Вопросы для самопроверки

1. Дайте характеристику и классификацию фиксаторам.

2. Назовите наиболее употребительные фиксаторы.

3. Назовите оптимальную толщину срезов при использовании заливки в парафин.

4. Преимущества и недостатки четырёх способов уплотнения материала: заливка в парафин, заливка в целлоидин, заливка в желатину; замораживание.

5. Для каких исследований применяют заливку в поливакс (карбовакс). Сущность этого метода.

6. Различные методы окраски гистологических срезов.

7. Методы окрашивания для обзорных целей.

Занятие 4. Неклеточные структуры живого вещества

Цели занятия:

1. Познакомить студентов с основными типами гистологических структур (клеткой, симпластом, синцитием и межклеточным веществом).

2. Рассмотреть электронно-микроскопическое строение клетки.

3. Закрепить навык микроскопирования гистологического препарата.

Задание 1. Научиться распознавать клетки и неклеточные структуры живого вещества на гистологических препаратах под объективами малого и большого увеличения микроскопа.

Клетки и образующиеся в результате их жизнедеятельности неклеточные структуры (симпласт, синцитий и межклеточное вещество) являются основой строения и функционирования организма.

Препарат 1. Нервная клетка спинального (спинномозгового, нервного) узла или ганглия.

При малом увеличении на препарате видны крупные клетки, расположенные группами между нервными волокнами и прослойками соединительной ткани (тонкие волокна, окрашенные в синий цвет). Выбрать нервную клетку с удачно разрезанным ядром, поставить в поле зрения, рассмотреть и зарисовать при большом увеличении (рис.20). Обозначения на рисунке:

1 – цитоплазма нейроцита;

2 – мелкая зернистость;

3 – ядерная оболочка (кариолемма);

4 – ядрышко;

5 – ядерный сок (кариоплазма или нуклеоплазма с матриксом + ядерный белковый остов);

6 – глыбки хроматина;

7 – ядра мантийных клеток.

Препарат 2. Симпласт поперечно-полосатых мышечных волокон.

Симпласты – это крупные образования, состоящие из большого объема цитоплазмы, с множеством ядер. При малом увеличении найти группу перерезанных вдоль мышечных волокон, разделенных прослойками соединительной ткани. Рассмотреть и зарисовать их при сильном увеличении, отметить цилиндрическую форму поперечно-полосатых мышечных волокон. Обозначения на рисунке:

1 – сарколемма (оболочка мышечных волокон);

2 – ядра овальной формы (под сарколеммой);

3 – миофибриллы;

4 – поперечная исчерченность волокон;

5 – прослойки соединительной ткани;

6 – ядра клеток соединительной ткани.

Препарат 3. Синцитий ретикулярной ткани лимфатического узла.

Синцитии (соклетия) – клетки, связанные между собой цитоплазматическими перемычками (после деления исходной клетки дочерние образуют синцитии – при развитии сперматогониев; синцитиотрофобласт). Основу лимфатического узла составляет ретикулярная ткань, состоящая из клеток и волокон (рис.21). При малом увеличении найти слабо окрашенный участок, между скоплениями лимфоцитов, где хорошо видны ретикулярные клетки, соприкасающиеся своими отростками и образующие сеть ретикулярной ткани. Обозначения на рисунке:

1 – ядра ретикулярных клеток;

2 – цитоплазма;

3 – отростки;

4 – лимфоциты;

5 – макрофаги.

Препарат 4. Межклеточное вещество в рыхлой соединительной ткани подкожной клетчатки.

Межклеточное вещество является безъядерным живым веществом. Оно состоит из основного (аморфного) вещества и волокон – коллагеновых и эластических. Рассмотреть препарат при малом и большом увеличении, где видны клетки соединительной ткани, лежащие свободно в аморфном веществе и между ними пробегают в разных направлениях волокна. Зарисовать и обозначить:

1 – коллагеновые волокна (толстые)

2 – эластические волокна (тонкие) матрикс

3 – основное (аморфное) вещество

4 – клетки рыхлой соединительной ткани

Задание 2. Распознавать в клетках ядро, цитоплазму, цитолемму по тинкториальным, макро- и ультраструктурным различиям.

Схема 2. Схема ультрамикроскопического строения клетки:

1 – оболочка клетки (цитолемма); 2 – пиноцитозные пузырьки; 3 – центросома (клеточный центр); 4 – гиалоплазма; 5 – гранулярная эндоплазматическая сеть (эргастоплазма): а – альфацитомембрана, б – рибосомы; 6 – ядро; 7 –связь перинуклеарного пространства с полостями, образованными альфа–цитомембранами; 8 – ядерные поры; 9 – ядрышко; 10 – внутриклеточный сетчатый аппарат (комплекс Гольджи); 11 – секреторные вакуоли; 12 –митохондрии; 13 – лизосомы; 14 – последовательные стадии фагоцитоза; 15 – связь клеточной оболочки (цитолеммы) с альфа–цитомембранами; 16 –микроворсинки.