- •1История развития микробиологии, роль отеч и зар ученных
- •6 Морфология, определение и классификация бактерий
- •7 Этапы приготовления микропрепаратов из культур микробов
- •8 Способы окраски. Простой метод окраски, определение, техника и назначение.
- •9 Строение бактериальной клетки, основные структурные элементы. Отличия прокариотической клетки от эукариотической.
- •10 Строение и функции клеточной стенки и цитоплазматической мембраны. Способы обнаружения оболочки у бактерий.
6 Морфология, определение и классификация бактерий
Морфология бактерий (прокариот) Бактерии— микроорганизмы с прокариотным типом строения. Преимущественно это одноклеточные организмы, однако существует немало форм, состоящих из многих клеток.
Классификация бактерий:
1шаровидные формы «кокки» Имеют сферическую форму в виде правильного шара, эллипса, боба, ланцета.
-микрококки(имеют мелкие размеры, расположены беспорядочно, хаотично)
-стафилококки( виноградная гроздь)
-стрептококки(цепочки)
-тетракокки(расположены по 4)
-диплококки(по парам):бобовидной формы, ланцетовидной формы
-сарцины(скопления 8-16клеток)
2палочковидные формы
-бактерии(спор не образуют)
-спорообразующие палочки Спора-это форма жизни, которую образ-т бактерии во внешней среде для защиты от неблагоприятных фактов( высокая темп, охлаждение, уф)
*бациллы
*колостридии
Выделяют след расположения спор:
**терминальное( на конуе палочковидной формы)
**субтерминальное(ближе к одному из концов)
**центральное
3 извитые формы
- вибрионы(имеют один завиток в виде запятой)
-спириллы(3-5 завитков)
-спирохеты
7 Этапы приготовления микропрепаратов из культур микробов
Взятие материала для исследования.
1)обезжиривание предметного стекла(мыло)
2)прокалить бактериальную петлю и нанести на стекло 2-3 капли физ.р-ра
Для приготовления препарата исследуемый материал берут из пробирки, колбы или чашки Петри бактериологической петлей или стерильной пипеткой. В некоторых случаях используют для этой цели препаровальные иглы. Пробирку с бактериальной культурой берут в левую руку, а петлю за петледержатель — в правую. Петлю прожигают в пламени горелки до покраснения. Вращательным движением вынимают из пробирки ватную пробку, прижимая ее пальцами правой руки к ладони, и обжигают край пробирки. Осторожно вводят петлю в пробирку, охлаждая ее о внут¬реннюю поверхность, после чего легким скользящим движе¬нием берут материал. Затем вынимают петлю из пробирки, снова обжигают ее край и затыкают пробкой. После при¬готовления препарата петлю обязательно прожигают (стерили¬зуют) в пламени. Жидкий материал из пробирки или колбы можно набирать пипеткой, удерживая ее в правой руке и закрывая отверстие пальцем.
Приготовление фиксированных препаратов-мазков. Для при¬готовления препарата на обезжиренное предметное стекло наносят каплю воды или изотонического раствора хлорида натрия, в которую петлей вносят исследуемый материал и распределяют его таким образом, чтобы получить тонкий и равномерный мазок диаметром около 1—1,5 см, только при таком распределении материала в мазке можно увидеть изолированные бактериальные клетки. Если исследуемый материал содержится в жидкой среде, то петлей его непо¬средственно наносят на предметное стекло и готовят мазок. Мазки высушивают на воздухе или в струе теплого возду¬ха над пламенем горелки. Для фиксации мазка предметное стекло (мазком вверх)
8 Способы окраски. Простой метод окраски, определение, техника и назначение.
Способы окраски:
-негативные(с помощью специальных приемов окрашивается фон мазка, и тогда на нем хорошо видны неокрашенные бактериальные клетки)
-позитивные(окрашиваются сами бактериальные клетки, хорошо видимые на неокрашенном фоне мазка)
а)простые- используется один краситель
б) сложные -используются два и более красителей: диффаренциально-диагностические и специальные
Простой метод окраски. При данном методе используют только один краситель. На фиксированный препарат, помещенный на мостике над сливной чашкой, наливают раствор метиленовой сини (окрашивают 4-5 мин), либо карболовый фуксин Пфейффера (1-2 мин), либо карболовый генцианвиолет (1-2 мин). Краску смывают водой из бутыли, препарат высушивают фильтровальной бумагой и наносят каплю иммерсионного масла. Готовый препарат помещают на предметный столик и микроскопируют. Окраска простым способом позволяет выявить наличие или отсутствие микроорганизма, его форму, расположение клеток, определить размеры.
Сложные (дифференцирующие) методы окраски. Они отличаются от простых методов тем, что препарат окрашивают несколькими красками, а в отдельных случаях используют еще специальные реактивы (раствор Люголя, кислоты и др.). Сложные методы позволяют выявить наличие (или отсутствие) отдельных структурных элементов и некоторых органических соединений клетки, чем и определяют тинкториальные свойства каждого вида микроба.
