Диаскинтест® в диагностике туберкулеза

Существует несколько разных способов диагностики туберкулезной инфекции, из которых в России базовым является туберкулиновый кожный тест или реакция Манту. Этот тест прост в постановке и не требует специального медицинского оборудования, но имеет низкую специфичность и дает большое количество ложноположительных реакций, по оценкам специалистов - от 40 до 90%. Положительная реакция Манту наблюдается как у пациентов, инфицированных М. tuberculosis, так и в случае инфекции непатогенными микобактериями или у групп населения, вакцинированных БЦЖ. Ложноположительные реакции приводят к дополнительным исследованиям для подтверждения диагноза, к гипердиагностике и, как результат, необоснованному назначению превентивной химиотерапии с расходом бюджетных средств, а так же не позволяют достоверно оценить распространенность туберкулеза в России. Тем не менее, в России с помощью данного теста ежегодно обследуется 20 млн. человек.

Многие годы осуществлялся интенсивный поиск антигенных детерминант, присущих только М. tuberculosis и позволяющих дифференцировать вакцинальный иммунитет, развивающийся в результате вакцинации БЦЖ, иммунные реакции на непатогенные микобактерии и инфекцию вызванную М. tuberculosis. Обнаружить антигены, свойственные только M.tuberculоsis, удалось лишь после завершения исследования по первичной структуре генома М tuberculosis. Было установлено, что M. tuberculosis кодирует синтез двух секреторных белков ESAT-6 и CFP-10, которые отсутствуют M.bovis и большинства непатогенных микобактерий. В результате данных исследований появился ДИАСКИНТЕСТ^® - новый генноинженерный препарат для аллергодиагностики туберкулеза, разработанный и зарегистрированный в Российской Федерации, предназначенный для повышения качества идентификации туберкулезной инфекции.

Метод основан на выявлении клеточного иммунного ответа на специфические для M. tuberculosis антигены. В основе внутрикожного диагностического теста лежит аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении. Он представляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT. Препарат содержит два связанных между собой антигена - CFP-10 (culture filtrate protein) и ESAT6 (Early secreted antigenik targert), присутствующие в вирулентных штаммах МБТ. Эти антигены отсутствуют у М. Bovis вакцинного штамма. Антигены микобактерий ESAT-6 и CFP 10 выделены из региона RD1 M. tuberculosis. Регион RD1 отсутствует у всех штаммов БЦЖ и нетуберкулезных микобактерий и в связи с этим не дает с ними положительной реакции.

ДИАСКИНТЕСТ^® характеризуется высокой почти 100% чувствительностью -частотой положительных ответных реакций у лиц с активной туберкулезной инфекцией и высокой специфичностью - частотой отсутствия реакции на препарат у здоровых лиц. Внутрикожная проба с препаратом ДИАСКИНТЕСТ^® превосходит пробу Манту с 2 Т.Е. по чувствительности на 13-15%, а по специфичности на 30-40%. Препарат безопасен, не вызывает, как правило, нежелательных побочных реакций. Лишь у отдельных лиц могут наблюдаться кратковременные признаки общей реакции в виде недомогания, головной боли, повышения температуры тела.

При внутрикожном введении ДИАСКИНТЕСТ^® аллерген туберкулезный рекомбинантный вызывает у лиц с туберкулезной инфекцией специфическую кожную реакцию, являющуюся проявлением гиперчувствительности замедленного типа. У лиц, вакцинированных БЦЖ и неинфицированных микобактериями туберкулеза, реакция на препарат ДИАСКИНТЕСТ^® отсутствует. Показания для применения ДИАСКИНТЕСТА^® :

1. для диагностики туберкулеза и оценки активности процесса;

2. для дифференциальной диагностики туберкулеза;

3. для дифференциальной диагностики поствакцинальной и постинфекционной аллергии;

4. для наблюдения за эффективностью лечения в комплексе с другими методами.

