- •Федеральное агентство по образованию российской федерации
- •I.Тема: Вводное занятие Лабораторная работа № 1. Особенности работы в биохимической лаборатории и инструктаж по технике безопасности:
- •II.Тема: строение и свойства белков
- •Лабораторная работа № 2. Качественные реакции
- •Качественные реакции на белки и аминокислоты
- •Биуретовая реакция на пептидные связи
- •Нингидриновая реакция на -аминокислоты
- •Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты
- •Реакция Миллона на тирозин
- •Реакция Фоля на цистеин
- •Лабораторная работа № 3 устройство и Принцип работы фотоэлектРоколориметра (фэк).
- •Устройство колориметра фотоэлектроколориметра ( фэк-2 )
- •Общий вид прибора
- •Измерение оптической плотности на кфк-2
- •Количественное определение белка Биуретовый метод
- •Лабораторная работа № 4 Реакции осаждения белков
- •Осаждение белков при кипячении
- •Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Осаждение белков органическими кислотами
- •Растворимость белков
- •Очистка белков методом диализа
- •Лабораторная работа № 5 Разделение белков и определение их молекулярной массы методом гель – хроматографии
- •III.Тема: ферменты
- •Лабораторная работа № 6
- •Свойства ферментов
- •Влияние температуры на активность ферментов
- •Влияние рН среды на активность ферментов
- •Специфичность действия амилазы и сахаразы
- •Лабораторная работа № 6 Регуляция активности ферментов Изучение аллостерических свойств а-амилазы
- •Лабораторная работа № 7 Количественное определение активности фермента Действие амилазы на крахмал
- •IV.Тема нуклеиновые кислоты Лабораторная работа № 8 Кислотный гидролиз нуклеопротеинов.
- •V.Тема: биологическое окисление Лабораторная работа № 9 Обнаружение над в дрожжах
- •Лабораторная работа № 10 Обнаружение каталазы в крови
- •Лабораторная работа № 11 Сопоставление овп рибофлавина.
- •VI.Тема: углеводы
- •Лабораторная работа № 13
- •Качественные реакции на углеводы
- •Реакция Фелинга на моносахариды
- •Реакция Селиванова на фруктозу
- •Реакция Фелинга на дисахариды
- •Гидролиз сахарозы и определение продуктов гидролиза
- •Реакция Фелинга с крахмалом
- •Реакция крахмала с йодом.
- •Лабораторная работа № 14 Обнаружение фосфотриоз в мышечной ткани
- •Лабораторная работа № 15 Обнаружение дегидрогеназы 3-фосфоглицеринового альдегида
- •Обнаружение молочной кислоты
- •Лабораторная работа № 16 Проба Бенедикта на глюкозу
- •Ход работы
- •VII.Гормоны.
- •Лабораторная работа № 17
- •Качественные реакции на гормоны
- •Реакция на адреналин с хлорным железом
- •Биуретовая реакция и реакция Фоля на инсулин
- •Лабораторная работа № 18 Флюоресценция продуктов окисления адреналина
- •Диазореакция на адреналин
- •VIII.Витамины
- •Лабораторная работа № 20
- •Качественные реакции на витамины.
- •Реакция восстановления витамина в2.
- •Феррихлоридная проба на витамин в6.
- •На витамин с.
