Качественные реакции на холестерин

По химической природе холестерин является циклическим ненасыщенным вторичным спиртом. В основе реакций лежит его способность образовывать окрашенные соединения в присутствии серной кислоты и уксусного ангидрида. Этой способностью пользуются для количественного определения холестерина в крови.

Реактивы:

1. холестерин, 1% раствор в хлороформе;

2. серная кислота, концентрированная;

3. уксусный ангидрид.

4. 1% хлороформный раствор;

5. бромная вода.

6. ледяная уксусная кислота.

Ход работы

Реакция Сальковского. Под действием концентрированной серной кислоты происходит дегидратация холестерина, конденсация образовавшихся продуктов в виде непредельных углеводородов, соединяющихся с образованием окрашенных продуктов. В сухую пробирку вносят 10 капель раствора холестерина и осторожно по стенке пробирки наслаивают 0,5 мл серной кислоты. На границе жидкостей появляется красное кольцо.

Реакция Либермана—Бурхарда. Раствор холестерина в хлороформе дает с уксусным ангидридом и концентрированной серной кислотой красное окрашивание, переходящее затем в синее и зеленое. В пробирку вносят 1 каплю хлороформного раствора холестерина, добавляют I каплю уксусного ангидрида и 1 каплю концентрированной серной кислоты. Развивается синяя, а затем зеленая окраска.

Обнаружение ненасыщенной связи в молекуле холестерина. Ненасыщенную связь в молекуле холестерина можно обнаружить по обесцвечиванию бромной воды.

В пробирку вносят 10—15 капель хлороформного раствора холестерола, добавляют 2 капли бромной воды. Происходит обесцвечивание бромной воды при встряхивании содержимого пробирки.

Получение кристаллов холестерида. Холестерин при взаимодействии с кислотами образует сложные эфиры — стероиды.

В пробирку вносят 10 капель уксусной кислоты и на кончике лопатки немного холестерина. Нагревают до кипения. Охладив пробирку на воздухе, наблюдают появление осадка. Несколько капель полученной взвеси переносят на предметное стекло, покрывают покровным и исследуют под микроскопом кристаллы ацетилхолестерида.

Результат: ______________________________________________________

_____________________________________________________________________

Вывод______________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________

Качественная реакция на кетоновые тела

К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная и (3-гидро-ксимасляная кислоты. Содержание в крови; ацетон — 2%, ацетоуксусная кислота — 20% и - гид роксимасляная кислота — 78%. Кетоновые тела появляются в моче (кетонурия) при увеличении их содержания в крови (кетонемия). В норме с мочой выделяется минимальное количество кетоновых тел (20—50 мг/сут), которое не обнаруживается обыкновенными качественными пробами.

Кетонурия появляется при сахарном диабете, голодании, исключении из пищи углеводов. Ацетон и ацетоуксусная кислота в щелочной среде образуют с нитропруссидом оранжево-красное окрашивание (проба Люголя). После подкисления концентрированной уксусной кислотой образуется соединение вишневого цвета.

Реактивы, исследуемый материал:

1. раствор нитропруссида натрия — 100 г/л;

2. концентрированная уксусная кислота;

3. раствор №ОН — 100 г/л;

4. моча.

Ход работы

В пробирку вносят 1 каплю мочи, 1 каплю раствора едкого натра и I каплю свежеприготовленного нитропруссида натрия. Наблюдают появление оранжево-красного окрашивания. Добавляют 3 капли концентрированной уксусной кислоты — появляется вишневое окрашивание.

Результат: ______________________________________________________

_____________________________________________________________________

Вывод______________________________________________________________

__________________________________________________________________________________________________________________________________________