Гистологическая окраска гематоксилин-эозином
Окраска гематоксилином и эозином — один из самых распространённых методов окраски в гистологии. Окраска включает использование основного красителя гематоксилина, окрашивающего базофильные клеточные структуры ярко-синим цветом, и спиртового кислого красителя эозина Y, окрашивающего эозинофильные структуры клетки красно-розовым цветом.
Техника окраски гематоксилин-эозином:
Удаляют парафин из срезов в био-клире, проводят по спиртам нисходящей концентрации и доводят до воды (две порции био-клира – 3-5 минут, IsoPrep спирт – 3 минуты, этанол – 3 минуты, дистиллированная вода – 5 минут).
Окрашивают гематоксилином 7-10 минут (в зависимости от зрелости красителя).
Промывают в проточной воде – 10 минут.
Окрашивают водным раствором эозина 0,5-1 минуту (в зависимости от желаемой окраски).
Промывают в дистиллированной воде для удаления избытка эозина.
Удаляют воду из срезов в двух порциях 96° этанола. Экспозиция в каждой порции спирта – 2 минуты.
Просветляют срезы в двух порциях IsoPrep спирта– 1 минута.
Производят окончательное обезвоживание срезов в двух порциях био-клира Прибывание срезов 2 минуты.
Заключить срезы в синтетическую монтирующую среду для заключения гистологических срезов.
Обезводить в спиртах восходящей крепости.
Просветлить в в био-клире и заключить в био-маунт.
Овец этой породы можно отличить по крупному телосложению и внушительной конституции. Казахская тонкорунная овца славится однородной шерстью. Особи мужского пола бывают рогатыми и безрогими, матки - комолыми.
3. Результаты и обсуждение
3.1 Морфологическое изучение яичников у овец казахской тонкорунной породы в норме .
Морфологическое исследование яичников овцы казахской тонкорунной в возрасте 3 года имело обычное строение, характерное для самок млекопитающих. Помимо фолликулов разной степени зрелости в строме яичника присутствовали желтые тела (рис.1-2). Сеть яичника в мозговой части была без особенностей (3).
Рис. 1 - Яичник овцы КТ 3 года: желтое тело.
Гематоксилин-эозин. Ув х100.
Рис.2 - Яичник овцы КТ 3 года: желтое тело.
Гематоксилин-эозин. Ув х100.
Рис. 3 - Яичник овцы КТ 3 года: сеть яичника.
Гематоксилин-эозин. Ув х100.
3.2 Морфологическое изучение яичников у овец казахской тонкорунной породы после гормональной обработки в эстральный сезон
Гистологическое исследование препаратов у овцы казахской тонкорунной возраста 8 лет яичники показали нормальную структуру. В корковой зоне примордиальные фолликулы были единичны. Это свидетельствовало о снижении плодовитости данной овцы. В строме органа встречались атретические тела (рис. 4). В то же время, в яичнике после гормональной стимуляции увеличивалось количество преовуляторных фолликулов, что говорило о способности данной особи к размножению (рис.5-6).
Таким образом, овцы КТ 3-х и 8-летнего возраста являются способными к размножению, так как в их яичниках идет нормальное развитие фолликулов. Но в 8-летнем возрасте способность к размножению снижается.
Рис. 4 - Яичник овцы КТ 8 лет: атрезия фолликулов, единичные примордиальные фолликулы. Гематоксилин-эозин. Ув х100.
Рис. 5 - Яичник овцы КТ 8 лет: Преовуляторный фолликул.
Гематоксилин-эозин. Ув х100.
Рис. 6 - Яичник овцы КТ 8 лет: Преовуляторный фолликул.
Гематоксилин-эозин. Ув х100.