4.3 Гонадотропная инъекция производителей и получение зрелых половых продуктов

Подготовку к гормональному стимулированию производителей начинают при температуре воды, близкой к значениям, оптимальным для инкубации икры.

Для стимуляции созревания производителей на данном рыбоводном заводе используют гипофизарные инъекции.

Высушенные ацетонированные гипофизы растирают пестиком в порошок в

сухой чистой фарфоровой ступке . Необходимую дозу гипофиза

взвешивают на торсионных весах отдельно для самок и самцов. К взвешенной

дозе добавляют физиологический раствор (6,5 г химически чистой

поваренной соли на один литр дистиллированной воды) или раствор Рингера

для холодноводных и осторожно перемешивают. Количество гипофиза

определяют в зависимости от температуры воды, массы рыбы, вида, пола и

активности препарата (в лягушачих единицах).

Для инъекций используют медицинские шприцы. Длину (2,5–3,8 см) и

диаметр иглы, а также объем (1–5 мл) шприца подбирают в зависимости от

размера рыбы, дозы и типа препарата. При использовании ацетонированных

гипофизов необходимо использовать иглы большего диаметра (для

внутривенных инъекций). При приготовлении раствора ГГП и суспензии

ацетонированного гипофиза необходимо, чтобы объем готового препарата для

рыб массой до 5 кг не превышал 2 мл, на каждые следующие 5 кг массы рыбы

объем раствора увеличивается на 1 мл.

Инъекцию производят в спинные мышцы между спинными и боковыми

жучками на уровне 3–5 спинной жучки .

При введении препаратов

в мышечные ткани необходимо соблюдать осторожность и следить за тем,

чтобы рыба при сжатии мышц не вытолкнула препарат. При инъекции

препарат не должен вводиться подкожно, опасно также слишком глубокое

введение иглы.

Если доза препарата для инъецирования велика, то её делят на две части и

вводят в разные стороны спины. Приготовление и набор в шприцы суспензии

ацетонированного гипофиза производится за 30–40 минут до начала инъекций.

При разбавлении глицериновой вытяжки гипофиза осетровых используется

дистиллированная вода. Вместе с тем, следует отметить, что в последние годы

ГГП практически не применяется, вследствие прекращения производства

осетрового гипофиза, получаемого от взрослых особей, обусловленного

запрещением промысла осетровых.

Полчучение зрелых половых продуктов

Время созревания производителей зависит от температуры воды приведена в таблице

Таблица : Продолжительность созревания самок осетровых рыб при различной температуре (А – время просмотра первых самок;

Б – время, после которого не удается получить рыбоводно-продуктивную икру).

Просмотр рыб начинают в соответствии с расчетным временем созревания

первых самок. Небольших рыб сгибают в латеральном направлении и

оценивают степень овуляции по выделению овариальной жидкости или икры

(Рисунок 60):

• рыб, дающих струю икры, готовят к операции по сцеживанию (время

от просмотра до сцеживания икры у таких рыб не должно превышать

30–40 минут, например, у севрюги это может привести к полной

резорбции всей икры);

• рыб, дающих овариальную жидкость или отдельные икринки, –

просматривают через 1 час;

• рыб, не показывающих признаков созревания, – просматривают через 2–3 часа.

Рисунок Просмотр зрелой самки для оценки степени овуляции.

У крупных самок периодически пальпируют брюшко, и по степени его

мягкости, определяют наиболее зрелых из них. Для оценки степени овуляции

крупных рыб целесообразно использовать метод УЗИ , применение которого позволяет избежать возможных стрессов. При этом рыба остается

рыб в воде. Рыб, не показавших признаков созревания по истечение предельного времени созревания, бракуют.

Взятие половых продуктов у самцов начинают после того, как первые

самки показали явные признаки созревания – обильная струя овариальной

жидкости с единичными икринками. В случае обнаружения самок, готовых к немедленному отбору икры, сначала получают икру, а потом сперму.

Отбор овулированной икры используют метод Подушки

При использовании этого метода самку помещают на специальный

наклонный столик, соответствующий размеру рыбы, в положении на спине

головой вверх, так чтобы хвост свисал. Через половое отверстие вводят

скальпель, направленный режущей поверхностью вверх (ширина лезвия

должна быть меньше диаметра генитального отверстия оперируемой рыбы)

и делают надрез длиной 1–2 см в каудальной части стенки одного или обоих

яйцеводов, открывая тем самым небольшое отверстие в брюшной полости

Через полученный разрез икру сцеживают, аккуратно массируя заднюю треть брюшка. Для поддержания сделанного разреза в открытом состоянии можно использовать рукоятку скальпеля или шпатель.

Сцеживание продолжают до тех пор (обычно от 2 до 20 мин в зависимости

от размера самок), пока икра свободно вытекает из полости тела. Через час после

первого сцеживания, при котором отбирают 80–90% икры, проводят второе,

не требующее нового надреза яйцевода, а у крупных и высокоплодовитых

рыб иногда и третье сцеживание . После получения икры не

требуется зашивать и дополнительно обрабатывать разрезы.

Получение спермы у самцов путем сгибания, направляя струю эякулята в сухие чашки. В случае задержки использования отобранной спермы,

кратковременное её хранение осуществляют при температуре не выше

температуры воды, в которой содержались самцы.