- •Федеральное агентство по образованию российской федерации
- •I.Тема: Вводное занятие Лабораторная работа № 1. Особенности работы в биохимической лаборатории и инструктаж по технике безопасности:
- •II.Тема: строение и свойства белков
- •Лабораторная работа № 2. Качественные реакции
- •Качественные реакции на белки и аминокислоты
- •Биуретовая реакция на пептидные связи
- •Нингидриновая реакция на -аминокислоты
- •Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты
- •Реакция Миллона на тирозин
- •Реакция Фоля на цистеин
- •Лабораторная работа № 3 устройство и Принцип работы фотоэлектРоколориметра (фэк).
- •Устройство колориметра фотоэлектроколориметра ( фэк-2 )
- •Общий вид прибора
- •Измерение оптической плотности на кфк-2
- •Количественное определение белка Биуретовый метод
- •Лабораторная работа № 4 Реакции осаждения белков
- •Осаждение белков при кипячении
- •Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Осаждение белков органическими кислотами
- •Растворимость белков
- •Очистка белков методом диализа
- •Лабораторная работа № 5 Разделение белков и определение их молекулярной массы методом гель – хроматографии
- •III.Тема: ферменты
- •Лабораторная работа № 6
- •Свойства ферментов
- •Влияние температуры на активность ферментов
- •Влияние рН среды на активность ферментов
- •Специфичность действия амилазы и сахаразы
- •Лабораторная работа № 6 Регуляция активности ферментов Изучение аллостерических свойств а-амилазы
- •Лабораторная работа № 7 Количественное определение активности фермента Действие амилазы на крахмал
- •IV.Тема нуклеиновые кислоты Лабораторная работа № 8 Кислотный гидролиз нуклеопротеинов.
- •V.Тема: биологическое окисление Лабораторная работа № 9 Обнаружение над в дрожжах
- •Лабораторная работа № 10 Обнаружение каталазы в крови
- •Лабораторная работа № 11 Сопоставление овп рибофлавина.
- •VI.Тема: углеводы
- •Лабораторная работа № 13
- •Качественные реакции на углеводы
- •Реакция Фелинга на моносахариды
- •Реакция Селиванова на фруктозу
- •Реакция Фелинга на дисахариды
- •Гидролиз сахарозы и определение продуктов гидролиза
- •Реакция Фелинга с крахмалом
- •Реакция крахмала с йодом.
- •Лабораторная работа № 14 Обнаружение фосфотриоз в мышечной ткани
- •Лабораторная работа № 15 Обнаружение дегидрогеназы 3-фосфоглицеринового альдегида
- •Обнаружение молочной кислоты
- •Лабораторная работа № 16 Проба Бенедикта на глюкозу
- •Ход работы
- •VII.Гормоны.
- •Лабораторная работа № 17
- •Качественные реакции на гормоны
- •Реакция на адреналин с хлорным железом
- •Биуретовая реакция и реакция Фоля на инсулин
- •Лабораторная работа № 18 Флюоресценция продуктов окисления адреналина
- •Диазореакция на адреналин
- •VIII.Витамины
- •Лабораторная работа № 20
- •Качественные реакции на витамины.
- •Реакция восстановления витамина в2.
- •Феррихлоридная проба на витамин в6.
- •На витамин с.
- •На витамин а
- •На витамин d
- •На викасол
- •На витамин е
- •IX.Липиды Влияние желчи на активность липазы
- •Эмульгирование жира
- •Качественные реакции на холестерин
- •Качественная реакция на кетоновые тела
- •Качественные реакции на желчные кислоты
- •X.Тема нуклеиновые кислоты Определение мочевой кислоты в моче
- •Теоретические основы пцр
- •XI.Тема синтез белка Количественное определение днк колориметрическим методом
- •Количественное определение рнк колориметрическим методом
- •Спектрофотометрическое определение суммарного содержания нуклеиновых кислот
- •Определение активности рибонуклеазы
- •Определение активности дезоксирибонуклеазы
- •XII.Тема биохимия Бензидиновая проба на кровь
- •Получение кристаллов гемина из гемоглобина (проба Тейхмана)
- •Визуальное определение агрегации тромбоцитов
- •Время свертывания по ли-уайту
- •Выделение холестерина из мозговой ткани
- •Выделение фосфатидов из мозговой ткани
- •Оценка транспортной функции сывороточного альбумина
- •Обнаружение пенициллина реакцией с гидроксиламином
- •Нитропруссидная реакция на пенициллин
- •Мальтольная реакция на стрептомицин
- •Реакция Сакагучи на гуанидиновую группировку стрептомицина
- •Качественные реакции на тетрациклин
- •Качественные реакции на кортизол
- •Обнаружение пиридоксалевой кислоты в моче
IX.Липиды Влияние желчи на активность липазы
Принцип метода. Если к молоку добавить немного липазы и подщелочить полученную смесь до розовой окраски по фенолфталеину, то при стоянии в водяной бане при 37°С жидкость постепенно обесцвечивается. Это объясняется тем, что под действием липазы освобождаются высшие жирные кислоты и рН смещается в сторону более низких значений. Обесцвечивание в этом опыте ускоряется при добавлении желчи. Это объясняется тем, что липаза активируется солями желчных кислот.
Реактивы:
панкреатин (вытяжка из поджелудочной железы, содержащая липазу), 5% раствор;
фенолфталеин, 0,5% спиртовой раствор;
3)0,05 и. раствор №ОН;
молоко, прокипяченное и предварительно разведенное дистиллированной водой в соотношении 1:1.
Ход работы: В 2 пробирки вносят по 1 мл молока и по 1 капле раствора фенолфталеина. В каждую пробирку добавляют по каплям раствор гидроксида натрия до слабо-розовой окраски по фенолфталеину. В каждую пробирку вносят по 2 капли вытяжки липазы, а в пробирку 1, кроме того, и каплю желчи. Пробирки помещают в водяную баню при 37 С и отмечают время обесцвечивания фенолфталеина в опыте с желчью и без нее.
Результат: ______________________________________________________
_____________________________________________________________________
Вывод______________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________
Эмульгирование жира
Принцип метода Жиры, чтобы подвергнуться расщеплению липазами в желудочно-кишечном тракте, должны быть предварительно эмульгированы. Основными эмульгаторами жира в пищеварительном тракте являются желчные кислоты. Белки, мыла, соли угольной кислоты, содержащиеся в некотором количестве в двенадцатиперстной кишке, также эмульгируют жиры.
Взбалтывая жир с водой, можно наблюдать образование расслаивающейся, нестойкой эмульсии. Добавляя поверхностно-активные вещества, можно получить стойкую эмульсию. Эмульгаторы легко адсорбируются на поверхности раздела двух фаз, образуя тончайшую пленку, которая препятствует слиянию капелек эмульсии.
Ход работы: в 5 пробирок наливают по 3 капли растительного масла. В первую пробирку добавляют 20 капель дистиллированной воды, во вторую — 20 капель желчи, в третью — 20 капель 1 % раствора яичного белка, в четвертую — 20 капель I % раствора мыла, а в пятую — 20 капель 1 % раствора карбоната натрия. Все пробирки тщательно взбалтывают. Через 5 мин оценивают сохранение эмульсии.
Оценка |
Мыло |
Вода |
Желчь |
Белок |
Сода |
Стабильность эмульсии |
|
|
|
|
|
Степень дисперсности эмульсии |
|
|
|
|
|
Вывод______________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________
