Подлинность:
I. Химические методы.
а) общие реакции.
1. Гидроксамовая проба (это по ГФ для БПсолей, фенокси окса натрия).
ЛП + смесь 1н NH2OH•HCl + 1М NaOH, через 3 минуты + 1М AcCOOH и раствор Cu(NO3)2 зеленый осадок (если вместо нее FeCl3 и HClр., то появляется синее окрашивание)
2. Реакция на катионы (Na, K, Nov, N,N-дибензилэтилендиамин).
K, Na соли: ЛП сжигают в тигле, растворяют в воде, фильтруют, в фильтрате определяют. К с винной кислотой, Na с Zn(UO2)3(CH3COO)8
Новокаин определяют по реакции образования азокрасителя с β-нафтолом.
N,N-дибензилэтилендиамин: ЛП + NaOH, выделившийс 1’,1’-диметил ЭДР экстрагируют эфиром, эфир отгоняют, добавляют пикриновую кислоту, перекристолизовывают и определяют температуру плавления.
3. С реактивом Марки.
ЛП + реактив окрашивание нагревают, окрашивание меняется.
Соли БП |
Желто-коричневое |
Красно-коричневое |
Феноксимет. |
Красное |
Красно-коричневое |
Производные амп. |
- |
Оранжево-желтое |
Карбенициллин |
- |
Коричневое |
Оксациллин натрий |
Слабо-желтое |
Темно-желтое |
Производные амоксициллина |
- |
Темно-желтое |
4. НеГФ: реакция с хромотроповой кислотой в присутствии H2SO4к.
Соли БП |
Коричневое |
Фенокси |
Сине-фиолетовое |
Полусинтетические |
Желто-коричневое |
5. НеГФ: доказательство серы после минерализации.
а) мокрая минерализация с HNO3к SO42-
б) сухая минерализация. Спекают с кристаллическим NaOH, затем сушат в виде Na2S c Pb(CH3COO)2
6. НеГФ: с нитропруссидом Na. ЛП + NaOH до сухого остатка красного цвета. Потом добавляют нитропруссид натрия ярко-фиолетовое быстроисчезающее окрашивание.
7. НеГФ: окисление реактивом Толленса, Феллинга, Несслера. Исключение: ампициллин дает комплекс фиолетового цвета.
8. НеГФ: FeCl3 и HClконц. красно-фиолетовое окрашивание.
Частные реакции:
1. Образование кислотных форм БП: ЛП + HClр БП осадок растворяется в избытке HCl.
2. Витали-Морена на производные БП.
3. Ампициллин с р. Феллинга фиолетовое. С Нингидрином синее окрашивание.
II. Физико-химические методы:
1. СФМ (факрмакопейный для полусинтетических и производных пенициллина).
2. ИК Спектр (фармакопейный для полусинтетических).
3. ТСХ (фармакопейный для полусинтетических). Группа ампициллина на пластинах «Силуфол» , система ацетон:фосфатный буфер (3:20), детекция I2, должно быть 1 пятно на уровне ГСО.
Ампиокс: на пластине с закрепл. слоем талька. В системе бутанол: эфир:ацетон:вода (28:9:9:10). Проявляют I2 – 2 пятна на уровне РСО.
Чистота:
1. Спец. примеси – продукты синтеза или распада в составе БП NOV соли или карбенициллина динатриевой соли определяют количество БПNa соли, не более 1% (метод ВЖХ). Феноксиметилпенициллин феноксиуксусную кислоту методом ВЖХ (не более 0,5%).
2. Остаточные растворители (ГЖХ)
3. Светопоглащающие примеси. Определяют предельное значение Д при определенной длине волн. 1% амп. тригидрат =322 нм не более 0,2
4. Определение H2O
- Титрование по Фишеру.
- По схеме потери массы при высушивании. Температура сушилки 100-105°С.
5. Кислотность и щелочность.
6. рН потенциометрически в водной среде.
7. Термостабильность. Греют при 170° в течении 1,5 часа. Уменьшение суммы КО не д.б. более 10%
8. Удельное рващение α – в воде или спиртовых растворах.
9. Биологическая стандартизация: токсичность, стерильность, апирогенность.