Лекции / ПромБТ_2020 3 Хроматография - введение
.pdf
Вытеснительная хроматография
|
|
|
|
|
|
|
|
|
A+B в E |
|
D в E |
|
А - слабее |
|
B – сильнее |
|
D – сильно |
|
|
связывается |
|
связывается |
|
связывается |
||
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
A+B |
D |
|
|
|
B+D |
A+B
А
Раство
ритель
E
C
D
B+D
B
А+B
А
A |
|
B |
|
D |
|
|
|
|
|
А |
B |
D D |
На колонку, заполненную растворителем «E» (связывается с сорбентом слабее чем А и |
V |
B) наносим пробу (зону) раствора A и B в E. |
|
Далее начинаем подавать раствор вытеснителя D. |
|
За счёт разницы в силе связывания образуются зоны чистых растворов А и В, |
|
разделенные смешанными зонами. |
|
Метод не имеет аналитического значения. |
|
Может использоваться как препаративный метод, поскольку наиболее полно |
|
использует емкость сорбента. |
21 |
© С. В. Еремин, 2019 |
Проявительная хроматография
Основной современный метод!
В отличие от предыдущих в этом методе элюирующий раствор обладает немного меньшим сродством к сорбенту, чем любой из компонентов вносимой на колонку или пластинку смеси веществ.
Почему?
© С. В. Еремин, 2019 |
23 |
Проявительная хроматография
Основной современный метод!
В отличие от предыдущих в этом методе элюирующий раствор обладает немного меньшим сродством к сорбенту, чем любой из компонентов вносимой на колонку или пластинку смеси веществ.
Молекул элюента сильно больше, чем аналита, поэтому при его немного большем сродстве все молекулы аналита будут вытеснены с мест связывания => вещество не удерживается!
Если сродство сильно меньше – наоборот аналит «засядет» на колонке или старте ТСХ.
© С. В. Еремин, 2019 |
24 |
Классификация по технике
Техника исполнения
Планарная
Бумажная |
|
Тонкослойная |
|
|
|
Колоночная
Низкого давления (на открытых |
Среднего давления (< 30 бар) |
|
колонках) |
||
|
ВЭЖХ ( HPLC - High-performance liquid chromatography)
ранее – ЖХВД (но также HPLC)
© С. В. Еремин, 2019 |
25 |
© С. В. Еремин, 2019 |
26 |
© С. В. Еремин, 2019 |
27 |
Адсорбционная хроматография
Жидко-твердофазная хроматография
Аналит адсорбируется на поверхности сорбента
Взаимодействие слабое – силы Ван-дер-Ваальса, водородные связи, π- π взаимодействия
Сорбенты – силикагель, окись алюминия, силикат магния, модифицированные силикагели, полиамид, целлюлоза и т.д.
Порядок выхода аналитов – сначала неполярные
Сорбент всегда полярнее чем элюент
Разделяет низко- и среднеполярные вещества без заряда
Не разделяет неполярные (например алканы)
Сэтого вида хроматографии все и начиналось. Были изучены разнообразные полярные органические и неорганические соединения. В результате из неорганики в жидкостной хроматографии (низкого давления) остался силикагель, окись алюминия и флоризил (Florisil – силикат магния).
В ВЭЖХ –остался, по сути, только силикагель. При этом адсорбционная
хроматография на не модифицированном силикагеле почти не применяется –
плохо воспроизводится, могут быть «хвосты» и т.д. |
28 |
© С. В. Еремин, 2019 |
Распределительная хроматография
Жидко-жидкофазная хроматография
Аналит распределяется между подвижной и неподвижной жидкими фазами
Сорбенты – силикагель, окись алюминия, силикат магния, модифицированные силикагели, полиамид, целлюлоза и т.д.
Сорбент всегда полярнее чем элюент
Разделяет полярные соединения
Порядок выхода аналитов – сначала неполярные
Не разделяет неполярные соединения
В классическом варианте – тройные системы типа
H2O – iPrOH – гексан
H2O – MeOH – CHCl3
Раньше в ВЭЖХ пробовали распределительную хроматографию на силикагеле
но теперь практически не используют этот классический вариант.
© С. В. Еремин, 2019 |
29 |
Нормально-фазовая хроматография
Жидко-твердофазная хроматография
Механизмы: и адсорбция и распределение
Сорбенты:
силикагель с диольными группами
силикагель с аминными группами
силикагель с нитрильными группами
силикагель (редко)
Сорбент всегда полярнее чем элюент
Разделяет низко- и среднеполярные вещества без заряда
Порядок выхода аналитов – сначала неполярные
Не разделяет неполярные (например алканы)
© С. В. Еремин, 2019 |
30 |