Вирусологическая лаборатория и правила работы с вируссодержащим материалом

Вирусологическую лабораторию (отдел) размещают в благоустро­енном, изолированном от других лабораторий (отделов) помещении или отсеке здания, оснащают необходимыми приборахми, оборудова­нием и мебелью.

И помещениях лаборатории поддерживают чистоту, проводят ежед­невную влажную уборку и периодически обрабатывают растворами дезосредств. Для стерилизации боксов и помещений используют уль­трафиолетовые лучи (УФЛ), в качестве источника которых применя­ют бактерицидные лампы (БУВ-15, БУВ-30 и др.).

В составе лаборатории необходимо иметь приемную комнату для приема и регистрации поступающего патматериала, комнату для пред­варительной обработки материала, комнату для вирусологических ис­следований с двумя боксами и предбоксниками, автоклавную, моечную, комнаты для сотрудников лаборатории, гардероб, душевую, виварий для содержания здоровых и зараженных животных. Полы в рабочих комна­тах лаборатории должны быть гладкими, хорошо переносящие воздей­ствие дезосредств, стены облицовывают керамической плиткой или покрывают масляной краской. При входе в лабораторию оборудуют вой­лочный или губчатый резиновый коврик, пропитанный дезраствором.

В приемной размещают столы, обитые оцинкованной жестью или нержавеющим металлом и бак с дезраствором. Здесь доставляемый пат- материал (трупы) принимают и регистрируют в журнале.

Комната предварительной обработки материала служит для вскры­тия трупов, осмотра и отбора поступившего патологического материа­ла для исследований. Здесь должен быть бокс с предбоксником, в боксе отбирают пробы, готовят и фиксируют мазки (мазки-отпечатки). В ком­нате необходимо иметь инструментарий для вскрытия и взятия мате­риала, стерильную посуду для материала, сосуды с дезраствором.

В комнате для проведения вирусологических исследований обору­дуют 2 бокса с предбоксниками, в одном боксе готовят культуры тканей и работают со стерильным материалом, другой служит для работы с ви­русологическим материалом (заражение куриных эмбрионов, культур тканей и сбор вируссодержащего материала и т. д.). Стерилизацию по­мещений, боксов и предбоксников проводят с помощью бактерицидных ламп, на столах размещают инструментарий, необходимый для работы, сосуд с дезраствором, газовые или спиртовые горелки. Работа в боксах проводится с соблюдением стерильности. В предбоксниках находятся стерильные халаты, тапочки, марлевые маски, колпачки, которые наде­вают перед входом для работы в бокс. Здесь же находятся кран и рако­вина для мытья рук, дезраствор для рук и полотенце.

В автоклавной проводят стерилизацию посуды, питательных сред и растворов, необходимой аппаратуры и ириборов, обезвреживание зараз­ного материала. Здесь должно быть не менее двух автоклавов, в одном стерилизуют чистый материал, в другом обезвреживают и стерилизуют инфицированный материал. Сбор инфицированного материала прово­дят в баки или бюксы.

Моечная предназначена для мытья посуды, аппаратуры и приборов. Здесь необходимо иметь эмалированные ведра, кастрюли, баки для ки­пячения и мытья посуды, ванны. Для сушки мытой посуды используют сушильные шкафы, печи. Мытье посуды, пипеток и инструментов, заг­рязненных инфицированным материалом, проводят только после их сте­рилизации.

Для проведения люминесцентной микроскопии оборудуют специ­альную комнату или рабочее место и оснащают люминесцентными мик­роскопами (серии ЛЮМАМ) или люминесцентными устройствами.

В лаборатории должно быть в достаточном количестве стеклянной и эмалированной посуды (пробирки, матрацы, колбы, пипетки, мен­зурки, флаконы, мерные стаканы, цилиндры и т. д., баки, ведра, тазы, ванны, кастрюли и т. д.). Вирусологические лаборатории оснащают не­обходимыми приборами, аппаратурой и оборудованием (столы, шка­фы для инструментария и посуды, термостаты, холодильники бытовые и низкотемпературные, центрифуги, электромагнитные мешалки, весы, овоскопы, фильтры, водяные бани, микроскопы обычные и люминес­центные, дистилляторы и бидистилляторы, сушильные шкафы и т. д.).

В виварии должны быть комнаты для здоровых и комнаты для экс­периментально зараженных лабораторных животных с отдельным ин­вентарем и спецодеждой. Животных содержат в клетках. Чистку кле­ток и вивария проводят ежедневно. В виварии необходимо иметь де- зоковрики и дезраствор для обработки рук, кран с водой.