- •На витамин а
- •На витамин d
- •На викасол
- •На витамин е
- •IX.Липиды Влияние желчи на активность липазы
- •Эмульгирование жира
- •Качественные реакции на холестерин
- •Качественная реакция на кетоновые тела
- •Качественные реакции на желчные кислоты
- •X.Тема нуклеиновые кислоты Определение мочевой кислоты в моче
- •Теоретические основы пцр
- •XI.Тема синтез белка Количественное определение днк колориметрическим методом
- •Количественное определение рнк колориметрическим методом
- •Спектрофотометрическое определение суммарного содержания нуклеиновых кислот
- •Определение активности рибонуклеазы
- •Определение активности дезоксирибонуклеазы
- •XII.Тема биохимия Бензидиновая проба на кровь
- •Получение кристаллов гемина из гемоглобина (проба Тейхмана)
- •Визуальное определение агрегации тромбоцитов
- •Время свертывания по ли-уайту
- •Выделение холестерина из мозговой ткани
- •Выделение фосфатидов из мозговой ткани
- •Оценка транспортной функции сывороточного альбумина
- •Обнаружение пенициллина реакцией с гидроксиламином
- •Нитропруссидная реакция на пенициллин
- •Мальтольная реакция на стрептомицин
- •Реакция Сакагучи на гуанидиновую группировку стрептомицина
- •Качественные реакции на тетрациклин
- •Качественные реакции на кортизол
- •Обнаружение пиридоксалевой кислоты в моче
Феррихлоридная проба на витамин в6.
Принцип метода. Бесцветный раствор витамина В6 приобретает красную окраску в присутствии хлорного железа; реакция обусловлена образованием комплексной соли типа фенолята железа красного цвета.
Реактивы:
Пиридоксин, 5 % раствор.
Железо хлорное, 5 % раствор.
Ход работы: В пробирке смешивают 5 капель 5% водного раствора витамина В 6 и 1 каплю 5 % раствора хлорного железа и встряхивают ее. Смесь окрашивается в красный цвет.
Результат: __________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод_______________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
На витамин с.
Принцип метода. Обнаружение аскорбиновой кислоты основано на ее способности вступать в окислительно-восстановительные реакции.
Реактивы:
Метиленовый синий, 0,01 % раствор
Натр углекислый, 10 % раствор
Витамин С, 1 % раствор
Вода
Раствор Люголя (0,1 % раствор йода в 0,2 % растворе йодида калия)
Ход работы:
Реакция с метиленовым синим.
В две пробирки вносят по 1 капле 0,01 % раствора метиленового синего, по 1 капле 10% раствора соды. В одну из них добавляют несколько капель раствора аскорбиновой кислоты, в другую – 1 мл воды. Обе пробирки нагревают и регистрируют результат. (Происходит обесцвечивание в пробирке с аскорбиновой кислотой).
Реакция с раствором Люголя.
В две пробирки вносят по 10 капель дистиллированной воды и по 2 капли раствора Люголя. В одну пробирку добавляют 10 капель дистиллированной воды, в другую 10 капель раствора аскорбиновой кислоты.
В пробирке с аскорбиновой кислотой раствор Люголя обесцвечивается в результате восстановления йода до йодисто-водородной кислоты.
Результат: ___________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод_______________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
На витамин а
Принцип метода. Витамин А при взаимодействии с серной кислотой окрашивается в красно-фиолетовый или красно-бурый цвет, при взаимодействии с хлорным железом – в желто-зеленый.
Реактивы:
1) масляный раствор ретинола ацетата — 34,4 г/л; 2) концентрированная серная кислота; 3) хлороформ; 4) треххлористая сурьма, 23% хлороформный раствор.
Ход работы
Реакция на витамин А сконцентрированной серной кислотой. В сухую пробирку вносят 1 каплю раствора ретинола ацетата и 5 капель хлороформа, перемешивают и добавляют 1 каплю концентрированной серной кислоты. Отмечают результат реакции.
Реакция на витамин А с хлорным железом. В сухую пробирку вносят 1 каплю ретинола ацетата и 5 капель хлороформа. Перемешивают, добавляют 3 капли хлорида железа. Отмечают результат реакции.
Реакция на витамин А с треххдористой сурьмой. В сухую пробирку вносят I каплю раствора ретинола ацетата и добавляют 2—3 капли 23% хлороформного раствора треххлористой сурьмы. При смешивании содержимое пробирки окрашивается в синий цвет.
Результат: ___________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________
Вывод_______________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
