- •1. Строение и функции клеточной стенки бактерий. Отличия в строении клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий. Принцип и метод окраски по Граму.
- •2. Принципы культивирования бактерий. Искусственные питательные среды. Их классификация и характеристика. Требования, предъявляемые к питательным средам.
- •6.Укажите один правильный ответ:
- •8. Задача. При исследовании мокроты больного выделена культура s. Aureus. Какие методы исследования можно использовать для определения чувствительности бактерий к антибиотикам?
- •10. Задача. Для работы необходимо простерилизовать халаты, стеклянные флаконы, резиновые пробки. Какие способы Вы изберете для стерилизации? Чем обусловлен выбор того или иного способа стерилизации?
- •Контрольная работа № 2
- •1. Противовирусный иммунитет и его особенности. Интерфероны. Способы получения и применение.
- •3. Иммуноферментный анализ. Иммуноблотинг. Механизм реакции. Компоненты. Применение.
- •5. Вирус клещевого энцефалита. Таксономия. Свойства. Механизмы и пути передачи. Патогенез и лабораторная диагностика. Специфическая терапия и профилактика.
- •6.Укажите один правильный ответ:
- •8. Задача. В лесу туриста укусил клещ. Какие профилактические мероприятия против клещевого энцефалита следует провести, если он своевременно не прошел курса вакцинации?
- •9. Задача. У больного бруцеллезом была из крови выделена культура возбудителя. Как определить тип бруцелл? с какой целью можно применить такое исследование?
- •10. Задача. В лабораторию поступил материал (мокрота) от больного туберкулезом легкого. Какие методы исследования необходимо использовать для выявления возбудителя?
- •Список литературы
10. Задача. Для работы необходимо простерилизовать халаты, стеклянные флаконы, резиновые пробки. Какие способы Вы изберете для стерилизации? Чем обусловлен выбор того или иного способа стерилизации?
Ответ: стерилизация медицинской одежды и аптечной посуды производится в соответствии с Приказом МЗ РФ № 309 от 21.10.1997 г. «Об утверждении инструкции по санитарному режиму аптечных организаций (аптек). Комплект одежды стерилизуют в биксах в паровых стерилизаторах при 120 град. С в течение 45 минут или при 132 град. С – 20 минут и хранят в закрытых биксах не более 3-х суток.
Обработка укупорочного материала. Новые резиновые пробки моют вручную или в стиральной машине в горячем (50 - 60 °C) 0,5% растворе моющих средств типа "Лотос", "Астра" в течение 3 минут (соотношение веса пробок и раствора моющего средства 1:5); промывают 5 раз горячей водопроводной водой, каждый раз заменяя ее свежей, и 1 раз очищенной водой; кипятят в 1% растворе натрия гидрокарбоната в течение 30 минут, промывают 1 раз водопроводной водой и 2 раза очищенной. Затем помещают в стеклянные или эмалированные емкости, заливают очищенной водой, закрывают и выдерживают в паровом стерилизаторе при 120 °C в течение 60 минут. Воду после этого сливают и пробки еще раз промывают очищенной водой. После обработки пробки стерилизуют в биксах в паровом стерилизаторе при 120 °C в течение 45 мин. Стерильные пробки хранят в закрытых биксах не более 3 суток. После вскрытия биксов пробки должны быть использованы в течение 24 часов.
При заготовке впрок резиновые пробки после обработки, не подвергая стерилизации, сушат в воздушном стерилизаторе при температуре не выше 50 °C в течение 2 часов и хранят не более 1 года в закрытых биксах или банках в прохладном месте. Перед использованием резиновые пробки стерилизуют в паровом стерилизаторе при 120 °C в течение 45 минут.
Обработка аптечной посуды. Обработка стеклопосуды включает следующие технологические операции:
- дезинфекция; |
- замачивание и мойка (или моюще-дезинфицирующая обработка); |
- ополаскивание; |
- сушка (или стерилизация); |
- контроль качества обработки. |
Режим стерилизации: горячим воздухом – при 180 град. С – 60 минут или насыщенным паром под давлением при 120 град. С – 45 минут. После снижения температуры в стерилизаторе до 60-70 град. С посуду вынимают, закрывают стерильными пробками и используют для розлива растворов.
