- •1. Методи ідентифікації вірусів
- •2. Застосування культивування клітин для діагностики вірусів
- •3. Застосування курячих ембріонів для діагностики вірусів
- •4. Понятття про модельну систему у вірусологіі.
- •5. Загальна характеристика опосередкованих методів дослідження вірусів.
- •6. Які основні методи виявлення та індикації вірусів у кк ви знаєте?
- •7. Які причини виникнення цпд?
- •8. Що таке внутрішньоклітинні включення і яка їх природа?
- •9.Переваги та недоліки використання культури клітин
- •10.Візуальна діагностика вірусів людини.
- •11. Візуальна діагностика вірусів тварин
- •12. Візуальна діагностика вірусів рослин
- •13. Візуальна діагностика вірусів бактерій
- •14. Застосування лабораторних тварин для одержання вакцин і гіперіммуних сироваток
- •15. Застосування лабораторних тварин для діагностики вірусів
- •16. Застосування лабораторних тварин для вивчення патогенезу вірусної інфекції
- •17. Вимоги до вибору тварин у вірусологічний експеримент.
- •18. Вибір методу зараження лабораторних тварин
- •19. Методи зараження лабораторних тварин.
- •20. Поняття про тропізм вірусу( приклади)
- •21. Кількісна оцінка інфекціі при застосуванні лабораторних тварин
- •22. Приклади використання лабораторних тварин для діагностики вірусу.
- •23. Типи культур клітин
- •24. Переваги і недоліки використання лабораторних тварин для діагостики вірусів
- •25. Переваги та недоліки використання курячих ембріонів
- •26.Переваги та недоліки використання культури клітин
- •27. Використання рослин для ідентифікації вірусів.
- •28. Симптоми вірусних інфекцій на рослинах- індикаторах.
- •29. Фаготипування.
- •30. Застосування світлової мікроскопії для діагностики вірусів
- •31. Застосування люмінесцентної мікроскопії для діагностики вірусів
- •32. Застосування електронної мікроскопії для діагностики вірусів
- •33. Принцип дії електронного мікроскопу
- •34. Переваги та недоліки використання курячих ембріонів для діагностики вірусів.
- •35. Переваги і недоліки використання електронної мікроскопії для діагностики вірусів.
- •36.3Астосування атомно-силової мікроскопії для діагностики вірусів.
- •37.Атомно-силова мікроскопія.
- •38. Ренгено-структурний аналіз вірусів
- •39. Серологічні методи дослідёження у вірусології
- •40. Основні компонени серологічних реакцій.
- •41. Моноклональні антитіла
- •42. Реакція гемаглютинації та її застосування.
- •43. Реакція непрямої гемаглютинації(рнга) та її застосування
- •44. Реакція звязування комплементу(рзк).
- •45. Реакція нейтралізації(рн).
- •46. Умови реакції преципітації між аг і ат в серологічній реакції.
- •47. Серологічні тести, які базуються на явищі преципітації
- •48. Реакція преципітації в гелі – імунодефузія
- •49. Імуноелектрофорез
- •50. Ракетний електрофорез
- •51. Імунофлуоресцентний аналіз
6. Які основні методи виявлення та індикації вірусів у кк ви знаєте?
Існують наступні основні методи індикації (виявлення ) вірусів у КК:
За цитопатичним ефектом чи цитопатичною дією;
За виявленням внутрішньоклітиних включень;
Електронною мікроскопією;
В реакціях імуноферментного та радіоімунного аналізу;
В реакції гемадсорбції;
В реакції імунофлюоресценції;
За виявленням інтерференції вірусів;
За пригніченням метаболізму клітин;
За утворенням бляшок.
7. Які причини виникнення цпд?
Це комплекс цитопатичних змін, дистукції клітин, що безпосередньо повязано з розмноженням вірусу у клітинних популяціях. Віруси, які спричиняють ЦПД – цитопатогенні. Час розвитку і характер ЦПД залежить від: властивостей вірусу, дози вірусу, властивостей клітин, умов КК, тривалість зараження, рН –середовище, хімсклад середовища, концентрація клітин.
ЦПД може бути:
швидкою – протягом одного тижня після зараження (ГРИП, ВІСПА, поліомієліт);
повільною – після 2-х тижнів після зараження (аденовіруси, параміксовіруси).
Причини
1. Порушення нормальної життєдіяльності клітин в результаті механічного пошкодження клітинних структур вірусними компонентами(дефекти цитоплазматичної мембрани)
2. Руйнування лізосом і вихід їх ферментів у цитоплазму(автоліз)
3.Виснаження білкових та енергетичних ресурсів клітин за рахунок переключення клітинних ферментів та білок-синтезуючого апарату на синтез вірус-специфічних компонентів
4. Порушення клітинного моно шару
8. Що таке внутрішньоклітинні включення і яка їх природа?
При багатьох вірусних інфекціях в клітинах(в ядрі чи цитоплазмі)різних органів та тканин з’являються особливі утворення,які називають тільцями-включеннями. Це комплекс структур, що виявляються світло-оптичними методами. Різні віруси викликають появу різних за якоюсь ознакою вірусів. Це є критерієм класифікації вірусів. Їх класифікують:
за природою: вірусного походження (фабрики вірусів, вірус віспи, аденовіруси, вірус сказу) і клітинного походження (продукція самих клітин, недобудовані компоненти вірусу, вірус герпесу);
за локалізацією: цитоплазматичні (віруси віспи, сказу, грипу), ядерні (аденовіруси, віруси герпесу та ящура), змішана локалізація (вірус кору, чума собаки);
за формою: овальні (сказ), округлі (грип), безформені (віспа), строгої геометричної форми (поліедри);
за гомогенністю: аморфні (віспа), зернисті (сказ);
за щільнісю: щільні (сказ), рихлі (віспа);
за наявністю нуклеїнової кислоти: РНК-вмісні (грип, реовіруси, парагрип, кір), ДНК-вмісні (герпес, віру вісповакцини), безнуклеїнової кислоти (арбовіруси).
9.Переваги та недоліки використання культури клітин
Переваги
1.висока однорідність
2.можливість підтримки клітин у лаг-фазі
3. Можливість моделювання клітинного росту в залежності від умов зовнішнього середовища
4. Можливість багаторазового дослідження змін фізіології клітин у суспензії.
5. Можуть бути охарактеризовані,та визначена клітинна популяція,яка може бути збережена шляхом замороження
Недоліки
1.Довгий період (до 4 тижнів) до результату.
2.Залежність зараження від кондиції культури.
3.Чутливість до контамінації та токсинів.
4.Багато вірусів не культивуються, напр. гепатит B, вірус діарреї, парвовіруси, папіломавіруси.
5. позбавлені структурної організації;
6.втрачають характерну гістотипічну архітектуру та пов’язані з нею біохімічні ознаки;
7.не досягають рівноважного стану при відсутності специфічних умов.
