- •«Мурманский государственный технический университет»
- •Методические указания к выполнению контрольной работы по теме: «Основные этапы биотехнологических производств»
- •1. Общие положения
- •2. Методические указания к выполнению контрольной работы
- •Процессы биотехнологических производств
- •3. Вопросы для самопроверки
- •4. Тестовые задания Приемы и методы стерилизации при работе в биотехнологической лаборатории
- •5. Практические задания
- •6. Рекомендуемая литература
3. Вопросы для самопроверки
Перечислите основные стадии биотехнологической схемы получения продуктов микробного синтеза.
Как определить физиологические потребности микроорганизмов в питательных веществах?
Какие методы применяют для обеззараживания питательных сред в биотехнологическом производстве?
Опишите последовательность получения посевного материала для промышленного производства целевого продукта.
Основное назначение ферментера.
От чего зависит проведение стадии выделения целевого продукта?
Какие методы применяют для отделения биомассы клеток от культуральной жидкости?
Что такое дезинтеграция, в каких случаях ее осуществляют?
Расскажите об основных методах дезинтеграции клеток.
В чем отличие сепарирования от центрифугирования?
В каких случаях выполняется стадия очистки целевого продукта?
Что такое сорбция ?
4. Тестовые задания Приемы и методы стерилизации при работе в биотехнологической лаборатории
Тест 1.
Выпишите правильный ответ:
1. Стерильная культура: а) содержит бактерии преимущественно 1 вида б) свободна от любых посторонних микроорганизмов
2. Стерилизацией называется: а) выделение бактерий и природного источника б) уничтожение патогенных микроорганизмов в) уничтожение всех микроорганизмов и их покоящихся форм
3. Перед работой бокс: а) моют б) кварцуют в) моют и кварцуют г) подметают
4. Стерилизацией называется: а) выделение бактерий и природного источника б) уничтожение патогенных микроорганизмов в) уничтожение всех микроорганизмов и их покоящихся форм
5. Перед работой бокс: а) моют б) кварцуют в) моют и кварцуют г) подметают
6. На микроорганизмы и их споры губительно действуют: а) видимая часть солнечного спектра, б) ультрафиолетовое излучение, в) g-лучи, г) ультрафиолетовое излучение, g-лучи
7. К методам стерилизации относят: а) промывку водопроводной водой б) промывку дистиллированной водой в) обработку ультрафиолетовым излучением 8. Расставьте в нужной последовательности операции по стерилизации посуды: а) промывка дистиллированной водой б) сушка в сушильном шкафу в) промывка хромпиком г) промывка детергентом д) промывка водопроводной водой е) стерилизация ж) закрывание пробками 9. Подберите соответствующие пары: 1. Автоклавирование 2. Дробная стерилизация а) нагревание до 60-80оС б) 105-130оС + давление 1-2 атм в) трехкратная обработка текучим паром г) обработка в сушильном шкафу при 140-180оС 10. Сделайте расчет концентрации солей в 200 мл маточного раствора макроэлементов среды Мурасиге-Скуга, учитывая, что на литр среды его потребуется 25 мл. Концентрация солей (мг/л) в 1 литре готовой среды должна быть: NH4NO3 - 1650 KNO3 - 1900 MgSO4 * 7H2O - 370 KH2PO4 - 170
Тест 2. Разделение и очистка веществ
Вариант 1 Выпишите правильный ответ: 1. Вещество переходит из одной жидкости в другую при 1. твердо-жидкофазной экстракции 2. жидко-жидкофазной экстракции 3. адсорбции 4. сепарации 2. Разделение веществ, при котором биомасса всплывает на поверхности культуральной жидкости 1. фильтрация 2. флотация 3. сепарация
3. Карбоксиметилцеллюлоза это 1. катионит 2. анионит
4. Ионообменная хроматография является частным случем хроматографии 1. бумажной 2. пластиночной 3. колоночной 5. Основоположник хроматографии 1. Сведберг 2. Йенсен 3. Цвет 6. Разрушение связей между носителем и осажденным веществом и перевод его в жидкую форму называется 1. адсорбция 2. электрофорез 3. элюция 4. фильтрация 7. Разделение веществ по массе характерно для 1. аффинной хроматографии 2. бумажной хроматографии 3. ультрацентрифугирования 8. При гель-электрофорезе разделение веществ производят 1. в водном растворе 2. в полиакриламиде 3. в растворе спирта 9. Двумерный гель-электрофорез используют для разделения веществ различающихся 1. массой 2. зарядом 3. массой и зарядом 10. При использовании детергентов молекула вещества 1. ренатурируется 2. денатурируется 3. теряет заряд 11. Додецилсульфат натрия придает молекуле 1. определенную конфигурацию 2. отрицательный заряд 3. положительный заряд
Выпишите недостающее слово: 12. Разделение культуральной жидкости и биомассы называется ____________. 13. Разделение веществ в водном растворе или пористом матриксе в электическом поле называется _________________.
