3 6 Тема 1. Определение подлинности растительного сырья
Методика. 1. Поперечный срез или порошок сухого сырья помещают на предметное стекло, прибавляют один из реактивов и накрывают покровным стеклом. 2. Препарат помещают на предметное стекло, накрывают его по-кровным стеклом, а реактив капают рядом с покровным стеклом. Затем под-носят фильтровальную бумагу к противоположному углу стекла. При этом жидкость засасывается под стекло, а элементы клеток или клеточное содер-жимое вступает в химическое взаимодействие с реактивом. При использо-вании второго метода под микроскопом можно наблюдать за ходом реакции.
Природу клеточной оболочки можно установить реакциями на целлюло-зу и на лигнин (одревеснение).
Опыты 1—4. Целлюлоза (клетчатка). Поперечный срез или порошок (со-скоб) сухого сырья помещают на предметное стекло и прибавляют один из следующих реактивов:
а) хлор-цинк-йод — окрашивает клетчатку в сине-фиолетовый цвет; проб-ка и кутикула могут принимать окраску от желтой до коричневой;
б) йод с кислотой серной — окрашивает целлюлозу в синий цвет; окрас-ка интенсивнее, когда в клеточной оболочке больше целлюлозы и меньше других компонентов (лигнина, кутиноподобных веществ и др.);
в) аммиачный раствор меди (II) оксида — под его влиянием клетчатка медленно разбухает и растворяется, кутикула остается нерастворенной;
г) раствор Люголя (0,5 %-ный раствор йода в 1 %-ном растворе калия йодида) — окрашивает целлюлозу в желтый цвет.
Опыт 5. Одревесневшие или лигнифицированные клеточные стенки. Срез корня алтея помещают на предметное стекло в 1 %-ный спиртовый раствор флороглюцина. Реактив удаляют фильтровальной бумагой, а на срез наносят каплю кислоты хлористоводородной концентрированной и через 1 мин при-бавляют каплю глицерина. Срез накрывают покровным стеклом и изучают под микроскопом при м/у. Одревесневшие оболочки клеток приобретают вишневое окрашивание.
Опыт 6. Крахмал. Поперечный срез корня алтея помещают на предмет-ное стекло и добавляют 1—2 капли раствора Люголя.
Крахмальные зерна окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Для опреде-ления формы, типа и размеров крахмальных зерен препарат готовят в воде или 30 %-ном растворе глицерина.
Опыты 7—9. Слизь. Поперечный срез корня алтея или порошок семян льна помещают на предметное стекло и прибавляют один из перечисленных ниже реактивов.
Реакция с метиленовым синим. Срез помещают на несколько минут в спир-товый раствор метиленового синего (1:5000), затем переносят в глицерин. Слизь окрашивается в голубой цвет.
меди сульфатом и щелочью. Срез помещают на 5—10 мин в насыщен-ный раствор меди сульфата, промывают водой и переносят в 50 %-ный ра-створ калия гидроксида. Слизь окрашивается в голубой цвет (растения сем. мальвовых) или в зеленый (растения сем. лилейных), что указывает на раз-личие в химическом составе слизи.
Реакция с тушью. Порошок сырья помещают на предметное стекло в каплю свежеприготовленного раствора туши (1:10) и перемешивают иголкой. На темно-сером фоне выделяются беловатые клетки со слизью, не окрашенные тушью (слизь препятствует проникновению туши).
Опыт 10. Инулин. Реакция Молиша является общей на углеводы, но ею пользуются для обнаружения инулина в отсутствие крахмала (в основном
растений семейства сложноцветных). Обработка микропрепарата спиртом
Микроскопический анализ ЛРС |
3 7 |
|
|
|
|
|
|
|
усиливает формирование сферокристаллов инулина. Поперечный срез корня одуванчика или девясила помещают в 1—2 капли раствора α-нафтола (или тимола) и вводят 1 каплю кислоты серной концентрированной; появляется розово-фиолетовое окрашивание (α-нафтол) или карминово-красное (ти-мол). Крахмал вступает в указанные реакции, поэтому его присутствие надо исключить, проведя предварительно реакцию с йодом.
Опыт 11. Эфирное масло. Поперечный срез аира помещают на 2—3 мин
раствор судана III, а затем просматривают в воде или 30 %-ном растворе глицерина. Клетки, содержащие эфирное масло, окрашиваются в зеленый цвет.
Опыт 12. Жирное масло. Срез семян льна помещают на 2—3 мин в рас-твор судана III, затем реактив удаляют фильтровальной бумагой, а срез про-мывают 50 %-ным спиртом и переносят в глицерин. Капельки жирного масла окрашиваются в оранжево-красный цвет.
Опыт 13. Гидроксиантрахиноны. Поперечный срез коры крушины поме-щают на предметное стекло в каплю 5 %-ного раствора натрия гидроксида или аммония гидроксида, прибавляют каплю глицерина, накрывают покров-ным стеклом и наблюдают под микроскопом красное или фиолетово-крас-ное окрашивание тканей, в которых локализуются антраценпроизводные.
Опыт 14. Дубильные вещества. Поперечный срез коры дуба или ко-ры калины помещают в каплю 1 %-ного раствора железа (III) хлорида или 1 %-ного раствора железоаммониевых квасцов, реактив удаляют фильтро-вальной бумагой, на предметное стекло наносят каплю воды, глицерина или хлоралгидрата, накрывают покровным стеклом и наблюдают окрашивание препарата под микроскопом. Ткани, содержащие дубильные вещества, окра-шиваются в черно-синий или черно-зеленый цвет.
?