Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Методичка Сонина вир.doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
667.65 Кб
Скачать

Главный опыт рск при определении типа вируса ящура

Компоненты реакции

Стандартные сыворотки типов

Без сыво­ротки

О

А

С

САТ-1

Азия-1

Сыворотки в рабочем титре (удвоенный предельный титр)

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

Испытуемый антиген (цельный или в разведении)

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

Комплемент, 2 дозы

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

0,2

Физиологический раствор

-

-

-

-

-

0,2

Водяная баня 20 минут при 37-38° С

Гемолитическая система

0,4

0,4

0,4

0,4

0,4

0,4

Водяная баня 30 минут при 37-38° С

Результат

++++

-

-

-

-

-


В данном примере антиген относится к типу О.

Одновременно ставят контроли: со стандартной позитивной сыво­роткой без антигена, с испытуемым антигеном без добавления сыво­ротки, с диагностической стандартной позитивной сывороткой и стан­дартным антигеном.

Учет реакции проводят сразу же после прохождения реакции в ге­молитической системе (это предварительный учет) и через несколько часов, т. е. после оседания эритроцитов (это окончательный учет). При повторном учете оценку реакции дают в крестах (++++, +++, ++, +, —), при этом во внимание берут наличие осадка эритроцитов на дне и цвет надосадочной жидкости. Полная задержка гемолиза (жидкость про­зрачная, бесцветная, на дне осадок эритроцитов) расценивается как положительная и обозначается ++++, если жидкость желто-розовая с осадком эритроцитов +++ и т. д. Если жидкость красная прозрачная и нет эритроцитов в осадке, оценивают «—».

В последнее время для постановки РСК успешно применяют тех­нику постановки по микрометоду. Ставят реакцию при этом методе в объеме 0,125 мл и каждый компонент берут в объеме 0,025 мл.

Схема и этапы постановки реакций

На ку льтурах тканей

РГА

РЗГА

РИГА

РГАд

РЗГАд

РСК

(РТГА)

(РПГА)

стерильность (в боксе)

v + э-»

AT + V

1)У?+ЭАт ->

(KT+V)-»

(KT+V)-»

(Аг+Ат+К)

контакт 30-

контакт*

контакт

контакт!-Э ->

контакт^ Ат

->баня 20' 37°

40'->учет

Э-> контакт

учет

контакт

->контакгь

+(Г+Э)->баня

I) Капельный

->учет

2)Ат (сыв. в

учет

Э-> контакт

20' 37°->учет

метод на стекле

разведении)?

-»учет

сразу и когда

2) пробирочный

+Эаг->

осядут (по

контакт-»

лизису Э)

учет

I) Vb

1)Сыворотка

1) VB

КТ заражают

(KT+V)-»

1) Сыворотка

разведении 1:10

(Ат) в

разведении

V, контакт

контакт

инактивнр 1:5 и

и > 2- кратно по

разведении

1:10 и > по 0.5

неск. часов

неск. часов

1:10 по 0 2 мл

0.5

1:10 и далее

+ 0.1 мл ЭАт

37°+0.2 мл

37°-» слить

2) Аг - 0.2

2) 1% Э по 0.5

2- кратно

(эритроцит.

0.5%Э

среду-»

3) К - 0.2

3)Контакт 40-60'

по 0.25

диагностикум)

контакт 15-

промьпъ

4) Баня 20' 37°

4) Учет

2) V 4АН по

контакт

20' 37°-» учет

буф р-ром

5) Г - 0.2

1 АЕ титр

0.25

->учет

под

Хенкса-Ю.2

6) Э - 0.2

Это последнее

3) Контакт

2) Ат? В

микроскопом

мл Ат и 0.8

7) Баня 20' 3Г

разведение на

40-60' 37°

разведении от

Хенкса-»

8) Учет сразу и

++

4) Э 1% по

1 10 и > по 0 .5

контакт 40-

когда осядут Э

0.5

Ш Эдг

60' ЗГ+0.2

по лизису Э

5)Контакт

-контакт

мл 0.5%Э->

40-60'

->учет

контакт 15-

6)Учет по

20' 37°-»

задержке

учет под

ГА

микроскопом

Титр Ат

Примечания:

    1. V — вирус

    2. Ат — антитела

    3. Э — эритроциты

    4. КТ — культура тканей

    5. К — комплемент

    6. Г — гемолизин

Содержание

Лабораторная диагностика вирусных болезней у животных 1

Учебное пособие (издание третье, дополненное) 1

ин = тут2 65

Содержание 88