- •Федеральное агентство по образованию российской федерации
- •I.Тема: Вводное занятие Лабораторная работа № 1. Особенности работы в биохимической лаборатории и инструктаж по технике безопасности:
- •II.Тема: строение и свойства белков
- •Лабораторная работа № 2. Качественные реакции
- •Качественные реакции на белки и аминокислоты
- •Биуретовая реакция на пептидные связи
- •Нингидриновая реакция на -аминокислоты
- •Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты
- •Реакция Миллона на тирозин
- •Реакция Фоля на цистеин
- •Лабораторная работа № 3 устройство и Принцип работы фотоэлектРоколориметра (фэк).
- •Устройство колориметра фотоэлектроколориметра ( фэк-2 )
- •Общий вид прибора
- •Измерение оптической плотности на кфк-2
- •Количественное определение белка Биуретовый метод
- •Лабораторная работа № 4 Реакции осаждения белков
- •Осаждение белков при кипячении
- •Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Осаждение белков органическими кислотами
- •Растворимость белков
- •Очистка белков методом диализа
- •Лабораторная работа № 5 Разделение белков и определение их молекулярной массы методом гель – хроматографии
- •III.Тема: ферменты
- •Лабораторная работа № 6
- •Свойства ферментов
- •Влияние температуры на активность ферментов
- •Влияние рН среды на активность ферментов
- •Специфичность действия амилазы и сахаразы
- •Лабораторная работа № 6 Регуляция активности ферментов Изучение аллостерических свойств а-амилазы
- •Лабораторная работа № 7 Количественное определение активности фермента Действие амилазы на крахмал
- •IV.Тема нуклеиновые кислоты Лабораторная работа № 8 Кислотный гидролиз нуклеопротеинов.
- •V.Тема: биологическое окисление Лабораторная работа № 9 Обнаружение над в дрожжах
- •Лабораторная работа № 10 Обнаружение каталазы в крови
- •Лабораторная работа № 11 Сопоставление овп рибофлавина.
- •VI.Тема: углеводы
- •Лабораторная работа № 13
- •Качественные реакции на углеводы
- •Реакция Фелинга на моносахариды
- •Реакция Селиванова на фруктозу
- •Реакция Фелинга на дисахариды
- •Гидролиз сахарозы и определение продуктов гидролиза
- •Реакция Фелинга с крахмалом
- •Реакция крахмала с йодом.
- •Лабораторная работа № 14 Обнаружение фосфотриоз в мышечной ткани
- •Лабораторная работа № 15 Обнаружение дегидрогеназы 3-фосфоглицеринового альдегида
- •Обнаружение молочной кислоты
- •Лабораторная работа № 16 Проба Бенедикта на глюкозу
- •Ход работы
- •VII.Гормоны.
- •Лабораторная работа № 17
- •Качественные реакции на гормоны
- •Реакция на адреналин с хлорным железом
- •Биуретовая реакция и реакция Фоля на инсулин
- •Лабораторная работа № 18 Флюоресценция продуктов окисления адреналина
- •Диазореакция на адреналин
- •VIII.Витамины
- •Лабораторная работа № 20
- •Качественные реакции на витамины.
- •Реакция восстановления витамина в2.
- •Феррихлоридная проба на витамин в6.
- •На витамин с.
- •На витамин а
- •На витамин d
- •На викасол
- •На витамин е
- •IX.Липиды Влияние желчи на активность липазы
- •Эмульгирование жира
- •Качественные реакции на холестерин
- •Качественная реакция на кетоновые тела
- •Качественные реакции на желчные кислоты
- •X.Тема нуклеиновые кислоты Определение мочевой кислоты в моче
- •Теоретические основы пцр
- •XI.Тема синтез белка Количественное определение днк колориметрическим методом
- •Количественное определение рнк колориметрическим методом
- •Спектрофотометрическое определение суммарного содержания нуклеиновых кислот
- •Определение активности рибонуклеазы
- •Определение активности дезоксирибонуклеазы
- •XII.Тема биохимия Бензидиновая проба на кровь
- •Получение кристаллов гемина из гемоглобина (проба Тейхмана)
- •Визуальное определение агрегации тромбоцитов
- •Время свертывания по ли-уайту
- •Выделение холестерина из мозговой ткани
- •Выделение фосфатидов из мозговой ткани
- •Оценка транспортной функции сывороточного альбумина
- •Обнаружение пенициллина реакцией с гидроксиламином
- •Нитропруссидная реакция на пенициллин
- •Мальтольная реакция на стрептомицин
- •Реакция Сакагучи на гуанидиновую группировку стрептомицина
- •Качественные реакции на тетрациклин
- •Качественные реакции на кортизол
- •Обнаружение пиридоксалевой кислоты в моче
Качественные реакции на кортизол
С солянокислым фенилгидразином. Благодаря наличию карбонильных групп кортизон, преднизолон, реагируя с фенилгидразином, образуют гидразон и озазон.
Реактивы: 1) фенилгидразин солянокислый (0,1 г фенил гидразина растворить в 100 мл охлажденной смеси из равных объемов концентрированной серной кислоты и воды. Раствор готовить перед употреблением); 2) преднизолон, 1 мг в 1 мл этилового спирта.
Ход работы
К 1 мл раствора преднизолона прибавляют 5 мл раствора фенилгидразина и нагревают на водяной бане. Через несколько минут появляется желтое окрашивание.
Вывод______________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________
С реактивом Феллинга. Кортизон и преднизолон способны восстанавливать закись меди из солей окиси.
Реактивы:
реактив Феллинга;
раствор преднизолона.
Ход работы К 1 мл раствора преднизолона прибавляют 1 мл реактива Феллинга, нагревают на спиртовке. Выпадает красный осадок закиси меди.
Вывод______________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________
Обнаружение пиридоксалевой кислоты в моче
Принцип метода. Витамин В6 выделяется в виде пиридоксалевой кислоты, лактон которой флюоресцирует синим цветом в ультрафиолетовых лучах.
Реактивы:
1) соляная кислота, 10% раствор; 2) едкий натр, 10% раствор; 3) тетраборат натрия, \% раствор; 4) моча.
Ход работы
В пробирку вносят 3 капли мочи и столько же раствора соляной кислоты. Затем пробирку с содержимым кипятят на водяной бане в течение 20 мин для получения лактона пиридоксалевой кислоты. После охлаждения добавляют 3 капли раствора едкого натра и раствор тетрабората натрия до 1/2 объема пробирки. В полученном растворе наблюдают синее свечение в флюороскопе.
Вывод______________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
|
|
|
|
ВВЕДЕНИЕ |
|
I.ТЕМА: Вводное занятие |
|
|
|
Правила техники безопасности в биохимической лаборатории:
|
|
II.ТЕМА: БЕЛКИ |
|
|
|
Качественные реакции на белки и аминокислоты |
|
|
Биуретовая реакция на пептидные связи |
|
|
Нингидриновая реакция на -аминокислоты |
|
|
Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты |
|
|
Реакция Миллона на тирозин |
|
|
Реакция Фоля на цистеин |
|
|
Реакции осаждения белков |
|
|
Осаждение белков при кипячении |
|
|
Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами |
|
|
Осаждение белков органическими кислотами |
|
|
Растворимость белков |
|
|
Очистка белков методом диализа |
|
|
Разделение белков и определение их молекулярной массы методом гель - хроматографии |
|
III.ТЕМА: ФЕРМЕНТЫ |
|
|
|
Действие амилазы на крахмал |
|
|
Влияние температуры |
|
|
Влияние рН среды |
|
|
Проба на субстратную специфичность амилазы и сахаразы |
|
|
Изучение аллостерических свойств а-амилазы |
|
IV.ТЕМА НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ |
|
|
|
Кислотный гидролиз нуклеопротеинов. |
|
V.ТЕМА: БИОЛОГИЧЕСКОЕ ОКИСЛЕНИЕ |
|
|
|
Обнаружение НАД в дрожжах |
|
|
Обнаружение каталазы в крови |
|
|
Сопоставление ОВП рибофлавина. |
|
VI.ТЕМА: ОБМЕН УГЛЕВОДОВ |
|
|
|
Обнаружение фосфотриоз в мышечной ткани |
|
|
Обнаружение дегидрогеназы 3-фосфоглицеринового альдегида |
|
|
Обнаружение молочной кислоты |
|
|
Проба Бенедикта на глюкозу |
|
|
Выделение гликогена из печени |
|
|
Качественные реакции на углеводы |
|
|
Реакция Фелинга на моносахариды |
|
|
Реакция Селиванова на фруктозу |
|
|
Реакция Фелинга на дисахариды |
|
|
Гидролиз сахарозы и определение продуктов гидролиза |
|
|
Реакция Фелинга с крахмалом |
|
|
Реакция крахмала с йодом. |
|
VII.ГОРМОНЫ. |
|
|
|
Качественные реакции на гормоны |
|
|
Реакция на адреналин с хлорным железом |
|
|
Диазореакция на адреналин |
|
|
Флюоресценция продуктов окисления адреналина |
|
VIII.ВИТАМИНЫ |
|
|
|
Качественные реакции на витамины. |
|
|
Реакция восстановления витамина В2. |
|
|
Биуретовая реакция и реакция Фоля на инсулин |
|
|
На витамин С |
|
|
Феррихлоридная проба на витамин В6. |
|
|
На витамин А |
|
|
На викасол |
|
|
На витамин D |
|
|
На витамин Е |
|
IX.ОБМЕН ЛИПИДОВ |
|
|
|
Влияние желчи на активность липазы |
|
|
Эмульгирование жира |
|
|
Качественные реакции на холестерин |
|
|
Качественная реакция на кетоновые тела |
|
|
Качественные реакции на желчные кислоты |
|
X.ТЕМА НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ |
|
|
|
Определение мочевой кислоты в моче
|
|
|
Теоретические основы ПЦР |
|
XI.ТЕМА СИНТЕЗ БЕЛКА |
|
|
|
Количественное определение ДНК колориметрическим методом |
|
|
Количественное определение РНК колориметрическим методом |
|
|
Спектрофотометрическое определение суммарного содержания нуклеиновых кислот |
|
|
Определение активности рибонуклеазы |
|
|
Определение активности дезоксирибонуклеазы |
|
XII.ТЕМА ЧАСТНАЯ БИОХИМИЯ |
|
|
|
Бензидиновая проба на кровь |
|
|
Получение кристаллов гемина из гемоглобина (проба Тейхмана) |
|
|
Визуальное определение агрегации тромбоцитов |
|
|
Время свертывания по Ли-Уайту |
|
|
Выделение холестерина из мозговой ткани |
|
|
Выделение фосфатидов из мозговой ткани |
|
|
Оценка транспортной функции сывороточного альбумина |
|
|
Обнаружение пенициллина реакцией с гидроксиламином |
|
|
Нитропруссидная реакция на пенициллин |
|
|
Мальтольная реакция на стрептомицин |
|
|
Реакция Сакагучи на гуанидиновую группировку стрептомицина |
|
|
Качественные реакции на тетрациклин |
|
|
Качественные реакции на кортизол |
|
|
Обнаружение пиридоксалевой кислоты в моче |
|