- •Введение
- •Раздел «Цитология» Занятие 1. Гистологическая техника
- •Правила техники безопасности в учебном процессе
- •Организация рабочего места студента – гистолога
- •Гистологическая техника для приготовления гистологических препаратов
- •Приготовление тотальных препаратов
- •Приготовление парафиновых и целлоидиновых срезов
- •Материалы и оборудование:
- •Техника изготовления препарата - мазка спермы:
- •Изготовление гистопрепаратов из эпителиальных клеток слизистой щеки
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 2. Микроскопическая техника
- •Методы исследования
- •Механическая часть:
- •Оптическая часть:
- •Правила пользования микроскопом:
- •Типы микроскопов
- •Правила выполнения лабораторной работы
- •Материалы
- •Приготовление раствора гематоксилина
- •Приготовление эозина
- •Приготовление карбол-ксилола
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 3. Фиксаторы. Парафиновая, целлоидиновая, желатиновая проводки.
- •Фиксирующие средства и их применение
- •Простые фиксаторы
- •Фиксирующие смеси (сложные фиксаторы) и их применение
- •Промывание, обезвоживание и заливка гистологического материала
- •Промывание
- •Обезвоживание
- •Пропитывание и заливка
- •Заливка в парафин
- •Методика пропитывания
- •Заливка
- •Приготовление комбинированных парафиновых блоков
- •Заливка в целлоидин
- •Заливка в целлоидин - парафин
- •Заливка в желатину
- •Заливка в поливакс (карбовакс)
- •Подготовка гистологического материала и приготовление парафиновых срезов
- •Окрашивание срезов гематоксилин-эозином
- •Методика окрашивания гематоксилином и эозином целлоидиновых срезов
- •Окрашивание срезов для обзорных целей
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 4. Неклеточные структуры живого вещества
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 5. Формы клеток. Органоиды клеток.
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 6. Органеллы временного значения - включения.
- •Окрашивание жиров и липидов
- •Приготовление раствора красителя
- •Приготовление рабочих растворов
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 7. Практическое занятие
- •Техника приготовления ацетоорсеина или ацетокармина.
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 8. Деление клетки
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 9. Коллоквиум по цитологии.
- •Вопросы к коллоквиуму №1 «Цитология»
- •Список основных терминов к разделу «Цитология»
- •Раздел «Общая гистология» Занятие 10. Эпителиальная ткань
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 11. Практическое занятие
- •Методы исследования крови и кроветворения
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 12-13. Ткани внутренней среды
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 14. Опорные ткани
- •Практическое задание
- •Окрашивание эластических волокон резорцин-фуксином Вейгерта
- •Обработка и окрашивание костной ткани
- •Декальцинация
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 15. Мышечные ткани.
- •Практическое задание Методы исследования мышечной ткани
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 16. Нервная ткань
- •Практическое задание
- •Окрашивание хроматофильной субстанции по методу Ниссля в модификации Майера
- •Импрегнация нейрофибрилл серебром по Бильшовскому - Грос в модификации Лаврентьева
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 17. Коллоквиум по общей гистологии
- •Вопросы к коллоквиуму № 2 «Ткани»
- •Список основных терминов Тема «Эпителиальные ткани. Железы»
- •Тема «Соединительные ткани»
- •Тема «Мышечные ткани»
- •Тема «Нервная ткань»
- •Занятие 18. Зачет по цитологии и общей гистологии.
- •Занятие 19. Пищеварительная система.
- •Спланхнология
- •Микропрепараты для изучения и зарисовки
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 20. Дыхательная система.
- •Микропрепараты для изучения и зарисовки
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 21. Мочевыделительная система.
- •Микропрепараты для изучения и зарисовки
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 22. Системы органов размножения
- •Микропрепарат для изучения и зарисовки
- •Анатомический состав системы органов размножения самок:
- •Микропрепараты для изучения и зарисовки
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 23. Коллоквиум по частной гистологии
- •Вопросы к коллоквиуму №1 по частной гистологии
- •Занятие 24. Сердечно-сосудистая система
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 25. Нервная система и органы чувств
- •Микропрепараты для изучения и зарисовки
- •Микропрепараты для изучения и зарисовки
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 26. Эндокринная система (железы внутренней секреции). Кожа и её производные.
