Реакция Миллона на тирозин

Принцип метода. При добавлении к раствору белка реактива Миллона, (раствор ртути (I и II) в азотной кислоте с небольшим количеством HNO₃), образуется белый осадок (действие соли тяжелого металла), окрашивающийся при нагревании в красный цвет. Реактив Миллона дает окрашивание почти со всеми фенолами, причем у белков реакция обусловлена присутствием в них фенольной группы тирозина. Белки, не содержащие тирозина, этой реакции не дают.

Реактивы:

1. 1 % раствор яичного белка;

2. реактив Миллона.

Ход работы. Берут 3 пробирки: в первую вносят 10 капель 1 % раствора яичного белка, во вторую - 10 капель воды, в третью - 10 капель раствора фенола. В каждую пробирку добавляют по 3 капли реактива Миллона (смесь солей ртути в концентрированной азотной кислоте). Нагреть до окрашивания

Результат:

Первая пробирка:_____________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вторая пробирка: ______________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Третья пробирка: ______________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Реакция Фоля на цистеин

Принцип метода. Присутствующие в белке аминокислоты цистин и цистеин, содержащие слабосвязанную серу дают положительную реакцию Фоля. Метионин, этой реакции не дает, поскольку сера в нем связана прочно. При кипячении белка с реактивом Фоля (плюмбит натрия в избытке NaOH) под действием щелочи от цистеина или цистина легко отщепляется сера в виде сульфид натрия, который с солями свинца дает черный или бурый осадок сульфида свинца.

Реактивы:

1. 1 % раствор яичного белка;

2. кератин (светлый волос);

3. реактив Фоля.

Ход работы. Берут 2 пробирки: в одну вносят 5 капель 1 % раствора яичного белка, на дно второй пробирки помешают свернутый волос (лучше светлый). В каждую пробирку добавляют по 5 капель реактива Фоля (раствор ацетата свинца). Кипятят до появления черного окрашивания.

Результат:

Первая пробирка:_____________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вторая пробирка: _____________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________