50. Ракетний електрофорез

Одним з варіантів електроімунного аналізу є електрофорез у гелі, котрий містить антитіла(ракетний імуноелектрофорез). При виготовленні гелю його компоненти змішують з моноспецифічною анти сироваткою і рівномірним шаром розподіляють по пластинці. В одержаному гелі вирізають лунки, в які вносять суміш антигенів зразка. Під дією електричного поля молекули антигенів пересуваються в гель, де взаємодіють з антитілами сироватки. Внаслідок такої дії по краях рухомої області, яка містить молекули антигена, з’являються преципітати. В процесі рухуантигена його молекули поступово зв’язуються з антитілами і утворюється витягнутий у довжину гострокінцевий преципітат – ракета. В стандартних умовах довжина смуги такого преципітату прямо пропорційна концентрації антигену. Це дає змогу кількісно визначити антигени.

51. Імунофлуоресцентний аналіз

Імунофлуоресцентний аналіз, або метод флуоресціюючих антитіл, з’явився на початку 40-х років ХХ ст., коли А. Кунс з співробітниками використали здатність до флюоресценції одного з флюорохромів, кон’югували з ним антитіла і показали наявність збудника інфекції в тканинах. З того часу метод отримав значний розвиток і почав використовуватись в різних областях науки.

Особливість цього методу заключається в тому, що імунний комплекс стає видимим в люмінесцентному мікроскопі у випадку, якщо імуноглобулін кон’югується флюорохромом (флюоресцеіном, родаміном та ін.). В результаті ковалентного зв’язку антитіла з флюоресциюючим барвником утворюється нова сполука – флюоресциюючі антитіла. При цьому антитіла зберігають свою основну властивість – специфічність, а флюорохром – здатність до випромінювання світла.

Перевага імунофлуоресцентного аналізу в порівнянні з іншими методами полягає в дослідженні внутрішньоклітинної локалізації

Розроблені декілька варіантів реакції імунофлюоресценції: прямий, непрямий, модифікація непрямого методу з використанням комплементу та інші