32

КАЗАНСКИЙ ГОСУДАРТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

Химический институт им. А. М. Бутлерова

Кафедра аналитической химии

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АУТОИММУННЫХ АНТИТЕЛ К ДНК С ПОМОЩЬЮ ПОТЕНЦИОМЕТРИЧЕСКОГО ДНК-СЕНСОРА

(Курсовая работа)

Работа завершена:

"_" ___________2006 г. _____________ (М. С. Чебурова)

Работа допущена к защите:

Научный руководитель асп.

"_" ___________2006 г. _____________ (А. В.000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000 ----------------------------------------

0000000000000000000)

СОДЕРЖАНИЕ

Введение 3

1. Методы получения и свойства полианилина

(Литературный обзор) 4

1.1. Строение и электрохимические свойства полианилина 4

1.2. Влияние условий электрохимического получения

полианилина на его свойства 7

1.3. Влияние минеральных кислот,

используемых для получения полианилина, на его свойства 9

1.4.Определение антител к ДНК 12

2.ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 14

2.1 Материалы и реагенты 14

2.2. Приборы и методы эксперимента 14

3. Определение аутоиммунных антител к днк

С ПОМОЩЬЮ ПОТЕНЦИОМЕТРИЧЕСКОГО ДНК-СЕНСОРА 17

ВЫВОДЫ 28

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ БИБЛИОГРАФИЧЕСКИХ

ИСТОЧНИКОВ 29

Введение

Одной из проблем современной медицины является своевременная диагностика аутоиммунных заболеваний. Они поражают до 7% населения земного шара, причем, как правило, в молодом возрасте. Причины возникновения аутоиммунных заболеваний до конца не выяснены. Это могут быть иммунологические, генетические, вирусные, лекарственные и гормональные факторы или их комбинации. Одним из способов объективной оценки аутоиммунного статуса организма является обнаружение в крови больного аутоантител к нативной ДНК. У здоровых доноров такие аутоантитела, как правило, отсутствуют или же их количество чрезвычайно мало. В аутоиммунном процессе массовая гибель клеток в результате апопоптоза приводит к увеличению титра внеклеточной ДНК в кровотоке, что и продуцирует антитела, способствующие выведению избытка нуклеиновых кислот. Единственным способом клинического определения аутоиммунных антител является твердофазный иммуноферментный анализ. В нем образование комплекса ДНК - антитело регистрируется с помощью коньюгата, включающего видоспецифичные антитела и индикаторный фермент, обычно пероксидазу. Активность фермента, измеренная спектрофотометрически, является мерой содержания антител в сыворотке крови. Метод отличается многостадийностью, большой длительностью, требует дорогостоящих реактивов, специального оборудования и квалифицированного персонала. В этой связи большое внимание уделяется развитию альтернативных методов контроля, предназначенных на индикации присутствия антител к ДНК в крови больного. Это может быть достигнуто путем использования биосенсорных технологий. Целью данной работы было изучение влияний условий получения полианилина и измерения сигнала сенсора на основе электрода, модифицированного полианилином, на характеристики детектирования антител к ДНК.

В работе использовали антитела и сыворотки крови больных, предоставленные кафедрой эндокринологии Казанской государственной медицинской академией (зав.каф. проф.Анчикова Л.И.).