- •Федеральное агентство по образованию российской федерации
- •I.Тема: Вводное занятие Лабораторная работа № 1. Особенности работы в биохимической лаборатории и инструктаж по технике безопасности:
- •II.Тема: строение и свойства белков
- •Лабораторная работа № 2. Качественные реакции
- •Качественные реакции на белки и аминокислоты
- •Биуретовая реакция на пептидные связи
- •Нингидриновая реакция на -аминокислоты
- •Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты
- •Реакция Миллона на тирозин
- •Реакция Фоля на цистеин
- •Лабораторная работа № 3 устройство и Принцип работы фотоэлектРоколориметра (фэк).
- •Устройство колориметра фотоэлектроколориметра ( фэк-2 )
- •Общий вид прибора
- •Измерение оптической плотности на кфк-2
- •Количественное определение белка Биуретовый метод
- •Лабораторная работа № 4 Реакции осаждения белков
- •Осаждение белков при кипячении
- •Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Осаждение белков органическими кислотами
- •Растворимость белков
- •Очистка белков методом диализа
- •Лабораторная работа № 5 Разделение белков и определение их молекулярной массы методом гель – хроматографии
- •III.Тема: ферменты
- •Лабораторная работа № 6
- •Свойства ферментов
- •Влияние температуры на активность ферментов
- •Влияние рН среды на активность ферментов
- •Специфичность действия амилазы и сахаразы
- •Лабораторная работа № 6 Регуляция активности ферментов Изучение аллостерических свойств а-амилазы
- •Лабораторная работа № 7 Количественное определение активности фермента Действие амилазы на крахмал
- •IV.Тема нуклеиновые кислоты Лабораторная работа № 8 Кислотный гидролиз нуклеопротеинов.
- •V.Тема: биологическое окисление Лабораторная работа № 9 Обнаружение над в дрожжах
- •Лабораторная работа № 10 Обнаружение каталазы в крови
- •Лабораторная работа № 11 Сопоставление овп рибофлавина.
- •VI.Тема: углеводы
- •Лабораторная работа № 13
- •Качественные реакции на углеводы
- •Реакция Фелинга на моносахариды
- •Реакция Селиванова на фруктозу
- •Реакция Фелинга на дисахариды
- •Гидролиз сахарозы и определение продуктов гидролиза
- •Реакция Фелинга с крахмалом
- •Реакция крахмала с йодом.
- •Лабораторная работа № 14 Обнаружение фосфотриоз в мышечной ткани
- •Лабораторная работа № 15 Обнаружение дегидрогеназы 3-фосфоглицеринового альдегида
- •Обнаружение молочной кислоты
- •Лабораторная работа № 16 Проба Бенедикта на глюкозу
- •Ход работы
- •VII.Гормоны.
- •Лабораторная работа № 17
- •Качественные реакции на гормоны
- •Реакция на адреналин с хлорным железом
- •Биуретовая реакция и реакция Фоля на инсулин
- •Лабораторная работа № 18 Флюоресценция продуктов окисления адреналина
- •Диазореакция на адреналин
- •VIII.Витамины
- •Лабораторная работа № 20
- •Качественные реакции на витамины.
- •Реакция восстановления витамина в2.
- •Феррихлоридная проба на витамин в6.
- •На витамин с.
- •На витамин а
- •На витамин d
- •На викасол
- •На витамин е
- •IX.Липиды Влияние желчи на активность липазы
- •Эмульгирование жира
- •Качественные реакции на холестерин
- •Качественная реакция на кетоновые тела
- •Качественные реакции на желчные кислоты
- •X.Тема нуклеиновые кислоты Определение мочевой кислоты в моче
- •Теоретические основы пцр
- •XI.Тема синтез белка Количественное определение днк колориметрическим методом
- •Количественное определение рнк колориметрическим методом
- •Спектрофотометрическое определение суммарного содержания нуклеиновых кислот
- •Определение активности рибонуклеазы
- •Определение активности дезоксирибонуклеазы
- •XII.Тема биохимия Бензидиновая проба на кровь
- •Получение кристаллов гемина из гемоглобина (проба Тейхмана)
- •Визуальное определение агрегации тромбоцитов
- •Время свертывания по ли-уайту
- •Выделение холестерина из мозговой ткани
- •Выделение фосфатидов из мозговой ткани
- •Оценка транспортной функции сывороточного альбумина
- •Обнаружение пенициллина реакцией с гидроксиламином
- •Нитропруссидная реакция на пенициллин
- •Мальтольная реакция на стрептомицин
- •Реакция Сакагучи на гуанидиновую группировку стрептомицина
- •Качественные реакции на тетрациклин
- •Качественные реакции на кортизол
- •Обнаружение пиридоксалевой кислоты в моче
Время свертывания по ли-уайту
Оборудование:
силиконизированные и несиликонизированные пробирки;
секундомер;
водяная баня на 37°С;
стеклянные палочки.
Ход работы: пробирки нагревают до 37 СС, В силиконизиро-ванную пробирку до метки 2 мл набирают кровь из вены. При появлении в пробирке первых капель крови включают секундомер. 1 мл из силиконизированной пробирки переливают без вспенивания в несиликонизированную пробирку до метки 1 мл. Через 2 мин, а затем через каждые 30 с пробирки легко наклоняют, не встряхивая, на 50—60° и следят, натекает ли кровь на стенки пробирки. Пока кровь не свернулась, она растекается по стенкам. Момент свертывания замечают по секундомеру и записывают.
Затем стеклянной палочкой отделяют сгусток от стенки пробирки. Компактный сгусток при наклоне пробирки легко скользит по ее стенкам.
В норме у людей от 15 до 60 лет время свертывания в несиликонизированновой пробирке при 37 °С 5—7 мин, при 20—25 °С — 6—11 мин, в силиконизированной — соответственно — 15—25 и 15—35 мин.
Результат: ______________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод______________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Выделение холестерина из мозговой ткани
Ход работы. Мозговую ткань в количестве 0,5 г растирают •в фарфоровой ступке с двойным по объему или тройным по весу количеством гипса. Полученную массу намазывают тонким слоем на стеклянную пластинку и высушивают на воздухе или в сушильном шкафу. Сухую массу снимают скальпелем и растирают в фарфоровой ступке до гомогенного порошка. Порошок переносят в сухую пробирку, добавляют 3 мл хлороформа и, закрыв пробирку корковой пробкой, взбалтывают 5—10 минут. По окончании встряхивания жидкость фильтруют через маленький складчатый фильтр, смоченный хлороформом. С фильтратом проделывают цветные реакции на холестерин
Результат: ______________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод______________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Выделение фосфатидов из мозговой ткани
Ход работы. Мозговую ткань в количестве 0,5—1 г помещают в пробирку, добавляют 3—5 мл горячего спирта и нагревают на водяной бане при температуре 50—60° в течение 10—15 минут, тщательно перемешивая содержимое стеклянной палочкой. По окончании экстракции жидкость фильтруют в сухую пробирку и с фильтратом проделывают реакцию на лецитин.
В широкую пробирку наливают 10 капель спиртового раствора лецитина
и добавляют 10 или 20 капель 10% NaOH и кипятят 3-5 минут. В результате гидролиза лецитин распадается на составные части. Фиксируют запах.
Результат: ______________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод______________________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
