- •5. Иммерсионный микроскоп. Принцип работы. Сфера применения.
- •9. Принципы классификации микроорганизмов. Понятие о виде и штамме.
- •10. Основные группы микроорганизмов. Значение в патологии человека. Примеры.
- •11. Морфологические и тинкториальные свойства бактерий. Методы изучения.
- •13. Клеточная стенка, особенности строения, функциональное назначение.
- •14. Кислотоустойчивые бактерии: особенности строения и методы выявления.
- •19. Бактериоскопический метод диагностики. Достоинства метода.
- •20. Бактериоскопический метод диагностики. Недостатки метода.
- •1.Метаболизм бактерий. Катаболизм, анаболизм.
- •2. Транспорт питательных веществ в бактериальную клетку.
- •3. Способы получения энергии бактериями. Мембранное и субстратное фосфорилирование.
- •4. Ферменты бактерий. Экзо- и эндоферменты, адаптивные и конститутивные ферменты.
- •5. Биохимические свойства бактерий. Методы изучения.
- •6. Питание бактерий. Классификация бактерий в зависимости от источников энергии, углерода, потребности в сложных органических соединениях.
- •7. Методы культивирования бактерий. Непрерывное и периодическое культивирование. Рост и размножение бактерий на жидких питательных средах при периодическом культивировании.
- •8. Питательные среды. Требования, предъявляемые к питательным средам.
- •9. Культуральные свойства. Колония и её характеристики.
- •10. Классификация питательных сред. Особенности состава и области применения. Примеры.
- •11. Методы культивирования облигатно-анаэробных микроорганизмов. Особенности питательных сред для них.
- •12. Чистая культура. Методы выделения чистой культуры бактерий.
- •13. Бактериологический метод диагностики. Основные этапы.
- •14. Бактериологический метод диагностики. Достоинства и недостатки.
- •15. Влияние физических факторов на жизнедеятельность микроорганизмов
- •16. Влияние химических факторов на жизнедеятельность микроорганизмов.
- •17. Основные группы дезинфектантов. Механизмы действия.
- •18. Стерилизация. Методы стерилизации, используемые в медицине и микробиологии.
- •19. Паровой и воздушный методы стерилизации. Режимы, области применения.
- •20. Методы контроля режима стерилизации. Контроль стерильности.
- •21. Использование излучений для дезинфекции и стерилизации. Область применения.
5. Биохимические свойства бактерий. Методы изучения.
Биохимические свойства- способность микроорганизмов к ферментации и ассимиляции тех или иных химических веществ
Ферменты(конститутивные,адаптивные,экзо-эндо-)
Определение ферментативной активности
По накоплению кислых продуктов метаболизма - углеводы
по образованию конечных продуктов (аммиак - дезаминазы, уреаза; индол – триптофаназа сероводород – цистиназа)
По ассимиляции субстратов - наличие или отсутствие роста
Методы изучения:
1. Среды пестрого ряда (среды Гисс)
Состав:
Пептонная вода
Углевод (сахар или многоатомный спирт
Индикатор рН
В пробирку с глюкозой помещают "поплавок" для определения продукции газа
(изначально все желтое, а потом окрашивается в розовый)
2. Система индикаторных бумаг
Диски фильтровальной бумаги пропитывают индикаторными (дифференциальными) средами. В высушенном состоянии диски можно длительно хранить. Перед использованием диски раскладывают пинцетом в стерильные пробирки и добавляют суспензию идентифицируемой культуры в физрастворе.
6. Питание бактерий. Классификация бактерий в зависимости от источников энергии, углерода, потребности в сложных органических соединениях.
Особенности питания бактериальной клетки состоят в поступлении питательных субстратов внутрь через всю ее поверхность, а также в высокой скорости процессов метаболизма и адаптации к меняющимся условиям окружающей среды.
Типы питания. Широкому распространению бактерий способствует разнообразие типов питания. Микроорганизмы нуждаются в углеводе, азоте, сере, фосфоре, калии и других элементах. В зависимости от источников углерода для питания бактерии делятся на аутотрофы использующие для построения своих клеток диоксид углерода
С02 и другие неорганические соединения, и гетеротрофы питающиеся за счет готовых органических соединений. Аутотрофными бактериями являются нитрифицирующие бактерии, находящиеся в почве; серобактерии, обитающие в воде с сероводородом; железобактерии, живущие в воде с закисным железом, и др.
Гетеротрофы, утилизирующие органические остатки отмерших организмов в окружающей среде, называются сапрофитами. Гетеротрофы, вызывающие заболевания у человека или животных, относят к патогенным и условно-патогенным. Среди патогенных микроорганизмов встречаются облигатные и факультативные паразиты. Облигатные
паразиты способны существовать только внутри клетки, например риккетсии, вирусы и
некоторые простейшие.
В зависимости от окисляемого субстрата, называемого донором электронов или водорода,
микроорганизмы делят на две группы. Микроорганизмы, использующие в качестве доноров водорода неорганические соединения, называют литотрофными, а
микроорганизмы, использующие в качестве доноров водорода органические соединения,
органотрофами.
Учитывая источник энергии, среди бактерий различают фототрофы, т.е. фотосинтезирующие (например, сине-зеленые водоросли, использующие энергию света), и хемотрофы, нуждающиеся в химических источниках энергии.
7. Методы культивирования бактерий. Непрерывное и периодическое культивирование. Рост и размножение бактерий на жидких питательных средах при периодическом культивировании.
Способы культивирования аэробов
Стационарный – на поверхности агара
Метод глубинно культивирования с аэрацией среды. Аэрацию проводят для растворения кислорода в среде.
Непрерывное культивирование – используют проточные питательные среды.
Культуральные свойства микроорганизмов. Это особенности роста бактерий на питательных средах.
Культивирование микроорганизмов может быть непрерывным и периодическим. При периодическом процессе весь объем питательной среды загружают в аппарат сразу, добавляют посевной материал и при оптимальных условиях продолжают процесс до тех пор, пока не накопится нужное количество биомассы или определенного метаболита. В ходе периодического культивирования изменяется темп роста культуры, ее морфология и физиология. За время культивирования меняется состав среды - уменьшается концентрация питательных веществ, увеличивается содержание метаболитов. С физиологической точки зрения периодическое культивирование невыгодно. В ходе его возникает также ряд технологических трудностей - циклический ход операций, сменные режимы, что затрудняет контроль и регуляцию процесса.
Для культивирования микроорганизмов в лабораторных условиях необходимы питательные среды, которые могут обеспечить, клетки всеми нужными для роста и размножения веществами.
Способ непрерывно-проточного культивирования микроорганизмов более совершенен. Суть его заключается в том, что микробная популяция развивается в проточной питательной среде. Непрерывный способ имеет две разновидности: гомогенно-непрерывный игра-диентно-непрерывный. В первом случае выращивание ведут в одном ферментаторе; при тщательном перемешивании среды и аэрации обеспечивается одинаковое состояние культуры во всем объеме жидкости.
На жидких питательных средах бактерий вызывают помутнение среды, могут образовывать осадок – придонный, пристеночный и могут образовывать пленку на поверхности среды. НА плотных питательных средах образуются колонии.
