Правила выполнения лабораторной работы

Необходимым элементом микроскопического изучения объекта является его зарисовка в альбом; лучше иметь альбом формата 30×21 см и карандаши (простой и цветные).

На обложке указать: название альбома, курс, группу, факультет, номер специальности, фамилию, имя, отчество.

Рисунки делаются с левой стороны листа альбома. Обозначения цифро­вые. Справа от рисунков размещаются подписи. Рисунки должны быть четки­ми, цветными, со всеми обозначениями.

При выполнении рисунков необходимо:

а) ознакомиться с описанием гистологического препарата;

б) изучить рисунок и обозначения к нему, приве­денные в таблицах, на слайдах, обучающих макетах, на рисунках демонстраци­онных препаратов;

в) изучить препарат, сначала визуально, затем с помощью микроскопа;

г) использовать непосредственно препарат, а не копировать меха­нически рисунки с атласа, учебных пособий, так как при копировании нельзя понять специфики строения клеток, тканей и органов, осмыслить морфологиче­ские, генетические и функциональные особенности тканей различных органов. При работе непосредственно с препаратом закрепляются зрительные представ­ления, вырабатываются навыки проведения экспериментов, «чтения» препара­тов, мысленного воспроизведения картины нормы или патологии органов при различных заболеваниях;

д) соблюдать соотношение частей и цветность изу­чаемого препарата.

Задание 2. Изучить технику приготовления гистологического препарата – гематоксилин и эозином.

1. Сполоснутый срез (замораживающий микротом) в водопроводной воде перенести в чашку с раствором гематоксилина на несколько минут (10-15 мин.)

2. Хорошо сполоснуть срез в водопроводной воде.

3. Дифференцировать в солянокислом спирте (1-% соляной кислоты в 70-% спирте), при этом срез из тёмно-фиолетового, фиолетово-синего, чёрно-синего становится коричневато-фиолетовым или коричневато-красным (5-6 капель соляной кислоты на 100 мл 70-% спирта).

4. Сполоснуть срез большим количеством водопроводной воды несколько раз до посинения.

5. Перенести срез в слабый раствор нашатырного спирта – аммиака (в дистиллированную воду накапать 3 капли нашатырного спирта; в такой щелочной среде срезы становятся синими (10мин.)).

6. Хорошо сполоснуть срез в дистиллированной воде несколько раз (в течение 15 минут).

7. Окрасить срез эозином (3-5 мин.)

8. Сполоснуть срез дистиллированной водой, несколько раз меняя воду.

9. Перенести срез в 70-% - 96-% спирт, но не держать его в спирте больше 1-2 минут.

10. Просветлить срез карбол-ксилолом (несколько секунд).

11. Сполоснуть ксилолом.

Во время работы с карбол-ксилолом и ксилолом быть предельно аккуратными. Нельзя разливать, оставлять открытым ёмкость с этими веществами, так как они являются потенциальными канцерогенами.

12. Заключить в бальзам (на срез наносится капля бальзама, после наложения покровного стекла, остатки бальзама удаляются чистой тряпочкой, продолжительность сушки окрашенного среза – 2-3 суток).

Материалы

Таблица 6. Получение слабых спиртов

Для получения 100 мл	Нужно взять, мл
	96% спирта	воды	90% спирта	воды	80% спирта	воды	70% спирта	воды
45%	47	53	50	50	56	44	64	36
50%	52	48	56	44	63	37	71	29
60%	63	37	67	33	75	25	86	14
70%	73	27	78	22	88	12	-	-
80%	83	17	89	11	-	-	-	-
90%	94	6	-	-	-	-	-	-