Контрольная работа № 2
1. Противовирусный иммунитет и его особенности. Интерфероны. Способы получения и применение.
В зависимости от объекта действия приобретенный противоинфекционный иммунитет подразделяют на антитоксический, антибактериальный, противовирусный, иммунитет к грибкам, простейшим. Однако деление это достаточно условное и имеет в настоящее время лишь дидактическое значение.
Противовирусный иммунитет. Основой противовирусного иммунитета является клеточный иммунитет. Клетки-мишени, инфицированные вирусом, уничтожаются цитотоксическими лимфоцитами, а также NK-клетками и фагоцитами, взаимодействующими с Fc-фрагментами антител, прикрепленных к вирусспецифическим белкам инфицированной клетки. Противовирусные антитела способны нейтрализовать только внеклеточно расположенные вирусы, как и факторы неспецифического иммунитета — сывороточные противовирусные ингибиторы. Такие вирусы, окруженные и блокированные белками организма, поглощаются фагоцитами или выводятся с мочой, потом и др. (так называемый «выделительный иммунитет»). Особенности противовирусного иммунитета обусловлены тем, что вирусы являются внутриклеточными облигатными паразитами. Они размножаются в клетках за счет их ресурсов. Часть вирусов находится внутри, а часть — вне клетки. Поскольку антитела не проникают в клетки, они неэффективны против внутриклеточного вируса и действуют только на внеклеточный вирус. Эффективно инактивирует вирус на поверхности слизистых оболочек секреторный IgA. Антитела к вирусу малоэффективны против вирусных ДНК и РНК, обладающих инфекционностью. Следовательно, антитела не влияют на внутриклеточную репро- дукцию вируса, а только препятствуют генерализации вирусной инфекции.
Природа интерферона. Интерферон представляет собой белок, обладающий противовирусным, противоопухолевым и иммуно- модулирующим свойствами, вырабатываемый многими клетками в ответ на внедрение вируса или сложных биополимеров. Интерферон гетерогенен по своему составу, его молекулярная масса колеблется от 15 до 70 кД.
Семейство интерферонов включает более 20 белков, различающихся по физико-химическим свойствам. Все они объединены в три группы по источнику происхождения: а, (3, у. а-Интерферон вырабатывается В-лимфоцитами; его получают из лейкоцитов крови, поэтому называют лейкоцитарным. р-Интерферон получают при заражении вирусами культуры клеток фибробластов человека; его называют фибробластным. у-Интерферон получают из иммунных Т-лимфоцитов, сенсибилизированных антигенами, поэтому его называют иммунным. Интерфероны обладают видовой специфичностью, т.е. интерферон человека менее эффективен для животных и наоборот.
Механизм действия. Противовирусное, антипролиферативное и иммуномодулирующее действие интерферонов не связано с непосредственным влиянием на вирусы или клетки, т.е.
интерферон не действует вне клетки. Абсорбируясь на поверхности клетки или проникая внутрь клетки, он через геном клетки влияет на процессы репродукции вируса или пролиферацию клетки. Поэтому действие интерферона в основном профилактическое, но его используют и в лечебных целях. Интерферон играет большую роль в поддержании резистентности к вирусам, поэтому его применяют для профилактики и лечения многих вирусных инфекций (грипп, аденовирусы, герпес, вирусный гепатит и др.). Антипролиферативное действие, особенно у-интерферона, используют для лечения злокачественных опухолей, а иммуномодулирующее свойство — для коррекции работы иммунной системы с целью ее нормализации при различных иммунодефицитах.
Разработан и производится ряд препаратов а-, р- и у-интерферонов. Современные препараты получают методами биотехнологии, основанными на принципах генетической инженерии.
