Ход работы

Печень животного быстро извлекают, разрезают на тонкие пласты, которые немедленно опускают в стакан с кипящим физиологическим раствором для инактивации фосфорилазы (10—15 мин). Такая печень может храниться в морозильной камере до 1,5 мес.

Отвешивают по 0,5 г печени от сытого и голодного животного, помещают в ступки и заливают по 3,0 мл 5% раствора ТХУ и растирают пестиком 10 мин. К экстрактам добавляют по 3 мл дистиллированной воды и полученные суспензии фильтруют в другие пробирки.

С фильтратами выполняют качественные реакции на гликоген.

3.1.В одну пробирку наливают 1 мл дистиллированной воды, во вторую и третью — по I мл исследуемых фильтратов. После этого в каждую пробирку добавляют по 1—2 капли раствора Люголя и сравнивают окраску.

В три пробирки наливают по 10 капель фильтрата, полученного из печени сытого животного, и проделывают реакцию осаждения. Для этого в первую пробирку приливают 10 капель этанола, во вторую — 10 капель 10% раствора ацетата свинца, в третью насыпают порошок сульфата аммония до полного насыщения и наблюдают, в какой из них выпадет осадок. Те же реакции выполняют с фильтратом, полученным из печени голодавшего животного.

Результат: ___________________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод_______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

VII.Гормоны.

Лабораторная работа № 17

Качественные реакции на гормоны

Реакция на адреналин с хлорным железом

Принцип метода: Адреналин обладает слабощелочной реакцией, легко окисляется на воздухе с образованием адренохрома, вследствие чего раствор с хлорным железом окрашивается в зеленый цвет.

Реакция с хлорным железом характерна для пирокатехинового кольца, входящего в молекулу адреналина.

Реактивы, исследуемый материал:

1. раствор адреналина — 1 г/л;

2. раствор хлорного железа -10 г/л;

3. раствор едкого натра — 100 г/л.

Ход работы В пробирку наливают 10 капель раствора адреналина и добавляют 1 каплю хлорного железа. Наблюдается зеленое окрашивание вследствие присутствия пирокатехина в молекуле адреналина. При добавлении 1 капли раствора едкого натра наблюдается вишнево-красное окрашивание.

Результат: ___________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод_______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Биуретовая реакция и реакция Фоля на инсулин

Принцип метода: С помощью цветных реакций на белки можно доказать, что инсулин- это белок, имеющий в своем составе SH-группы цистеина.

Ход работы:

1. В пробирку внести 10 капель раствора инсулина, 5 капель NaOH и 1 каплю CuSO₄. Отмечают изменение окраски.

2. В пробирку внести 5 капель раствора инсулина, 5 капель реактива Фоля. Кипятят 2 минуты. Отмечают результат.

Результат: ___________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Вывод_______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________