Лекции / ПромБТ_2020 2 Разделение 2
.pdfМетоды центрифугирования
Дифференциальное
Зонально-скоростное
Изопикническое
Дифференциальное центрифугирование
Препаративный метод
Наиболее часто используется как аналог фильтрации
Разделение сильно отличающихся компонентов
Дифференциальное центрифугирование
Дифференциальное центрифугирование
Можно ли получить чистую фракцию?
Дифференциальное центрифугирование
Дифференциальное центрифугирование
Зонально-скоростное центрифугирование
Слой пробы в |
|
|
|
растворе с |
Зона |
|
|
плотностью |
объекта |
|
|
ρ0 < ρ1 |
|
|
|
ρ |
|
|
|
0 |
|
При длительном |
|
G1 |
G1 |
||
центрифугировани |
|||
ρ1 |
|
||
|
и осаждаются все |
||
T1 |
T2 |
||
объекты! |
|||
|
|
ρ
В пробирке заранее создается градиент плотности ρ (например раствором сахарозы) Плотность увеличивается ко дну пробирки.
Зачем градиент плотности ?
Зонально-скоростное центрифугирование
Слой пробы в |
|
|
|
растворе с |
Зона |
|
|
плотностью |
объекта |
|
|
ρ0 < ρ1 |
|
|
|
ρ |
|
|
|
0 |
|
При длительном |
|
G1 |
G1 |
||
центрифугировани |
|||
ρ1 |
|
||
|
и осаждаются все |
||
T1 |
T2 |
||
объекты! |
|||
|
|
ρ
В пробирке заранее создается градиент плотности ρ (например раствором сахарозы) Плотность увеличивается ко дну пробирки.
Плотность начальной точки градиента подбирается так, чтобы плотность пробы была меньше – это позволяет наслаивать пробу без смешивания. (см. коктейль Bloody Mary)
Градиент плотности играет вспомогательную роль – препятствует конвекционному размыванию разделяемых зон.
Важно не «перекрутить» и не перейти в дифференциальный режим!
Изопикническое центрифугирование
Изопикническое центрифугирование
Градиент плотности играет основную роль – разделение по плотностям.
Вданном методе идёт разделение только и именно по плотностям. Размеры не имеют значения. На рисунке – важен цвет, обозначающий плотность.
Вслучае В – градиент плотности формируется из-за противоположно действующих сил (центробежная сила и диффузия)