3. L'hydrolyse de l'amidon par α – amylase du salive
On rince la bouche 2-3 fois par l'eau pour l'éloignement des restes de la nourriture. On mesure 50 ml de l'eau distillée et on rince la bouche par cette eau pendant 3-5 minutes en plusieurs reprises. On utilise le liquide recueilli pour le travail.
On prépare 2 bains-maries avec la température 37-40 et 100 °С. On verse les solutions dans les éprouvettes conformément au tableau. On place les éprouvettes numérotées aux bains. Dans toutes les 2 minutes on porte sur le disque en verre par la baguette en verre la goutte de la solution de Lugol, et puis par la baguette propre on porte la goutte de la solution de l'éprouvette. On marque la peinture qui est apparue au mélange de deux gouttes. On continue l'expérience durant 10-15 minutes. On apporte les résultats de l'expérience et les conclusions sur le cours de l'hydrolyse (complet, partiel, ne passe pas) au tableau (le tableau 1).
Le tableau 1
Les résultats de l'hydrolyse de l'amidon
№ |
Le contenu de l’éprouvette |
La température, °С |
Le temps, la minute |
La couleur dans la réaction avec l'iode |
La présence de l'hydrolyse |
1 |
3 ml de la solution de l’amidon + 2 ml 10 % H2SO4 |
37 |
2 4 … |
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2 |
3 ml de la solution de l’amidon+2 ml 10 % H2SO4 |
100 |
2 4 … |
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3 |
3 ml de la solution de l’amidon + 3 ml de l’amylase |
37 |
2 4 … |
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4 |
3 ml de la solution de l’amidon + 3 ml de l’amylase + 1 ml 2N HCl |
37 |
2 4 … |
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5 |
3 ml de la solution de l’amidon + 3 ml de l’amylase bouillie |
37 |
2 4 … |
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Le schéma de l'hydrolyse de l'amidon par α-amylase du salive:
4. Le trait spécifique de l'action des enzymes de l’amylase et de la saccharase
Les substrats spécifiques pour l’amylase sont les polysaccharures de l'amidon et le glycogène. Le disaccharure de la saccharose sert du substrat pour l’enzyme de la saccharase. On peut découvrir le cours de l'hydrolyse en présence des enzymes selon l'essai de Trommer que les hydrates de carbone initiaux ne donnent pas.
On numérote quatre éprouvettes. Dans les éprouvettes 1 et 2 on verse selon 2 ml de la solution de l'amidon; aux éprouvettes 3 et 4 – selon 2 ml de la solution de la saccharose. Aux éprouvettes 1 et 3 on apporte selon 0,5 ml de la solution du salive, et aux éprouvettes 2 et 4 – selon 0,5 ml 1 % de la solution de la saccharase au levain. On mélange et on met sur 10 minutes au bain-marie avec la température 38-40 °С. Après le refroidissement on passe les réactions avec l'iode sur la présence de l'amidon dans les essais 1 2 et l'essai de Trommer sur la présence du glucose – dans les essais 3 et 4. On fait la conclusion sur le trait spécifique des enzymes étudiés.
Les questions de contrôle
1. Quel est le rôle des enzymes dans l'organisme?
2. Vers quelle classe des liaisons chimiques on peut porter les enzymes?
3. À quelles classes se rapportent les enzymes utilisés dans le travail laboratoire?
4. Pourquoi pendant le bouillage des solutions des enzymes se passé leur inactivation?
5. Dans quoi se manifeste le trait spécifique de la saccharase et de l’amylase? Comment on peut la prouver?
6. Quelle influence exerce l’abaissement de рН du milieu et sur l'activité α-amylase du salive et pourquoi?
7. Quel principe se trouve à la base de la définition qualitative de l’enzyme?