32. Генетична карта бактеріофагу лямбда.

Після проникнення в бактеріальну клітину лінійна ДНК бактеріофага λ замикається в кільце бактеріальною лігазою. Геном фагамістить гени, які відповідають за синтез білків головки та хвоста фагової частинки, реплікацію фагової ДНК, лізис бактерії, рекомбінацію(вбудовування фагової ДНК у бактеріальний геном), і кілька регуляторних генів, що кодують фактори транскрипції

33. Інтеграція геному фагу лямбда.

. Интеграция (включение) фагалямбда в хромосому Es heri hia oli и его освобождение из хромосомы (исключение). В фаговой частице ДНК представлена линейной двойной спиралью с неспаренными комплементарными концами. В растворе или в бактериальной клеткелипкие комплементарные концы связываются друг с другом, и разрыв в каждой цепи закрывается с помощью лигазы. После этого замкнутоедвухцепочечное кольцо подходит к хромосоме (между генами gal и Ыо), обе двойные спирали разрываются и образовавшиеся свободные концы воссоединяются крест-накрест. В результате фаговая ДНК оказывается включенной (встроенной, или интегрированной) в хромосому хозяина. Фаг превратился теперь в профаг, и клетка стала лизогенной (в данном случае по фагу лямбда), В результатеобратного процесса может произойтивыключение ДНК фага и переход ее в автономное состояние.

Как только фаг попадает внутрь клетки хозяина, он может интегрировать себя в его ДНК. В этом состоянии λ называютпрофагом, он остается в геноме хозяина, внешне не проявляя своё присутствие. Профаг размножается с каждым делением клетки хозяина.

ДНК профага может экспрессироваться в тех случаях, когда наблюдаются признаки стресса в клетке-хозяине. Стресс может быть вызван голоданием, ядами (например антибиотиком), или другим факторами, которые могут повредить или уничтожить хозяина. В этом случае профаг активируется, выделяет себя из ДНК клетки-хозяина и вводит ее в литический цикл. Активированный фаг уничтожает ДНК хозяина и производит большое количество собственной мРНК, чтобы произвести множество единиц фага. Когда все ресурсы хозяина исчерпаны от построения новых фагов, клетка-хозяин разрушается, клеточная мембрана разрывается, и новые фаги выходят во внешнюю среду^[2].

Інтеграція фагу відбувається на специфічному сайті в бактеріальному геномі att. Послідовність цього сайту назив. attB, тоді як комплементарна послідовність в кільцевому геномі фагу attP. Інтеграція – це послідовний обмін, що відбувається через утворення структурою Холлідея і потребується фагового білка lnt і IHF бактеріального білка. lnt і IHF зв’язуються з attP і формують інтрасому: ДНК-білковий комплекс, що призначений для сайт-специфічної рекомбінації ДНК фагу і хазяїна.

http://chem21.info/info/32963/

34. Генетична карта вірусу sv-40.

Поліомавірус, знайдений в кліт. людини і мавпи. Як і інші поліомавіруси, він являється ДНК вмісним вірусом і може викликати утворення пухлин, але звичайно знаходиться на стадії латентної інфекції.Цим вірусом були заражені мільйони людей, так як в 1960 – х роках їм була заражена вакцина від вірусу поліомієліту.

Семейство:

Polyomaviridae

Род:	Полиомавирусы

Вид:	Simian virus 40

Має ікосаедричний віріон, що вміщує геномну ДНК довжиною 5000 пар основ. Віріон прикріплюється до рецепторів МНС класу А на поверхні клітини за допомогою глікопротеїна VP1. Всередині ядра клітнна РНК полімераза 2 експресує ранні гени. Транскрибована м РНК піддається розрізанню на 2 фрагменти, що кодують великий та малий Т – антигени. Біля 5 % великого Т антигену поступає в плазматичну мембрану клітини, а біля 95% - поступає в ядро. Великий Т антиген зв’язується з 3 сайтами в вірусній ДНК, зв’язування з сайтом 1 і 2 регулює синтез ранніх РНК, зв’язування з другим сайтом проходить в кожному клітинному циклі 2. Звязування з сайтом 1 викликає реплікацію ДНК в місці ори джина реплікації. Збірка віріонів проходить в ядрі клітини.