2. Т–зависимая гиперчувствительность, условия ее возникновения и роль в инфекционном процессе. Аллергические пробы, их сущность, применение. Аллергены как диагностические препараты.
При многих инфекционных заболеваниях за счет активации клеточного иммунитета развивается повышенная чувствительность организма к возбудителям и продуктам их жизнедеятельности. На этом основаны аллергические пробы, используемые для диагностики бактериальных, вирусных, протозойных инфекций, микозов и гельминтозов. Аллергические пробы обладают специфичностью, но нередко они бывают положительными у переболевших и привитых.
Аллергические пробы - биологические реакции для диагностики ряда заболеваний, основанные на повышенной чувствительности организма, вызванной аллергеном.
Все аллергические пробы подразделяют на две группы — пробы in vivo и in vitro.
К первой группе (in vivo) относятся кожные пробы, осуществляемые непосредственно на пациенте и выявляющие аллергию немедленного (через 20 мин) и замедленного (через 24 — 48 ч) типов.
Аллергические пробы in vitro основаны на выявлении сенсибилизации вне организма больного. Их применяют тогда, когда по тем или иным причинам нельзя произвести кожные пробы, либо в тех случаях, когда кожные реакции дают неясные результаты.
Для проведения аллергических проб используют аллергены — диагностические препараты, предназначенные для выявления специфической сенсибилизации организма. Инфекционные аллергены, используемые в диагностике инфекционных заболеваний, представляют собой очищенные фильтраты бульонных культур, реже взвеси убитых микроорганизмов или АГ, выделенные из них.
Кожные пробы.
Инфекционные аллергены вводят, как правило, внутрикожно или накожно, путем втирания в скарифицированные участки кожи. При внутрикожном способе в среднюю треть передней поверхности предплечья специальной тонкой иглой вводят 0,1 мл аллергена. Через 28 — 48 ч оценивают результаты реакции ГЗТ, определяя на месте введения размеры папулы.
Неинфекционные аллергены (пыльца растений, бытовая пыль, пищевые продукты, лекарственные и химические препараты) вводят в кожу уколом (прик-тест), накожно путем скарификации и втирания или внутрикожной инъекцией разведенного раствора аллергена. В качестве отрицательного контроля используют ИХН, в качестве положительного — раствор гистамина. Результаты учитывают в течение 20 мин (ГНТ) по величине папулы (иногда до 20 мм в диаметре), наличию отека и зуда. Внутрикожные пробы ставят в случае отрицательного или сомнительного результата прик-теста. По сравнению с последним, дозу аллергена уменьшают в 100-5000 раз.
Пробы in vitro. Эти методы исследования безопасны для больного, достаточно чувствительны, позволяют количественно оценить уровень аллергизации организма.
В настоящее время разработаны тесты для определения сенсибилизации, основанные на реакциях Т- и B-лимфоцитов, тканевых базофилов, выявлении общих специфических IgE в сыворотке крови и др. К ним относятся реакции торможения миграции лейкоцитов и бласттрансформации лимфоцитов, специфическое розеткообразование, базофильный тест Шелли, реакция дегрануляции тканевых базофилов, а также аллергосорбентные методы (определение специфических IgE в сыворотке крови).
Аллергены как препараты. Для диагностики и лечения аллергических заболеваний из экзогенных аллергенов готовят препараты, которые также получили название «аллергены». В отличие от естественных аллергенов вызывающих сенсибилизацию организма и аллергические реакции, аллергены-препараты не вызывают сенсибилизации организма, но изредка, при неумелом их применении, могут вызывать у сенсибилизированных лиц тяжелые аллергические реакции вплоть до анафилактического шока. Некоторые аллергены (из домашней пыли, пера, шерсти, содержимого матрацев) можно приготовить быстро в лабораторных условиях. Для этого материал обезжиривают эфиром, заливают дистиллированной водой, кипятят на водяной бане, фильтруют и фильтрат снова кипятят на водяной бане. Затем его разводят и используют для постановки кожных проб.
