Методика виконання роботи

Робота виконується в два етапи. На першому етапі (перше заняття) студенти використовують харчові продукти, що мають один або кілька вад мікробиального походження для виділення чистої культури та візуального вивчення.

Заняття 1

У лабораторному журналі зазначають за наступною схемою вихідні дані досліджуваного об'єкта:

• Найменування об'єкта

• Органолептичні показники продукту: Колір Запах Консистенція Характеристики мікробіологічного пороку: Зовнішній вигляд Колір

Потім слід приготувати препарат «роздавлена ​​крапля» для дріжджових і мікроскопічних грибів і «фіксований мазок для бактерій».

Провести мікроскопіровання, виконати мікрографии і описати морфологічні ознаки препаратів: форми клітин, їх поєднання і розміри, здатність до утворення спор, форму споронносцев.

По закінченню вивчення необхідно класифікувати виявлені мікроорганізми по їх приналежності - мікоміцети, дріжджі, бактерії. Далі виконуються операції по виділенню чистої культури мікроорганізмів методом Дрігальского.

Техніка виконання посіву за методом Дрігальского

1. Взяти кожному студенту для посіву по дві чашки Петрі з мясопептонний агаром (для бактерій) або сусло агаром (для дріжджів і мікоміцетов).

2. Надписати їх по торця кришки, вказавши дату, номер чашки, ініціали, поставити на стіл кришками вгору.

3. За допомогою профламбіруваної бактеріологічної петлі взяти невелику кількість досліджуваного матеріалу і внести в пробірку з 5 мл стерильної води і добре перемішати.

4. Одну краплю такої суспензії за допомогою петлі або стерильної піпетки нанести на поверхню агару першої чашки. Стерильним шпателем Дрігальского акуратно і ретельно розподілити по всій поверхні середовища. Цим же шпателем (НЕ фламбіруя його) проводять по поверхні другий, при необхідності третьої чашки. По закінченню посіву шпатель занурюють у дезінфікуючий розчин.

5. Чашки перевертають догори дном, щоб накопичується конденсаційна вода при застиганні середовища і зростання культури не стікала з кришки і не розмивала зростання. Поставити підготовлені посіви в термо стат, чашки з МПА при температурі 37 ° С, з сусло агаром при - 32 ° С.

6. Оформити протокол заняття.

Заняття 2.

Другий етап роботи здійснюється на наступному занятті і складається з підрахунку кількості колоній, що виросли на чашках Петрі, опису їх культуральних ознак, мікросопіческого контролю чистоти куль тури в колоніях; ізоляції чистої культури на скошений агар в пробірку.

Для цього виконують дії в такій послідовності.

1. Візуально, не відкриваючи кришки чашки Петрі, описати культуральні ознаки колоній мікроорга низмов переважаючого типу на щільних середовищах (МПА, СА):

Положення в середовищі (поверхневе або глибинне), форма колонії, оозмір колонії, профіль, блиск, колір

Використовуючи мале збільшення мікроскопа відзначити для колонії форму краю, структуру.

Для бактерій і дріжджів дотик до поверхні петлі визначають консистенцію (м'яка, слизова, тягуча, тендітна) Консистенція

2. Провести мікроскопіровання колонії. Для цього з невеликої частини колонії приготувати фіксований мазок і пофарбувати його фуксином. Мікроскопіровать з використанням іммерсионного об'єктива. Наявність однорідних клітин свідчить про чистоту культури.

Виконати мікрографію.

3. Пересіяти культуру вивченої колонії на скошений агар в пробірку. Дотримуючись умов стерильності, відібрати бактеріологічною петлею частину мікробної біомаси і посіяти її штрихом на поверхню скошеного агару. Операції з пересівання бажано виконувати вдвох: один відкриває кришку чашки Петрі; другий в цей час виймає пробку, відбирає петлею матеріал і розподіляє його штрихом по поверхні середовища і закриває пробкою пробірку. З боку агару на стінці пробірки вказують дату посіву, ПІБ і номер групи.

4. Оформити протокол.