Противопоказания для применения ДИАСКИНТЕСТА ^®:

Абсолютные:

- индивидуальная непереносимость препарата;

Относительные:

- острые и хронические (в период обострения) инфекционные заболевания, за исключением случаев, подозрительных на туберкулез;

- соматические и другие заболевания в период обострения;

- распространенные кожные заболевания;

- аллергические состояния (период обострения);

- эпилепсия;

- в детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям, проба проводится только после снятия карантина.

Постановку пробы с препаратом ДИАСКИНТЕСТ^® следует планировать до проведения профилактических прививок. Если профилактические прививки проведены, то пробу с препаратом ДИАСКИНТЕСТ^® осуществляют не ранее, чем 1 месяц после прививки. Здоровым лицам с отрицательным результатом пробы профилактические прививки (кроме БЦЖ) можно проводить непосредственно после оценки и учета результата пробы.

Выпускается препарат в стеклянных флаконах по 3 мл (30 доз). Одна доза препарата (0,1 мл) ДИАСКИНТЕСТА^® содержит: рекомбинантный белок CFP-ESAT6 (0,2 мкг), фенол (0,25 мкг) в качестве консерванта, полисорбат 80 (твин 80) в качестве стабилизатора, натрий фосфорно-кислый двузамещенный 2-водный, натрия хлорид, калий фофорно-кислый однозамещенный, воду для инъекций - до 0,1 мл. Препарат должен транспортироваться и храниться при температуре от 2^oС до 8^oС, исключая замораживание. Срок хранения 1 год. Методика проведения пробы с препаратом ДИАСКИНТЕСТ^® аналогична методике проведения пробы Манту с 2 Т.Е.

Оценка результатов ДИАСКИНТЕСТА^® осуществляется через 72 часа. Ответная реакция на пробу может быть:

1. отрицательная реакция – отсутствие инфильтрата и гиперемии или наличии «уколочной реакции»;

2. сомнительная – наличие гиперемии без инфильтрата;

3. положительная – инфильтрат (папула) любого размера:

- слабо выраженная – инфильтрата до 5 мм или гиперемия 5 мм и более;

- умеренно выраженная – инфильтрат 5-9 мм;

- выраженная – инфильтрат 10 мм и более;

- гиперергическая – инфильтрат 15 мм и более, везикуло-некротические изменения и (или) лимфангоит, лимфаденит независимо от размера инфильтрата.

Детям и подросткам, у которых на фоне инфицирования МБТ впервые установлена сомнительная или положительная проба на препарат ДИАСКИНТЕСТ^®, проводится полное клинико-рентгенологическое обследование в противотуберкулезном диспансере для исключения локального процесса с использованием компьютерной томографии органов грудной клетки, УЗИ внутренних органов и т.д. В зависимости от результатов обследования в дальнейшем им показана либо специфическая химиотерапия при выявлении локального процесса или химиопрофилактика (превентивное лечение) при его отсутствии. Данные лица подлежат диспансерному наблюдению в противотуберкулезном диспансере.

В отличие от реакции замедленного типа, кожные проявления неспецифической аллергии (в основном гиперемия) на препарат, как правило, наблюдаются сразу после постановки пробы и через 48-72 часа обычно исчезают. Отрицательная реакция на ДИАСКИНТЕСТ^® может быть в следующих случаях:

1. у неинфицированных М.tuberculosis лиц;

2. у лиц, ранее инфицированных М.tuberculosis, с неактивной туберкулезной инфекцией;

3. у больных туберкулезом в период завершения инволюции туберкулезных изменений, при отсутствии клинических, рентгено-томографических, инструментальных и лабораторных признаков активности процесса;

4. у лиц с клинически излеченным туберкулезом;

5. у лиц на ранних стадиях инфицирования М.tuberculosis, на ранних стадиях туберкулезного процесса, с сопутствующими заболеваниями (СПИД, вирусные гепатиты и др.), сопровождающимися иммунодефицитным состоянием;

6. у больных туберкулезом с выраженными иммунодефицитом, обусловленным тяжелым течением туберкулезного процесса.

Отрицательная реакция на внутрикожную пробу с препаратом ДИАСКИНТЕСТ^® не должна препятствовать проведению дальнейших мероприятий по диагностике туберкулеза.