Конъюгация у бактерий, определение, виды
КОНЪЮГАЦИЯ открыта в 1946 г. Ледербергом и Татумом
Конъюгация
– передача генетического материала от донорской к реципиентной клетке с помощью конъюгационных пилей.
Идет в 2 стадии: 1. Контакт поверхности клетки-донора и клетки- реципиента посредством половых пилей. 2. Прохождение генетического материала через конъюгативный мостик
ФОРМИРОВАНИЕ РАЗЛИЧНЫХ СОСТОЯНИЙ ПЛАЗМИДЫ F
§ F+ х F- = F+ (частота передачи F фактора близка к 100%);
§ Hfr х F- = F- gal+ (передаются хромосомные гены с высокой частотой – high frequency of recombination); § F' х F- = F+ gal+ (F фактор ведет себя как профаг ƛ)
Трансдукция, определение, виды.
Трансдукция
§ - передача генетического материала от донорской к реципиентной клетке с помощью умеренных бактериофагов
§ Фаговая ДНК встраивается в геном бактериальной клетки и существует ввиде профага.
§ Бактериальная клетка, содержащая профаг, называется лизогенной, само явление – лизогенией.
§ Лизогенизация связана с фаговой или лизогенной конверсией. Т.е. приобретение бактериальной клеткой новых свойств.
Виды трансдукции
неспецифическая (общая)
абортивная
специфическая
Неспецифическая трансдукция От клеток-доноров к клеткам-реципиентам переносится практически любой ген или несколько генов независимо друг от друга; В клетках-реципиентах принесенный фагом фрагмент ДНК клетки-донора включается в гомологичную область ДНК; Фаги являются только переносчиками генетического материала от одних бактерий к другим.
Специфическая трансдукция Особенности трансдукции фагом ƛ: - Трансдуцировать могут те фаги ƛ, которые образовались в результате индукции (УФ лучи и т.д.); - Фаг ƛ трансдуцирует только генетические локусы gal или bio; - Трансдуцируются те гены, которые локализуются около профага (ƛ d gal, ƛ d bio); В клетках-реципиентах происходит включение гена бактерии-донора вместе с ДНК дефектного фага.
Абортивная трансдукция Принесенный фагом фрагмент ДНК клетки- донора не встраивается в ДНК клетки- реципиента, а остается автономным; При делении бактериальной клетки трансдуцирующий фрагмент ДНК-донора передается только одной из 2х дочерних клеток; В дальнейшем – утрачиваются.
ПЦР-диагностика, сущность.
ПОЛИМЕРАЗНАЯ ЦЕПНАЯ РЕАКЦИЯ
Цели обнаружение в патологическом материале конкретного вида микроорганизма без выделения чистой культуры
идентификация микроорганизмов
генотипирование микроорганизмов
ПЦР Суть - циклическое удвоение (амплификация) определенного участка ДНК с помощью праймеров. Увеличение количества копий идет в геометрической прогрессии.
Молекулярная гибридизация, сущность.
МЕТОД МОЛЕКУЛЯРНОЙ ГИБРИДИЗАЦИИ
Цель
Выявления степени сходства различных ДНК (при идентификации микроорганизмов – сравнение ДНК выделенного штамма с ДНК эталонного штамма)
Секвенирование днк, сущность.
Секвенирование ДНК Позволяет определить последовательность нуклеотидов в исследуемом фрагменте ДНК
Этапы секвенирования 1. С помощью ПЦР накапливают достаточное количество копий исследуемого участка ДНК
2. Молекулы ДНК с помощью щелочного гидролиза разрезают на фрагменты различной длины
3. Добавляют дидезоксинуклеотиды, каждый из которых помечен определенным красителем и присоединяется к комплементарным нуклеотидам на 3-конце каждого фрагмента
4. Смесь полученных меченных фрагментов ДНК подвергается электрофорезу в геле. Первыми будут двигаться фрагменты, имеющие наименьшую молекулярную массу (1 нуклеотид), вторыми мимо оптического датчика пройдут ДНК в 2 нуклеотида. Результаты обрабатываются автоматически
12.Этапы и факторы симбиоза человека с микробами. Отличия патогенов, резидентов и гетеробионтов.
13.Правила формирования микробиоценоза организма человека.
14.Роли резидентов в орг-ме человека.
15. Микробные ассоциации организма и понятие о биопленках.
Биопленки- это организованные сообщества микробов, формирующиеся в усл.текучих сред. Они образуются во всех естественных жидких средах, где есть направленное движение жидкости.
16. Основные биотопы макроорганизма, основные представители резидентной микрофолоры.
17. Понятия «инфекция», «инфекционный процесс», «инфекционная болезнь», «инвазия».
Инфекция - сложный комплекс взаимодействия возбудителя и макроорганизма в определенных условиях внешней и социальной среды, включающий динамически развивающиеся патологические, защитно-приспособительные, компенсаторные реакции (объединяющиеся под названием «инфекционный процесс»).Совокупность физиологических и патологических реакций, которые возникают и развиваются в макроорганизме в процессе взаимодействия с патогенным микроорганизмом
Инфекционный процесс - комплекс реакций, возникающих в макроорганизме в результате внедрения и размножения в нем патогенных микроорганизмов и направленных на обеспечение гомеостаза и равновесия с окружающей средой; проявления Инфекционный процесс варьируют от носительства возбудителей до клинически выраженного заболевания.
инфекционная болезнь – это частное проявление инфекционного процесса, крайняя степень его развития
инвазия • Аналогичные процессы, вызванные простейшими