относящийся к таксанам. Наиболее используемый из противораковых лекарств природного происхождения (до разработки протоколов бактериального биосинтеза и полусинтетических методов получения, добывался только из природных источников, в частности из коры тихоокеанского тиса), годовой оборот которого составляет несколько миллиардов долларов. Включён в списки важнейших лекарств, включая Перечень основных лекарственных средств Всемирной организации здравоохранения и российский список жизненно необходимых и важнейших лекарственных препаратов.

Культивирование животных клеток

Сложно и дорого

Используют если не получается с помощью микроорганизмов

oструктура белка стабилизируется большим количеством дисульфидных связей

oбелок приобретает активность только после посттрансляционных модификаций

o неправильное гликозилирование приводит к развитию иммунной реакции.

В качестве примеров таких белков можно привести терапевтические антитела, фактор VIII, эритропоэтин и тканевой активатор плазминогена.

Культивирование животных клеток

культивирование клеток человека активно применяется для обнаружения вирусов, а также для разработки противовирусных вакцин

После того как клетки отобрали из банка, они сохраняют жизнеспособность в жидкой среде на протяжении около 50 циклов деления

Культивирование животных клеток

Для получения белков, имеющих терапевтическое значение, как правило, используют хорошо охарактеризованные линии клеток млекопитающих

1.обладают способностью к безграничному делению

2.короткое время генерации (20–30 ч);

3.относительно нестрогие требования к условиям культивирования;

4.может быть достигнута высокая плотность культуры (это свойство позволяет культивировать клетки в биореакторах);

5.легко трансформируются

Культивирование животных клеток

Для производства белков в промышленности используют клетки следующих типов:

1.гибридомные клетки применяют для получения моноклональных антител (в основном для диагностики);

2.фибробласты клеток яичника китайского хомячка (клетки СHO)

3.опухолевые клетки из почек сирийского хомячка (клетки ВНК)