Установите соответствие:
14. Группы методов дезинтеграции |
Методы |
1. Физические 2. Химические |
А. Ультразвук Б. Осмотический шок В. Декомпрессия Г. Разрушение толуолом Д. Разрушение ферментами |
Ответ: 1_______, 2_________.
15. Группы методов осаждения |
Методы |
1. Физические 2. Химические |
А. Нагревание Б. Концентрирование В. Высаливание Г. Осмотический шок Д. Добавление ацетона |
Ответ: 1_______, 2_________.
Вариант 2 Выпишите правильный ответ: 1. Вещество переходит из жидкой фазы в твердую при 1. твердо-жидкофазной экстракции 2. жидко-жидкофазной экстракции 3. адсорбции 4. сепарации
2. Разделение веществ, при котором биомасса остается на поверхности пористой мембраны 1. фильтрация 2. флотация 3. сепарация
3. Диэтиламиноэтилцеллюлоза это 1. катионит 2. анионит
4. Гидрофобная хроматография является частным случем хроматографии 1. бумажной 2. пластиночной 3. колоночной
5. Разделение веществ по скорости их осаждения предложил 1. Сведберг 2. Йенсен 3. Цвет
6. Наибольшая степень очистки веществ достигается при 1. гель-фильтрации 2. электрофорезе 3. аффинной хроматографии 4. гидрофобной хроматографии
7. Разделение веществ по степени сродства к растворителю характерно для 1. гель-электрофореза 2. бумажной хроматографии 3. ультрацентрифугирования
8. При гель-электрофорезе быстрее останавливаются молекулы 1. крупные 2. средние 3. мелкие
9. Двумерный гель-электрофорез протекает в 1. 1 этап 2. 2 этапа 3. 3 этапа
10. Хлористый цезий используется для 1. снятия заряда 2. разделения в градиенте плотности 3. дентаурации белка
11. Додецилсульфат натрия это 1. адсорбент 2. детергент 3. ионит Выпишите недостающее слово: 1. Задержание биомассы на пористой фильтрующей перегородке называется _________. 2. Разделение веществ с различной молекулярной массой и размером в колонке с пористым носителем называется ________________. Установите соответствие:
14. Группы методов дезинтеграции |
Методы |
1. Физические 2. Химические |
А. Применение вибраторов Б. Осмотический шок В. Растирание Г. Разрушение толуолом Д. Разрушение антибиотиками |
Ответ: 1_______, 2_________.
15. Группы методов осаждения |
Методы |
1. Физические 2. Химические |
А. Охлаждение Б. Концентрирование В. Высаливание Г. Разбавление Д. Добавление изопропанола |
Ответ: 1_______, 2_________.
Вариант 3 Выпишите правильный ответ: 1. Вещество переходит из твердой фазы в жидкую при 1. твердожидкофазной экстракции 2. жидкожидкофазной экстракции 3. адсорбции 4. сепарации
2. Биомасса отделяется от культуральной жидкости в центрифуге при 1. фильтрации 2. флотации 3. сепарации
3. Иониты используют при 1. флотации 2. сепарации 3. адсорбции
4. Тонкослойная хроматография является частным случем хроматографии 1. бумажной 2. пластиночной 3. колоночной
5. Понятие константа седиментации ввел 1. Сведберг 2. Йенсен 3. Цвет
6. В хроматографии на пластинках слой сорбента 1. заряжен положительно 2. инертен 3. заряжен отрицательно
7. В жидкостной хроматографии диаметр носителя равен 1. 1-3 мкм 2. 3-10 мкм 3. 10-30 мкм 4. 100-300 мкм
8. При гель-электрофорезе скорость движениея молекул определяется главным образом 1. величиной заряда 2. массой молекулы 3. размерами ячеек геля
9. При двумерном электрофорезе в качестве детерегента используют 1. додецилсульфат натрия 2. меркаптоэтанол 3. тритон
10. Меркаптоэтанол придает молекуле
1. определенную конфигурацию 2. отрицательный заряд 3. положительный заряд
11. Меркаптоэтанол это 1. адсорбент 2. детергент 3. ионит Выпишите недостающее слово: 12. Осаждение взвешенных частиц с применением центробежной силы называется __________________. 13. Хроматография, основанная на образовании комплексов с иммобилизованными лигандами называется _____________________.
Установите соответствие:
14. Группы методов дезинтеграции |
Методы |
1. Физические 2. Химические |
А. Встряхивание со стеклянными бусами Б. Осмотический шок В. Декомпрессия Г. Разрушение бутанолом Д. Разрушение антибиотиками |
Ответ: 1_______, 2_________.