Сотрудники вирусологической лаборатории обязаны соблюдать следующие правила работы:

1. Выполнять работы только в специальной одежде - халат, шапоч­ка (колпачок), марлевая маска па рот и нос (респиратор). При работе с особо опасным материалом кроме того используют резиновые пер­чатки, защитные очки, резиновый фартук. Для работы в боксе исполь­зую! стерильную спецодежду, обязательно меняют обувь.

2. Запрещается выходить за пределы лаборатории в халатах или надевать верхнюю одежду на халат.

3. В лаборатории запрещается курить или принимать пищу, ходить и разговаривать во время работы.

Весь поступивший в лабораторию на исследование материал дол­жен рассматриваться как инфицированный и работать с ним следует осторожно, с соблюдением стерильности и мер профилактики.

5. Инфицированный материал, инструменты и посуда подлежат обязательному обезвреживанию - стерилизации по возможности в тот же день. Трупы экспериментально зараженных животных и продукты их выделения обезвреживают сжиганием или автоклавированием. Ра­боту с инфицированным материалом проводят с наличием на рабочем месте дезраствора.

6. По окончании работы рабочее место убирают, дезинфицируют и приводят в порядок. Комнату подвергают обработке бактерицидными лампами до начала и после окончания работы. Руки тщательно моют с мылом и обрабатывают 70° спиртом.

Диагностика вирусных болезней

Диагностика вирусных болезней принципиально мало чем отлича­ется от диагностики бактериальных инфекций, т. е. она тоже прово­дится комплексно с применением различных методов. Однако при ди­агностике вирусных болезней есть и некоторые особенности. Так, при­меняют специальные серологические реакции - преципитации в ага­ровом геле, реакция задержки гемагглютинации и гемадсорбции и др., а также специальные методы выделения вирусов культуры тканей и куриные эмбрионы.

В комплексную диагностику при вирусных заболеваниях включаются:

1. Эпизоотологический метод, при котором учитывают данные о заболеваемости, сезонности, наличие данного заболевания в предше­ствующие годы, о массовых прививках скота и его перегруппировках, о предшествующих контактах животных с источником инфекции, на­личии в данной местности переносчиков возбудителя (дикие живот­ные, насекомые, грызуны) и т. д.

2. Клинический метод, позволяющий ставить предварительный ди­агноз на основании типичных признаков болезни. Однако, не во всех случаях можно наблюдать четко выраженные клинические признаки, иногда болезнь может протекать скрытно (лейкоз, инфекционная ане­мия, плазмоцитоз и др.). При ряде вирусных болезней клинические признаки могут быть сходными, что не позволяет правильно поста­вить диагноз. Клинический метод диагностики нередко дополняют гематологическими исследованиями и особенно это ценно при диаг­ностике лейкоза и инфекционной анемии.

3. Патологоанатомический метод, при котором учитывают резуль­таты вскрытия павших животных, т. е. наличие наиболее характерных изменений в органах или тканях. Результаты вскрытия нередко допол­няют данными гистологического исследования материалов.

4. Лабораторные методы диагностики. Лабораторную диагнос­тику при вирусных болезнях проводят независимо от точности по­ставленного предварительного диагноза. Особенно велико значение лабораторных методов диагностики тогда, когда заболевание про­текает атипично, скрытно или как смешанная инфекция.

11а основании лабораторных методов диагностики ставят оконча­тельный диагноз. При проведении лабораторной диагностики пресле­дуют три цели:

а) обнаружить вирус в исследуемом патологическом материале, обычно путем выявления телец-включений или элементарных телец, с помощью микроскопии мазков или мазков-отпечатков в обычном све­товом или люминесцентном микроскопах. Иногда для этих целей при­меняют электронную микроскопию;

б) выделить вирусы из патологического материала путем зараже­ния чувствительных лабораторных животных, развивающихся кури­мых эмбрионов и культур тканей. При необходимости проводят не менее трех пассажей;

в) идентифицировать выделенные вирусы путем постановки раз­личных серологических реакций (РСК, РДП, РНГА, реакция нейтра­лизации вируса и др.) с использованием в них стандартных (биофаб­ричных) специфических или типоспецифических иммунных сывороток. Постановкой этих же серологических реакций можно исследовать при­сылаемые из хозяйств сыворотки крови животных на наличие в них антител, но для этого в лаборатории нужно иметь стандартные (био­фабричные) антигены - диагностикумы.