- •Инструкция к практическому занятию №10 тема: «Изучение грамположительных патогенных кокков»
- •Задание № 1
- •1.1 Изучите правила забора и доставки патологического материала при заболеваниях вызванных стафило-, стрепто- и пневмококками Общие правила получения биологического материала
- •2.1 Изучите методы выявления стафило-, стрепто- и пневмококков при различных заболеваниях
- •Подготовительный этап
- •Основной этап
- •Основной этап
- •Задача № 3
- •Основной этап
- •Контрольные вопросы:
- •Литература:
- •Взятие мазка из носа
- •Взятие мазка из зева
- •Общие сведения:
- •Техника выполнения
2.1 Изучите методы выявления стафило-, стрепто- и пневмококков при различных заболеваниях
Стафилокковые инфекции – это многочисленные гнойно-воспалительные заболевания кожи, подкожной клетчатки, слизистых оболочек, раневые, послеоперационные, послеродовые нагноения, пищевые токсикоинфекции и др.
Наиболее частым возбудителем стафилококковых инфекций является Staphylococcus aureus (греч. – золотистый стафилококк).
При заболеваниях, вызванных стафилококками в лабораторию доставляется следующий материал: гной, отделяемые слизистых оболочек, кровь, мокрота, моча, рвотные массы, испражнения больных.
Подготовительный этап
Подготовить рабочее место согласно правил работы в бактериологической лаборатории.
Подготовить емкости с дез. растворами для обеззараживания предметов, используемых в процессе работы, согласно инструкции.
Основной этап
Бактериоскопическое исследование.
Гной и др. жидкие материалы, исключая кровь, микроскопируют, окрашивая мазки по Граму. Стафилококки располагаются небольшими скоплениями, попарно, образуя виноградную гроздь.
Бактериологическое исследование.
В первый день материалы высевают в чашки Петри с 3-5 % кровяным агаром. Чашки помещают в термостат при температуре 37ºС на 18-24 часа. Спустя сутки на плотных средах золотистые стафилококки образуют средней величины выпуклые непрозрачные колонии мелкозернистой структуры. Для дальнейшего исследования колонии пересевают на скошенный агар, а получив на третий день чистую культуру, исследуют плазмокоагуляционную активность, засевая чистую культуру в пробирку с цитратной плазмой. В положительных случаях через 2 часа в термостатных условиях плазма свертывается. Для окончательной идентификация стафилококков применяют серологический метод исследования (определение стафилококкового антитоксина в сыворотке крови).
Обязательным является определение чувствительности выделенных стафилококков к антибиотикам.
Патогенный золотистый стафилококк отличается от условно-патогенных образованием золотистых колоний, способностью гемолизировать кровь, коагулировать плазму кролика, выделять гиалуронидазу, лецитоветеллазу, ДНК-азу, окислять маннит в аэробных условиях и ферментировать его в отсутствии кислорода, продуцировать альфа-токсин, вызывать у кролика при интрадермальном введении некроз кожи.
Стрептококковые инфекции – это гнойные поражения кожи, слизистых оболочек, рожистое воспаление, ангина, скарлатина, ревматизм, сепсис и др.
При заболеваниях, вызванных стрептококками в лабораторию доставляется следующий материал: гной, отделяемые слизистых оболочек, кровь, моча.
Основной этап
Бактериоскопическое исследование.
В мазках из гноя, мокроты, отделяемого слизистых оболочек, окрашенных по Граму, стрептококки располагаются короткими цепочками, небольшими группами в виде диплококков или единичных кокков (их трудно дифференцировать от стафилококков).
Бактериологическое исследование.
Гной, мокроту, отделяемые слизистых оболочек высевают на чашку Петри с сахарным и 5 % кровяным агаром. На следующие сутки инкубации в термостате при температуре 37ºС вырастают мелкие, плоские, суховатые колонии зернистой структуры.
Серологическое исследование больных при стрептококковых инфекциях предпринимается после безуспешных бактериологических исследований и предусматривает определение в крови стрептококкового антигена и титра специфических стрептококковых антител к токсинам. Стрептококковый антиген определяют при помощи реакции связывания комплемента (РСК).
Пневмококковые инфекции – это крупозная пневмония, катаральная пневмония, ползучая язва роговицы, реже нагноительные процессы среднего уха, гайморовой полости.
При заболеваниях, вызванных пневмококками в лабораторию доставляется следующий материал: гной, мокрота, кровь, спинномозговая жидкость.