- •Эндокринные железы и их гормоны
- •Микропрепараты для изучения и зарисовки
- •Вопросы для самопроверки
- •Занятие 27. Коллоквиум по частной гистологии
- •Вопросы к коллоквиуму № 2 по частной гистологии
- •Экзаменационные вопросы
- •Перечень экзаменационных препаратов
- •Список основной и дополнительной литературы
- •Содержание
- •Раздел «Цитология»
- •Раздел «Общая гистология»
- •Раздел «Частная гистология»
Механическая часть:
1 – основание;
2 – тубусодержатель
3 – тубус;
4 – коробка механизма микроподачи;
5 – револьверное устройство;
6 – предметный столик с зажимами-клеммами;
7 – макрометрический винт (кремальера);
8 – микрометрический винт;
9 – винт конденсора.
Оптическая часть:
10 – окуляр (с различной степенью увеличения ×5, ×7, ×10, ×15);
11 – объективы (рис. 5.Б):
а) малого увеличения (×8)
б) большого увеличения (×40)
в) иммерсионного увеличения (×90)
«Сухие» объективы работают в обычных условиях – без дополнительных маркировок; иммерсионные объективы работают при наличии иммерсии – с дополнительными маркировками в виде полос. Цвет полосы показывает природу иммерсии: чёрная полоса – иммерсия масленая, белая полоса – иммерсия водная.
С оптической частью связано осветительное устройство, которое включает в себя: 12 – конденсор с ирисовой диафрагмой; 13 – зеркало с двумя поверхностями – вогнутой и плоской.
Правила пользования микроскопом:
Удобно поставить микроскоп на столе.
Револьвер замкнуть на засечку, поставив при этом объектив малого увеличения – 8. Фокусное расстояние должно быть при этом около 1 см от объектива.
Установить освещение при малом объективе, повернув вогнутое зеркало к источнику света так, чтобы поле зрения было освещено равномерно и достаточно хорошо.
Положить препарат на предметный столик, чтобы покровное стекло гистологического препарата было сверху.
Рассмотреть препарат при слабом увеличении. Найти нужный участок для последующего детального изучения и поставить его в центр поля зрения микроскопа. Препарат закрепить зажимами и повернуть револьверное устройство на сильный объектив до щелчка.
Очень осторожным движением винта кремальеры «на себя» установить фокус сильного увеличения и микровинтом отфокусировать объект (фокусное расстояние около 1-2 мм).
Рассмотреть препарат при сильном увеличении, периодически вращая микрометрический винт в обе стороны на четверть оборота для того, чтобы лучше просмотреть глубокие слои изучаемого препарата.
Изучить препарат, зарисовать и обозначить.
По окончании изучения и зарисовки препарата следует поднять тубус, перевести револьвер на слабое увеличение и только тогда освободить зажимы и снять препарат со столика микроскопа. При малом увеличении конденсор должен быть опущен, а при большом – поднят.
Приготовить окулярную указку для микроскопа. Вынуть окуляр и снять его наружные размеры, т. е. изобразить на плотной бумаге (альбомный лист) в виде круга. Внутренние размеры определить по световой линзе. Затем вырезать кольцо. К его поверхности приклеить волос по радиусу центрального поля. После проверки преподавателем правильности изготовления указки поместить ее между линзами окуляра. Для этого отвернуть (против часовой стрелки.) глазную линзу, вставить указку и завернуть линзу обратно.
Типы микроскопов
Биомед · ЛОМО · Olympus · Nikon
Учебные · Лабораторные · Исследовательские
Таблица 1. Прямые микроскопы
Модель |
Тип |
Объективы |
Окуляры |
Биомед: |
|||
Биомед С1и |
монокуляр |
10×/40×/100×МИ |
5×/10×/16× |
БиомедС2 вар.4 |
монокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
WF10× |
Биомед - 1 |
би-/тринокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
WF10× /WF16× |
Биомед - 2 |
тринокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
WF10× /WF16× |
ЛОМО: |
|||
Микмед-1 вар.1.20 |
монокуляр |
10×/40×/100×МИ |
10× |
Микмед-1 вар.2.20 |
бинокуляр |
10×/40×/100×МИ |
10× |
Микмед-1 вар.6 |
бинокуляр |
10×/20×/60×/90×МИ |
5×/7× |
Микмед-1 вар.2 |
бинокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
10×/15× |
Olympus: |
|||
СХ 21 |
бинокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
10× |
СХ 31 |
бинокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
10× |
СХ 41 |
би-/тринокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
10× |
Nikon: |
|||
YS 100 |
бинокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
10× |
E 200 F |
би-/тринокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
10× |
Рис.6. Микроскоп Биомед – 2 |
Рис.7. Микроскоп Микмед-1 вар. 2.20 (ЛОМО) |
Простые лабораторные бинокулярные микроскопы предназначены для биологических, биохимических, патологоанатомических, цитологических, гематологических, урологических, дерматологических и общеклинических исследований.
