1. Методи ідентифікації вірусів

Це лабораторна діагностика вірусних інфекцій. Напрями:

• Візуальна діагностика

1. За симтомами вірусних інфекцій

2. людина

3. тварини

4. рослини

5. бактерії

• Пряме вивчення

  1. Детекція антигенів - іммунофлуоресценція,

  2. Електронна мікроскопія - морфологія віріонів, імунна електронна мікроскпія

  3. Світлова мікроскопія - гістологічні дослідження, включення

  4. Генетична детекція - молекулярна гібридація, полімеразна ланцюгова реакція (PCR)

• Непряме вивчення

  1. Культура клітин - цитопатичний ефект (CPE), гемадсорбція, іммунофлуоресценція

  2. Курячі ембріони - хоріоналантоїсна оболонка, гемаглютинація, включення

  3. Лаборатоні тварини - хвороба або смерть

• Серологія метод фіксації комплементу

1. гальмування

2. гемаглютинації

3. імунофлюоресцентні методи

4. реакція нейтралізації

5. радіоімунний аналіз

6. імуноферментний аналіз

7. імуноелектроблотинг

2. Застосування культивування клітин для діагностики вірусів

КК в вірусології використовується для:

• первинного виділення вірусів з оточуючого середовища або з паталогічного матеріалу;

• накопичення вірусів;

• підтримання штамів вірусу у лабораторних умовах;

• визначення інфекційного титру вірусів;

• вивчення динаміки взаємодії вірсів та клітин;

• ідентифікація вірусів;

• як тест-обєкт в реакції нейтралізації

• вивчення дії антивірусних речовин.

3. Застосування курячих ембріонів для діагностики вірусів

Метод культивування вірусів на КЕ стали широко застосовувати з 30-х років, коли було описано зараження хоріоналантоісної оболонки КЕ вірусом курячої віспи. Було відмічено, що існує вибірковість у вірусів до тої чи іншої тканини. Віруси натуральної віспи добре розмножувалилася на хоріоналантоісній оболонці,.вірус паротиту – в амніоні, вірус грипу - в амніоні та в алантоізній порожнині. КЕ використовується для:

• виявлення вірусів в патологічному матеріалі

• первинного виділення вірусу

• культивування, зберігання та накопичення вірусу в лабораторних умовах.

• Титрування вірусу

• Як тест-обєкт для реакції нейтралізації

• Визначення ефективності противірусних препаратів.

4. Понятття про модельну систему у вірусологіі.

В вірусології модельні системи використовуються для виділення і накопичення вірусів. Це системи в яких взаємодіють 2 найбільш вивченні обєкти:

• тютюн- вірус тютюнової мозаїки

• бактерія E. coli – бактеріофаг Т4

• курячий ембріон – вірус грипу

• Новонароджені білі миші – вірус поліомієліту

• Культура клітин HeLa - аденовірус

5. Загальна характеристика опосередкованих методів дослідження вірусів.

Опосередкованими називаються методи, за якими вірус вивчається за допомогою різних об’єктів і модельних систем.

• Методи виділеня, накопичення вірусів на різних модельних системах

• Виділення та дослідження нуклеїнової кислоти та білків вірусів

• Електрофорез білку та нуклеїнової кислоти

• Ультрацентрифугування

• Рентгеноструктурний аналіз

• Гібридизація нуклеїнових кислот

• Полімеразна ланцюгова реакція