Стимуляция грелином

Грелин – вещество, усиливающее секрецию ГР, которое стимулирует его высвобождение из соматотропных клеток гипофиза посредством РССГР. В противоположность людям, у собак введение грелина не стимулирует высвобождение других гормонов гипофиза (т. е. эффект специфичен в отношении ГР). Реакция на грелин в виде выделения ГР также снижается с возрастом, сходно с реакцией соматотропных клеток на РГГР (Bhatti et al, 2002; Bhatti et al, 2006b). У восьми здоровых биглей (в возрасте от 13 до 17 месяцев, медиана 10) максимальная концентрация ГР после введения грелина варьировала от 0,2 до 124 мкг/л (медиана 52). У шести немецких овчарок с карликовостью (в возрасте от 9 до 21 месяца, медиана 12) максимальное повышение концентрации ГР после введения грелина составило 0,7-4,1 мкг/л (медиана 1,9), что значительно меньше, чем у здоровых собак. Ни у одной из карликовых собак концентрация ГР не превышала 5 мкг/л; однако такие концентрации обнаружены также у трех здоровых собак (Bhatti et al, 2006c). Из-за относительно высокого числа ложноположительных результатов проба с грелином уступает пробе с РГГР и клонидином или ксилазином.

Во всех упомянутых исследованиях применяли человеческий грелин, вводившийся внутривенно (в/в) в дозе 2 мкг/кг, а кровь для измерения ГР отбирали до инъекции, а затем через 5, 10, 20, 30 и 45 минут после нее. Обработка образцов крови была аналогична описанной для теста с РГГР.

Проба со стимуляцией клонидином

Клонидин – агонист α2-адренорецепторов центрального действия, стимулирующий высвобождение РГГР и ГР. Проба разработана для исследования собак более 30 лет назад (Hampshire and Altszuler, 1981; Eigenmann and Eigenmann, 1981a). Она по-прежнему считается подходящим методом диагностики недостаточности ГР. Разные исследователи применяли дозы клонидина от 3 до 30 мкг/кг. Стандартной дозой обычно считается 10 мкг/кг (Roth et al 1980; Hampshire and Altszuler, 1981; Eigenmann and Eigenmann, 1981a; Feldman and Nelson, 2004). Концентрация ГР возрастает в течение 10-15 минут и достигает пика через 15-30 минут после введения клонидина; как и при стимуляции с помощью РГГР, реакция высвобождения ГР имеет сильные индивидуальные различия. Неясно, приводит ли введение клонидина здоровым собакам к более выраженному высвобождению ГР по сравнению с введением РГГР. Abribat, et al (1989) не обнаружили различий в реакции высвобождения ГР после введения 1 мкг/кг РГГР и 10 мкг/кг клонидина. По данным Eigenmann, et al. (1984d), максимальное высвобождение ГР после введения клонидина составило 44,4 ± 13,9 мкг/л, в то время как в исследовании Meij, et al (1996a) после введения РГГР максимальное высвобождение ГР составило 14,7 ± 3,7 мкг/мл (см. рис. 2-11 и 2-12). Клонидин может вызвать нежелательные реакции, однако они более вероятны и выражены при дозах выше 10 мкг/кг. К нежелательным реакциям относятся седация, брадикардия, гипотензия, головокружение или агрессивное поведение, которые могут длиться от 15 до 60 минут. Если необходимо, при брадикардии можно применять атропин, при гипотензии - в/в инфузии растворов, а в качестве α-антагонистов можно вводить йохимбин или атипамезол. Протокол пробы, описанный Eigenmann et al. (1984d), включает в/в введение клонидина в дозе 10 мкг/кг и отбор крови для измерения ГР до инъекции, а затем через 15, 30, 45, 60 и 90 минут после инъекции. Правила обращения с образцами крови такие же, как при пробе с РГГР. Повышение концентрации ГР выше 10 нг/л считается нормальной реакцией (Eigenmann et al, 1984d).

гормон роста (нг/мл)

нормальные животные

животные с карликовостью

время (мин.)

РИС. 2-12. Результаты теста со стимуляцией клонидином у здоровых собак и у девяти немецких овчарок с гипофизарной карликовостью. Клонидин в дозе 10 мкг/кг массы тела ввели внутривенно в нулевой момент времени. (График построен по данным из публикации: Eigenmann JE, et al Growth hormone and insulin-ke growth factor I in German Shepherd dwarf dogs Acta Endocrinol 105[3]:289-293,1984. Воспроизведено из публикации: Feldman EC, Nelson RW: Disorders of growth hormone. In Feldman EC, Nelson RW, editors: Canine and feline endocrinology and reproduction, St Louis, 2004, Saunders.)