1. L’action des activateurs et des inhibiteurs sur l’α-amylase de la salive.

Dans la première éprouvette on verse 1 ml de solution de chlorure de sodium 1 %, dans la deuxième on verse la solution de sulfate de cuivre 1 %, dans la troisième - 1 ml d’eau distillée. Dans toutes les éprouvettes on ajoute 2 ml de solution d’amidon 0,5 % et 2 gouttes de la salive dissous dans l’eau (1:5). On mélange le contenu des éprouvette en les secouant, ensuite on les place dans le thermostat à liquide lors de la température 37 °С. Dans intervalles à 1 minute on prend les essais des éprouvettes dans les éprouvettes nettes (0,3-0,5 ml) et on fait la réaction avec la solution de Lugol. On écrit les résultats (la couleur de la solution) dans le tableau. On fait l’hydrolyse pendant 5 minutes. On fait la conclusion de l’action (l’activation ou l’inhibition) des agents d’addition étudiés.

Observations:

№ éprouvette		1	2	3
Agent d’addition		NaCl	CuSO4	H2O
Temps, min	1
	2
	3
	4
	5

Conclusion:

2. La détermination de l’activité de l’ α-amylase de la salive d’après Wolgemut.

Cette méthode se base sur la dilution limitante de la solution d’α-amylase où il y a aussi sous les conditions determinées le détachement de la quantité donnée d’amidon à l’érythrodextrine. On peut utiliser la méthode de Wolgemut pour déterminer l’ α-amylase dans le suc pancréatique, dans le sang, dans l’urine et dans les autres bioliquides. Mais cette méthode donne les résultats approximatifs.

On prend de la salive. On met 1 ml de salive dans l’éprouvette, on ajoute 9 ml d’eau distillée et on mélange. On reçoit la solution de salive (1:10).

On verse 1 ml d’eau dans 10 éprouvettes énumérées. Dans la première éprouvette on ajoute 1 ml de solution de salive et on mélange par la rétraction et la déflation du liquide de la pipette pendant 3 fois. Ensuite on place 1 ml de liquide de la première éprouvette dans la deuxième, en mélangeant le liquide de la même manière. Ensuite on place 1 ml de liquide de la deuxième éprouvette dans la troisième etc. Après le mélange dans la 10-ème éprouvette on élimine 1 ml de liquide.

On ajoute dans toutes les éprouvettes à partir de la 10-ème, 2 ml de solution d’amidon à 0,1 % et on mélange le contenu. On place les éprouvettes dans le thermostat à 37 °С à 30 minutes.

Dans 30 minutes on réfroidit les éprouvettes sous le robinet et on ajoute dans chaque éprouvette 1 goutte de la solution de Lugol. On écrit les résultats dans le tableau. On marque l’éprouvette avec la plus grande dilution de la salive où il y a le détachement de l’amidon à l’érythrodextrine qui donne avec l’iode la couleur rouge foncée.

On exprime l’activité de l’ α-amylase en quantité de millilitres de la solution d’amidon à 0,1 % qui peut détacher 1 ml de salive non diluée lors de la température 37 °С pendant 30 minutes jusqu’au stade de l’érythrodextrine.

Par exemple : si la couleur rouge foncée a été remarquée dans la 4-ème éprouvette où la salive a été diluée 160 fois. 1 ml de salive non diluée détacherait 160 fois plus de la solution d’amidon pendant 30 mintues lors de la température 37 °С: 2 ml160 = 320 ml de solution d’amidon à 0,1 %. On le prend pour 320 unités de l’ α-amylase d’après Wolgemut: А_37°/30' = 320 unités.

Observations:

№ épr	Dilution de la salive	Couleur en réaction avec l’iode
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Calculs: