- •Федеральное агентство по образованию российской федерации
- •I.Тема: Вводное занятие Лабораторная работа № 1. Особенности работы в биохимической лаборатории и инструктаж по технике безопасности:
- •II.Тема: строение и свойства белков
- •Лабораторная работа № 2. Качественные реакции
- •Качественные реакции на белки и аминокислоты
- •Биуретовая реакция на пептидные связи
- •Нингидриновая реакция на -аминокислоты
- •Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты
- •Реакция Миллона на тирозин
- •Реакция Фоля на цистеин
- •Лабораторная работа № 3 устройство и Принцип работы фотоэлектРоколориметра (фэк).
- •Устройство колориметра фотоэлектроколориметра ( фэк-2 )
- •Общий вид прибора
- •Измерение оптической плотности на кфк-2
- •Количественное определение белка Биуретовый метод
- •Лабораторная работа № 4 Реакции осаждения белков
- •Осаждение белков при кипячении
- •Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Осаждение белков органическими кислотами
- •Растворимость белков
- •Очистка белков методом диализа
- •Лабораторная работа № 5 Разделение белков и определение их молекулярной массы методом гель – хроматографии
- •III.Тема: ферменты
- •Лабораторная работа № 6
- •Свойства ферментов
- •Влияние температуры на активность ферментов
- •Влияние рН среды на активность ферментов
- •Специфичность действия амилазы и сахаразы
- •Лабораторная работа № 6 Регуляция активности ферментов Изучение аллостерических свойств а-амилазы
- •Лабораторная работа № 7 Количественное определение активности фермента Действие амилазы на крахмал
- •IV.Тема нуклеиновые кислоты Лабораторная работа № 8 Кислотный гидролиз нуклеопротеинов.
- •V.Тема: биологическое окисление Лабораторная работа № 9 Обнаружение над в дрожжах
- •Лабораторная работа № 10 Обнаружение каталазы в крови
- •Лабораторная работа № 11 Сопоставление овп рибофлавина.
- •VI.Тема: углеводы
- •Лабораторная работа № 13
- •Качественные реакции на углеводы
- •Реакция Фелинга на моносахариды
- •Реакция Селиванова на фруктозу
- •Реакция Фелинга на дисахариды
- •Гидролиз сахарозы и определение продуктов гидролиза
- •Реакция Фелинга с крахмалом
- •Реакция крахмала с йодом.
- •Лабораторная работа № 14 Обнаружение фосфотриоз в мышечной ткани
- •Лабораторная работа № 15 Обнаружение дегидрогеназы 3-фосфоглицеринового альдегида
- •Обнаружение молочной кислоты
- •Лабораторная работа № 16 Проба Бенедикта на глюкозу
- •Ход работы
- •VII.Гормоны.
- •Лабораторная работа № 17
- •Качественные реакции на гормоны
- •Реакция на адреналин с хлорным железом
- •Биуретовая реакция и реакция Фоля на инсулин
- •Лабораторная работа № 18 Флюоресценция продуктов окисления адреналина
- •Диазореакция на адреналин
- •VIII.Витамины
- •Лабораторная работа № 20
- •Качественные реакции на витамины.
- •Реакция восстановления витамина в2.
- •Феррихлоридная проба на витамин в6.
- •На витамин с.
- •На витамин а
- •На витамин d
- •На викасол
- •На витамин е
- •IX.Липиды Влияние желчи на активность липазы
- •Эмульгирование жира
- •Качественные реакции на холестерин
- •Качественная реакция на кетоновые тела
- •Качественные реакции на желчные кислоты
- •X.Тема нуклеиновые кислоты Определение мочевой кислоты в моче
- •Теоретические основы пцр
- •XI.Тема синтез белка Количественное определение днк колориметрическим методом
- •Количественное определение рнк колориметрическим методом
- •Спектрофотометрическое определение суммарного содержания нуклеиновых кислот
- •Определение активности рибонуклеазы
- •Определение активности дезоксирибонуклеазы
- •XII.Тема биохимия Бензидиновая проба на кровь
- •Получение кристаллов гемина из гемоглобина (проба Тейхмана)
- •Визуальное определение агрегации тромбоцитов
- •Время свертывания по ли-уайту
- •Выделение холестерина из мозговой ткани
- •Выделение фосфатидов из мозговой ткани
- •Оценка транспортной функции сывороточного альбумина
- •Обнаружение пенициллина реакцией с гидроксиламином
- •Нитропруссидная реакция на пенициллин
- •Мальтольная реакция на стрептомицин
- •Реакция Сакагучи на гуанидиновую группировку стрептомицина
- •Качественные реакции на тетрациклин
- •Качественные реакции на кортизол
- •Обнаружение пиридоксалевой кислоты в моче
Нитропруссидная реакция на пенициллин
Принцип метода. При щелочном гидролизе пенициллина происходит освобождение сульфгидрильных групп, взаимодействующих с нитропруссидом натрия с образованием нестойкого соединения красного цвета.
Реактивы: 1) пенициллин, 0,5% раствор; 2) едкий натр, концентрированный раствор; 3) нитропруссид натрия, 5% раствор.
Ход работы К 2 каплям раствора пенициллина добавляют 2 капли концентрированного раствора едкого натра и кипятят 1—2 мин. После охлаждения добавляют по каплям раствор нитропруссида натрия. Наблюдают появление красного окрашивания, переходящего в оранжевое и желтое.
Результат: ______________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод______________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Мальтольная реакция на стрептомицин
Принцип метода. Реакция основана на способности стрептомицина гидролизоваться щелочью с образованием мальтола (а-метил-р-оксипирона), дающего характерное окрашивание с ионами трехвалентного железа.
Реактивы: 1) стрептомицин, 1% раствор; 2) едкий натр, 10% раствор; 3) соляная кислота, 10% раствор; 4) хлорное железо, 1% раствор.
Ход работы: К 3 каплям раствора стрептомицина добавляют 1 каплю раствора едкого натра. Смесь кипятят на спиртовке в течение 5—10 с. Пожелтевшую и слегка мутную жидкость нейтрализуют 2 каплями раствора соляной кислоты. Нейтральная жидкость становится прозрачной и бесцветной. К ней добавляют 1—2 капли раствора хлорного железа. Появляется красно-фиолетовое окрашивание.
Результат: ______________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод______________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Реакция Сакагучи на гуанидиновую группировку стрептомицина
Реактивы: 1) стрептомицин, 1% водный раствор; 2) едкий натр, 10% раствор; 3) а-нафтол, 0,1% спиртовой раствор; 4) гипобромид натрия, 2% свежеприготовленный раствор.
Ход работы К 3 каплям раствора стрептомицина добавляют 3 капли раствора едкого натра, 3 капли сс-нафтола и 3—9 капель раствора гипобромида натрия. Жидкость окрашивается в красный или розово-красный цвет.
Вывод______________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Качественные реакции на тетрациклин
С хлорным железом. Тетрациклин с хлорным железом образует соединения типа фенолятов железа.
Реактивы:
1) раствор тетрациклина, 0,5% раствор; 2) хлорное железо, 5% раствор.
Ход работы К 10 каплям раствора тетрациклина прибавляют 1—2 капли раствора хлорного железа. Появляется коричневая окраска.
Вывод______________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
С концентрированной серной кислотой. При добавлении концентрированной серной кислоты к сухому препарату тетрациклина появляется красное окрашивание в результате ее водоотнимающего действия.
Реактивы: 1.тетрациклин, порошок; 2.концентрированная серная кислота.
Ход работы: к 5—10 мг порошка тетрациклина прибавляют 10 капель концентрированной серной кислоты. Жидкость окрашивается в красный цвет
Вывод______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