15. Группы методов осаждения |
Методы |
1. Физические 2. Химические |
А. Добавление сульфата аммония Б. Концентрирование В. Разбавление Г. Осмотический шок Д. Органические растворители |
Ответ: 1_______, 2_________.
Вариант 4 Выпишите правильный ответ: 1. Вещество переходит из жидкой фазы в твердую при
1. твердожидкофазной экстракции 2. жижкожидкофазной экстракции 3. адсорбции
2. Разделение веществ, при котором биомасса всплывает на поверхности культуральной жидкости 1. фильтрация 2. флотация 3. сепарация
3. Разрушение связей между носителем и осажденным веществом и перевод его в жидкую форму называется 1. адсорбция 2. элюция 3. фильтрация
4. Разделение веществ по массе характерно для 1. аффинной хроматографии 2. бумажной хроматографии 3. ультрацентрифугирования
5. При гель-электрофорезе разделение веществ производят 1. в водном растворе 2. в полиакриламиде 3. в растворе спирта
6. При двумерном электрофорезе в качестве детерегента используют 1. додецилсульфат натрия 2. меркаптоэтанол 3. тритон
7. Меркаптоэтанол придает молекуле 1. определенную конфигурацию 2. отрицательный заряд 3. положительный заряд
8. Додецилсульфат натрия придает молекуле 1. положительный заряд 2. отрицательный заряд 3. определенную конфигурацию
9. Химическим методом осаждения является
1. применение сульфата магния 2. разбавление 3. концентрироване
10. Физическим методом осаждения является
1. высаливание 2. охлаждение 3. добавление органических осадителей
11. Осаждение органическими ратврителями основано на разрушении
1. молекул белков 2. молекул воды 3. гидратного слоя
Выпишите недостающее слово: 12. Разделение культуральной жидкости и биомассы называется ___________. 13. Хроматография, основанная на образовании комплексов с иммобилизованными лигандами называется _____________________.
Установите соответствие:
14. Группы методов дезинтеграции |
Методы |
1. Физические 2. Химические |
А. Разрушение бутанолом Б. Осмотический шок В. Разрушение антибиотиками Г. Разрушение ультразвуком Д. Декомпрессия |
Ответ: 1_______, 2_________.
15. Вид колоночной хроматографии |
Признаки |
1. Гель-фильтрация 2. Ионообменная |
А. Носитель имеет гидрофобные цепи Б. Носитель имеет поры определенного диаметра В. Гранулы адсорбента заряжены Г. Способность связываься со строго определенными химическими группами |
Ответ: 1_______, 2_________.
Вариант 5 Выпишите правильный ответ: 1. Иониты используют при
1. флотации 2. сепарации 3. адсорбции
2. Разделение веществ по скорости их осаждения предложил 1. Сведберг 2. Йенсен 3. Цвет
3. Понятие константа седиментации ввел 1. Сведберг 2. Йенсен 3. Цвет
4. Разрушение связей между носителем и осажденным веществом и перевод его в жидкую форму называется 1. адсорбция 2. элюция 3. фильтрация
5. Разделение веществ по степени сродства к растворителю характерно для
1. гель-электрофореза 2. бумажной хроматографии 3. ультрацентрифугирования 6. При гель-электрофорезе быстрее останавливаются молекулы
1. мелкие 2. средние 3. крупные
7. При использовании меркаптоэтанола молекула вещества
1. теряет заряд 2. ренатурируется 3. денатурируется
8. Хлористый цезий используется для
1. снятия заряда 2. разделения в градиенте плотности 3. дентаурации белка
9. Физическим методом дезинтеграции является
1. применение ультразвука 2. разрушение толуолом 3. разрушение ферментами
10. Физическим методом дезинтеграции является
1. применение антибиотиков 2. разрушение толуолом 3. осмотический шок
11. Химическим методом дезинтеграции является
1. применение вибраторов 2. замораживание-оттаивание 3. применение антибиотиков Выпишите недостающее слово: 12. Выделение компонентов среды в чистом виде называется ______________. 13. Разделение веществ в водном растворе или пористом матриксе в электическом поле называется _________________.
Установите соответствие:
14. Группы методов осаждения |
Методы |
1. Физические 2. Химические |
А. Органические растворители Б. Концентрирование В. Высаливание Г. Разбавление Д. Декомпрессия |
Ответ: 1_______, 2_________.
15. Вид колоночной хроматографии |
Признаки |
1. Аффинная 2. Гель - фильтрация |
А. Носитель имеет гидрофобные цепи Б. Носитель имеет поры определенного диаметра В. Гранулы адсорбента заряжены Г. Способность связываься со строго определенными химическими группами |
Ответ: 1_______, 2_________.