Рис.8. Микроскоп СХ 21 (Olympus) – компактный микроскоп с высоким качеством оптики, предназначен для лабораторий общеклинических исследований, идеален для лабораторий с ограниченным рабочим местом, бинокуляр, скорректированная на бесконечность оптика.
Таблица 2. Люминесцентные микроскопы
Модель |
Тип |
Объективы |
Окуляры |
Биомед: |
|||
Биомед 2Л |
тринокуляр |
10×/20×/40×/100×МИ |
10×/16× |
ЛОМО: |
|||
Микмед-2 вар.11 |
бинокуляр |
10×/20×/40×БПС/100×МИ |
6,3×/10×/15×/ 15× со шкалой |
Микмед-2 вар.12 |
бинокуляр |
10×/20×/40×БПС/100×МИ |
6,3×/10×/15×/ 15× со шкалой |
Olympus: |
|||
СХ 31 |
бинокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
10× |
СХ 41 |
би/тринокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
10× |
Nikon: |
|||
200 F |
би/тринокуляр |
4×/10×/40×/100×МИ |
10× |
Рис.9. Микроскоп Биомед 2Л
Люминесцентные микроскопы предназначены для иммунологических исследований с применением флюоресцирующих и ферментных меток, а также гистологических и цитологических исследований в клинической лабораторной диагностике.
Таблица 3. Поляризационные микроскопы
Модель |
Тип |
Объективы |
Окуляры |
ЛОМО: |
|||
Полам P-211М |
бинокуляр |
2,5×/10×/60×/60× |
10× |
Полам P-213М |
тринокуляр |
2,5×/10×/60×/60× |
10× |
Полам P-312 |
тринокуляр |
4,7×/9×/21×/40×/95× |
6,3×/10× |
Поляризационные микроскопы предназначены для исследований непрозрачных объектов в отраженном свете, обыкновенном и поляризованном, а также прозрачных объектов в проходящем свете. Области применения: петрография, минералогия, кристаллография, углепетрография, биология, медицина, химия, криминалистика.
Рис.10. Микроскоп Полам Р – 312 (ЛОМО)
Таблица 4. Инвертированные микроскопы
Модель |
Тип |
Объективы |
Окуляры |
ЛОМО: |
|||
Биолам П2-1 |
бинокуляр |
2,5×/6,3×/10×/20× |
10×,15× |
Olympus: |
|||
СКХ 31 |
бинокуляр |
4×/10×/20×/40× |
5×,10×,12.5×,15× |
СКХ 41 |
бинокуляр |
4×/10×/20×/40× |
5×,10×,12.5×,15× |
Nikon: |
|||
TS 100 |
би/тринокуляр |
4×/10×/20×/40× |
5×,10×,12.5×,15× |
Инвертированные микроскопы предназначены для исследования клеточных культур, находящихся в специальной лабораторной посуде. Области применения: иммунология, биотехнология, бактериология, фармакология, биология, сельское хозяйство, экология.
Рис.11. Биолам П2-1 (ЛОМО)
Таблица 5. Стереомикроскопы
Модель |
Тип |
Рабочее состояние |
Увеличение |
Биомед: |
|||
Биомед МС-1 |
бинокуляр |
105 мм |
до 80× |
Лыткарина: |
|||
МБС - 10 |
бинокуляр |
95 мм |
до 100× |
Olympus: |
|||
Серия SZ |
би-/тринокуляр |
до 110 мм |
от 3,4 до 330× |
Серия SZХ |
би-/тринокуляр |
до 198 мм |
до 675× |
Nikon: |
|||
SM-5 |
бинокуляр |
110 мм |
от 10× до 60× |
SMZ-645/660 |
би-/тринокуляр |
115 мм |
от 4× до 300× |
Стереомикроскопы предназначены для наблюдения прямого объемного изображения предметов в отраженном или проходящем свете при естественном или искусственном освещении. Микроскопы применяются в криминалистике, биологии, медицине, минералогии, археологии, машиностроении, приборостроении и других областях науки и техники. Микроскопы могут комплектоваться осветителями светлого поля, темного поля, косого света, отраженного света и люминесцентным осветителем.
Рис. 12. Микроскоп Биомед МС-1
