Показания

Главным показанием для исследования крови на наличие HBsAg является желание человека пройти его. Для этого не нужны особые причины и поводы, поскольку распространенность гепатита B настолько широка, что исследование уже может носить скрининговое предназначение. Обязательно обследуются:

Женщины при беременности: постановка на учет в женскую консультацию и в предродовом периоде;

Все медицинские работники, особенно те, у которых имеется прямая связь с кровью пациентов (манипуляционные медсестры, фельдшера, хирурги, гинекологи и т.д.);

Лица, которым предстоит оперативное вмешательство;

Гепатит любой формы и цирроз печени;

Больные хронической формой вирусного гепатита B или здоровые носители вируса и антигена.

Интерпретация полученных результатов

При проведении экспресс-диагностики могут быть получены такие результаты:

• Наличие после теста только одной контрольной полоски. Такой результат считается отрицательным, а значит HBsAg не обнаружен и человек здоров;

• Наличие двух сигнальных полос на реактиве. Говорит о присутствии австралийского антигена в крови и о связи человека с вирусным гепатитом B. В таком случае необходимо дополнительное обследование;

• Наличие после теста одной полоски, но только тестовой. Реактив не действителен. Тест обязательно должен быть повторен.

При проведении серологической диагностики результаты бывают:

• HBsAg-не обнаружен (отрицательный). Это норма, и значит, что человек не болен гепатитом В;

• HBsAg-положительный. Это говорит, что организм исследуемого либо заражен активно размножающимся вирусом гепатита B, либо он является здоровым носителем антигена, либо переболел этим заболеванием. Для получения более детальной информации о состоянии противовирусного иммунитета и активности вируса проводятся дополнительные серологические исследования и расшифровка других маркеров этого заболевания;

• Ложноположительный и ложноотрицательный результат. Иногда может быть получен даже при серологической диагностике и связан с забором крови после плотного завтрака или до 4 недель с момента заражения, погрешностями лаборатории и реактивов.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это лабораторный метод исследования, в основе которого лежит так называемая амплификация, то есть способность создавать большое количество копий искомого небольшого участка ДНК в случае его обнаружении в исследуемом биологическом материале.

В ходе выполнения ПЦР анализа в медицинской лаборатории выполняется несколько шагов, которые повторяются в виде циклов в специальном аппарате, называемом амплификаторомили термоциклером:

• Первый шаг при ПЦР анализе – это денатурация, то есть расщепление двухцепоченой ДНК на 2 отдельные цепочки посредством повышения температуры исследуемого биологического материала в амплификаторе (термоциклере).

• На втором шаге ПЦР анализа исследуемый материал немного остужают, добавляя к нему праймеры – короткие последовательности азотистых оснований, которые специфично распознают и связываются с искомыми последовательностями в молекуле ДНК. Этот шаг называется отжигом.

• После того, как 2 праймера присоединились к каждой из 2-х цепей ДНК, начинается третий шаг – элонгация. На этом шаге при помощи фермента ДНК-полимеразы (обычноTaq полимеразы – ферменты, продуцируемые организмами Thermues aquaticus, которые живут в очень горячих водах гейзеров и горячих подземных источниках) происходит достраивание участка ДНК от присоединившегося ранее праймера. Таким образом, на участке в области праймеров каждой из цепей ДНК образуется вторая комплементарная первой цепь ДНК.

Далее эти шаги повторяются в виде множества циклов, что ведёт к удвоению количества копий искомого участка ДНК (например, участка, специфичного для определенного вируса) на каждом таком цикле.

В результате за 30-40 циклов, осуществляющихся в течение нескольких часов, образуются миллиарды копий искомой последовательности ДНК. Далее происходит определение наличия этих копий в образце. Разумеется, это происходит только в случае действительного наличия и обнаружения искомой последовательности в исследуемом биологическом материале при помощи праймеров на 2 шаге ПЦР анализа.