15. Методы получения трансгенных растений

Перенос генов в растительные клетки и их встраивание в геном растения хозяина осуществляется благодаря специфическим структурам.

Имеется несколько методов:

А. Метод прямого переноса генов в растение.

Эти методы довольно многочисленны:

1. Трансформация растительных протопластов. Для трансплантации может быть использован практически любой ДНК вектор.

2. Культуру протопластов сначала заражают агробактериями, которые затем используют в качестве вектора.

3. Микроинекции ДНК. Этот метод наиболее универсален. Эффективность этого метода 10-20% не зависимо от типа вектора.

4. Метод электронизации. Метод основан на повышении проницаемости биомембран за счет действия импульсов высокого напряжения.

5. Метод упаковки в липосомы. Липосомы - сферические тельца клетки , оболочки которых образованы фосфолипидами.

В. Метод биологической баллистики

Это один из самых эффективных методов. Он основан на напылении ДНК вектора на мельчайшие частички вольфрама, которыми затем бомбардируют клетки нужной нам культуры. Бомбардировка осуществляется при помощи специальной баллистической пушки за счет перепада давлений. Часть клеток гибнет, но живые трансформируются их затем используют для регенерации растений с нужными нам признаками.

16. Культура клеток и тканей. История вопроса.

Клеточная инженерия- одно из наиболее важных направлений в биотехнологии. Она основана на использовании принципиально нового обьекта- изолированной культуры клеток или тканей эуккариотических организмов, а так же на уникальных свойствах растительных клеток из одной клетки давать целое растение.

Это направление дало возможность получать более дешовые лекарства, выращивать безвредные растения их клональное размножение идр.

Бурное развитие клеточной инженерии приходится на 50 годы прошлого столетия. Первые попытки выращивания изолированной клетки было начато в конце 19 начале 20 века немецким ученым Х.Фехтенгом и С. Рехингер но неудачно. Но их работы представляли большой интерес для дальнейшего развития этого направления. Они определили минимальные размеры тканей и их полярность.

Первые положительные успехи были получены только в 1922 году американским ученым В. Роббинсом и немцем В.Котте. Независимо друг от друга они доказали возможность вырастить меристему кончиков корней томатов и кукурузы на искусственной среде.

Считается, что их работы легли в основу метода культуры изолированных корней растений.

Настоящее развитие метода культуры тканей и клеток высших растений начато в 1932 г. с работ французского ученого Р. Готре и американского исследователя Ф. Уайта.

С этого момента начались активные5 исследования по разработке новых сред и новых объектов. К 1959 году насчитывалось уже 142 вида высших растений выращиваемых в стерильной культуре.

С 1955 г. после5 открытия Ф.Скугом и С. Миллером нового класса фитогормонов – цитопинанов, появилась возможность стимулировать деление клеток в контролируемых условиях, получая в большом количестве генетически однородных безвирусных растений.

Сейчас продолжается быстрый прогресс клеточной инженерии позволяющий значительно ускорить процесс селекции сельскохозяйственных растений и животных.