5.Способ грама

1. На фиксированный мазок нанести генцианвиолет (бумага по Синеву) на 1-2 мин

2. Краску слить и нанести раствор Люголя на 1 мин

3. Раствор Люголя слить и на мазок нанести 96% спирт на 15-20 мин в зависимости от толщины мазка

4. Спирт смыть дистиллированной водой

5. Мазок дополнительно окрасить разведенным фуксином Пфейффера на 2-3 мин

6. Краситель смыть водой, препарат высушить, промикроскопировать с иммерсией

7. Микроскопия с иммерсией.

Грамположительные (Гр+) бактерии окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Грамотрицательные (Гр-) бактерии окрашиваются в красный цвет.

6. Нейссера метод окраски используют для выявления зерен волютина у возбудителей дифтерии и др. коринебактерий.

1.Фиксированный мазок 2 - 3 мин красят уксуснокислым синим

2.10 - 30 с обрабатывают р-ром Люголя, слегка промывают водой и докрашивают в течение 30 с р-ром везувина

3.высушивают и микроскопируют.

Бактерии окрашиваются в желтый цвет, волютин -в темно-синий.

7. Обнаружение капсул по методу бурри-гинса

1. Приготовить мазок на предметном стекле по методу Бурри

2. Высушить на воздухе

3. Фиксировать химическим способом: погружение стекла в емкость со спиртом или сулемой – 10 мин, или со смесью Никифорова (спирт и эфир 1:1) – 15-20 мин

4. Осторожно промыть водой

5. На мазок нанести фуксин Пфейффера – 3-5 мин

6. Промыть Н₂О

7. Высушить на воздухе

8. Микроскопия с иммерсией.

Внимание! Фильтровальной бумагой не пользоваться, чтобы не повредить препарат.

Препарат по Бурри – Гинсу под микроскопом: фон черный, клетки бактерий красные, капсулы неокрашенные (красители не воспринимают)

8. Окраска по методу ожешко

1. На высушенный мазок (нефиксированный!) + несколько капель 0,5% НCl, держать над пламенем спиртовки до образования паров

2. Высушивают и фиксируют физическим способом

3. Окрашивают по методу Циля-Нильсена:

1. На фиксированный препарат + фильтровальная бумага + фуксин Циля. Подогреваем до отхождения паров + краситель (2 раза)

2. Н₂О

3. 5% Н₂SО₄ (погружая 2-3 раза)

4. Н₂О

5. Метиленовый синий 1 % - 3-5 мин

6. Н₂О

4. Микроскопия с иммерсией

Метод Ожешко сходен с методом Циля-Нильсена, но отличается использованием раствора соляной кислоты в качестве протравы, разрыхляющей оболочку споры, которая плохо воспринимает красители.

Кислотоустойчивые споры окрашиваются в розово-красный, а бактериальная клетка в голубой цвет

9. Метод циля-нильсена

1. На фиксированный препарат + фильтровальная бумага + фуксин Циля. Подогреваем до отхождения паров + краситель (2 раза)

2. Н₂О

3. 5% Н2sо4 (погружая 2-3 раза)

4. Н₂О

5. Метиленовый синий 1 % - 3-5 мин

6. Н₂О

7. Микроскопия с иммерсией.

Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в красный цвет, остальные – в синий

10. Существующие на настоящее время приказы и инструкции не запрещают кипячение как метод стерилизации хирургического инструментария. Хотя он не гарантирует их полного обеспложивания. Установлено, что при кипячении в 100°С происходит сворачивание белка, и большинство бактерий погибает, но, например, споры почвенного термофила выдержиают кипячение в течение 500 мин. Длительное кипячение выдерживают также споры столбняка, вирусы гепатита. Бактерии, укрытые землей, кровью, эксудатом, выдерживают кипячение неопределенно длительное время. Для стерилизации инструментария кипячением используются стационарные или переносные кипятильники (старое название — стерилизаторы). Перед кипячением в воду добавляется гидрокарбонат натрия до образования его 2% раствора. Длительность кипячения составляет 30 мин от момента закипания.

11. На настоящее время наиболее надежным методом стерилизации хирургического инструментария является стерилизация горячим воздухом (сухим жаром). Этим методом можно стерилизовать металлические, фарфоровые, стеклянные инструменты. При стерилизации изделий из синтетики, бумаги, текстиля, дерева они могут подвергаться обугливанию. Для стерилизации используются самые разные марки и типы воздушных стерилизаторов (старое название — сухожаровые шкафы) с электронной регуляцией и контролем времени и режима стерилизации. Стерилизация производится при 180°С в течение 60 мин.