- •Физиология микроорганизмов
- •Физиология микроорганизмов
- •1. Химический состав бактерий
- •Механизм синтеза белка у бактерий
- •2. Питание и метаболизм бактерий
- •3. Ферментативные свойства бактерий
- •Биохимические тесты для идентификации бактерий
- •4. Рост и размножение бактерий
- •Механизм бинарного (поперечного) деления бактерии
- •Расположение бактерий в колониях на поверхности плотных питательных сред
- •Кинетическая кривая роста бактерий
- •5. Культивирование микроорганизмов
- •Биореакторы объемом 250 л.
- •Анаэростат
- •Классификация питательных сред
- •16. Способы культивирования микроорганизмов.
- •17. Классифицируйте питательные среды, предназначенные для культивирования бактерий.
Механизм бинарного (поперечного) деления бактерии
При изучении процесса размножения бактерий необходимо учитывать, что бактерии всегда существуют в виде более или менее многочисленных популяций и развитие бактериальной популяции в жидкой питательной среде в периодической культуре можно рассматривать как замкнутую систему.
Край колонии Центральная часть колонии
Расположение бактерий в колониях на поверхности плотных питательных сред
Закономерность роста бактериальной популяции выражается графически в виде зависимости логарифма живых клеток и времени (изменение концентрации бактерий с течением времени культивирования).
Кинетическая кривая роста бактерий
1 - фаза задержки размножения (lag-фаза); 2 - фаза ускорения роста; 3 - фаза логарифмического роста (log-фаза); 4 - фаза
замедления роста; 6 - стационарная фаза; 6 - фаза отмирания.
В этом процессе выделяют 6 основных фаз:
1. Начальная (лаг-фаза) или фаза задержки размножения - характеризуется отсутствием размножения клеток, т.к. в эту фазу у бактерий происходит индукция синтеза ферментов, предназначенных для расщепления и утилизации питательных веществ в среде. Чем быстрее бактерии начнут продуцировать необходимые для размножения ферменты, тем короче будет лаг-фаза.
2. Фаза ускорения роста - характеризуется началом интенсивного роста клеток, но скорость их деления остается низкой.
3. Фаза логарифмического роста (log-фаза) или экспоненциальная фаза - характеризуется максимальной скоростью деления клеток и резким увеличением числа клеток в популяции.
4. Фаза замедления роста – характеризуется снижением скорости размножения, что связано с уменьшением в среде питательных веществ.
5. Стационарная фаза - наступает тогда, когда число клеток в популяции перестает увеличиваться. Это связано с тем, что наступает равновесие между числом вновь образующихся и гибнущих клеток. Число живых бактериальных клеток в популяции на единицу объема питательной среды в стационарной фазе обозначается как М-концентрация. Этот показатель является характерным признаком для каждого вида бактерий.
6. Фаза отмирания - характеризуется преобладанием в популяции числа погибших клеток и прогрессивным снижением числа жизнеспособных клеток популяции. Прекращение роста численности (размножения) популяции микроорганизмов наступает в связи с истощением питательной среды и накоплением в ней продуктов метаболизма микробных клеток.
В бактериологии существует такое понятие, как «вторичный синтез бактерий», который наблюдается в стационарную фазу или в фазу отмирания.
Вторичный синтез связан с автолизом погибших бактерий и со способностью живых бактерий усваивать продукты автолиза, выживая еще какое-то время.
Тем не менее, этот процесс не бесконечен и рано или поздно популяция бактерий при культивировании их в замкнутой системе неизбежно погибает.
5. Культивирование микроорганизмов
Для лабораторной диагностики инфекционных болезней, изучения биологических свойств микроорганизмов и при производстве биопрепаратов микроорганизмы культивируют на искусственных питательных средах.
Культивирование микроорганизмов – это создание искусственных условий для обеспечения процессов жизнедеятельности и размножения микроорганизмов.
С помощью искусственных питательных сред можно определить подвижность микроорганизмов, некоторые биохимические свойства бактерий и провести первичную их идентификацию.
Основные принципы культивирования микроорганизмов на питательных средах.
1. Удовлетворение питательных потребностей микроорганизмов (использование всех необходимых для соответствующих микроорганизмов питательных компонентов).
2. Оптимальные температура, рН, rH2, концентрация ионов, степень насыщения кислородом, газовый состав и давление.
По температурному оптимуму роста выделяют три основные группы микроорганизмов.
1. Психрофилы - растут при температурах ниже 20ºС.
2. Мезофиллы - растут в диапозоне температур от 20 до 45ºС (часто оптимум - при 37ºС).
3. Термофилы - растут при температурах выше 45ºС.
Посев в чашки Петри Термостат
Для культивирования микроорганизмов в лабораторных условиях используется специальная лабораторная посуда (пробирки, чашки Петри, матрацы и др.), в которую вносят жидкие или плотные питательные среды. После посева микроорганизмов на питательные среды их помещают в термостат и культивируют при оптимальной температуре.
